一、溴氰菊酯对大鼠脑组织G蛋白转换的影响（论文文献综述）
司桂云[1]（2016）在《基于鳃和脑部AChE分析的环境胁迫下斑马鱼行为响应机制研究》文中认为随着工业经济的迅速发展,水环境污染问题日趋严重,成为当代人们关注的焦点。当前,重金属及农药是应用范围广、污染区域大的两种污染物。镉是毒性仅次于汞的一种重金属污染物,对水生生物具消化、免疫、生殖机能的毒性效应。溴氰菊酯属于典型的拟除虫菊酯类农药,影响信号通路。斑马鱼是国际通用的模式生物,被广泛应用于生态毒理学研究中。乙酰胆碱酯酶（Acetyl cholinesterase,AChE）是神经传导过程中一种关键酶,水生生物中AChE活性变化可作为水体污染的生物标志物。水生生物为适应外界环境胁迫在外在行为上也有所改变,AChE与外在行为间或许存在着某种响应,本文对AChE进行研究为了实现对污染物在生物个体中不同层次的生态毒理学评价,试图对影响外在行为变化的内在作用机制进行探讨。本文选取氯化镉和溴氰菊酯为污染物,以斑马鱼为受试生物,测定不同浓度不同配比污染物暴露对斑马鱼脑和鳃AChE的影响,并对AChE与行为强度进行相关性分析,研究结果表明:1、急性毒性实验中氯化镉和溴氰菊酯对斑马鱼LC50-48h分别为42.6mg/L、5.2μg/L。不同污染物对斑马鱼的毒性作用存在很大差异,这可能是由于两种污染物对斑马鱼毒性作用机制不同导致的。氯化镉通过鳃直接吸收或摄食,对水生生物产生毒害作用。溴氰菊酯对斑马鱼属于剧毒,影响神经系统的信号传导,神经肌肉痉挛、运动失调,导致麻痹甚至死亡。斑马鱼死亡率和污染物浓度呈正相关。2、两种污染物共同暴露48h,斑马鱼鳃AChE活性整体呈下降趋势,两种污染物不同配比对鳃AChE抑制程度不尽相同。随着暴露浓度的提高,对鳃AChE抑制程度增加,在较低浓度的0.1TU暴露时,鳃AChE活性波动比较大,抑制率较低;在1TU和2TU实验组鳃AChE在0.5h-1h被诱导升高,随后降到很低水平,后面出现小幅回升现象,这是斑马鱼为适应外界环境作出的调整。AChE受抑制程度与暴露时间、污染物剂量均有关。3、两种污染物共同暴露48h对斑马鱼脑AChE的影响与鳃有相同之处,均是1TU、2TU浓度组AChE抑制率明显高于0.1TU浓度组,随着暴露时间的延长,AChE活性整体呈降低趋势。整体上脑和鳃AChE活性趋势均符合生物逐级行为模型。4、斑马鱼行为强度与AChE活性相关性分析:浓度0.1TU配比为10:0时,鳃组织AChE抑制与行为强度有较强的相关性;2TU配比为3:7鳃AChE抑制与行为强度具有一定的相关性,但强度不高。配比7:3、3:7和0:10,浓度0.1TU脑组织AChE抑制与行为强度均具有相关性;1TU配比0:10具有显着相关性。脑AChE活性变化趋势与行为变化更为接近。两种作用机制不同的污染物共同作用对斑马鱼脑和鳃AChE活性变化的研究较少,将AChE与外在行为变化结合分析也鲜见报道,本文的初步研究结果旨在为以后不同污染物对斑马鱼胆碱能系统和外在行为研究提供理论基础。结合多项指标分析水生生物毒性作用的内在机制,在突发性水污染事件中判断污染类型与程度中起到重要作用,也更有利于水质环境在线监测。
孙艳[2]（2012）在《视蛋白基因参与蚊抗药性机制的研究》文中研究指明杀虫剂的连续、大量使用导致了虫媒抗药性的发生和发展，进而加剧了虫媒病传播的恶化趋势。鉴定新的抗药性基因、阐明抗药性机制是有效治理虫媒抗药性的前提和必要条件。本研究根据已知的埃及伊蚊（Aedes aegypti）和淡色库蚊（Culex pipienspallens）Opsin基因序列，设计简并引物，从白纹伊蚊（Ae. albopictus）C6/36细胞中扩增出白纹伊蚊Opsin基因的开放阅读框（ORF）序列，T/A克隆入pCR2.1载体并测序。获得白纹伊蚊Opsin基因ORF序列为1122bp，编码373个氨基酸（NCBI/GenBank JQ354934，2012）。用BlastX软件将该基因推导编码的氨基酸序列与蛋白质公共数据库Swissprot分析，用ClustalW软件作序列比对和聚类分析。推导的氨基酸序列与埃及伊蚊、冈比亚按蚊（Anopheles gambiae）、淡色库蚊的视蛋白分别具有95%、91%和87%以上的同源性。将白纹伊蚊Opsin转染白纹伊蚊C6/36细胞，使其在蚊细胞中高表达，结果发现，在溴氰菊酯浓度为101.5μg/mL，102.0μg/mL和102.5μg/mL时，opsin转染组细胞的存活率分别比对照组增高了22%，14%，21%（p<0.05）。采用siRNA技术干涉白纹伊蚊C6/36细胞的Opsin基因，通过实时定量PCR实验验证，干涉Opsin基因的效率为81%，在溴氰菊酯浓度为101.5μg/mL，102.0μg/mL和102.5μg/mL时，干涉组细胞的存活率分别比对照组下降15%、16%和21%（p <0.05）。结果进一步证实，白纹伊蚊Opsin与蚊溴氰菊酯抗性有关，是一个新的杀虫剂抗性基因。为进一步研究Opsin参与蚊溴氰菊酯抗性形成的机制，本研究在蚊细胞中将Opsin分别高表达和低表达后，采用实时定量PCR法检测与Opsin相关的GPCR通路中Arrestin、Gqα基因及代谢抗性基因CYP6A1的表达，同时检测了PLC酶活性的变化。结果显示，与对照组相比，Opsin基因高表达后，Arrestin基因表达无差异，Gqα基因、CYP6A1基因分别高表达12倍和99倍，PLC酶活性增高了2.56倍（p<0.05）；Opsin基因低表达后，Arrestin基因表达无差异，Gqα基因、CYP6A1基因表达分别降低了82%和81%，PLC酶活性降低了63%（p<0.05）。以上结果提示，Opsin基因可能通过影响Gqα基因表达及PLC酶活性，调节代谢酶基因CYP6A1的表达，从而促进代谢酶对杀虫剂的降解而对蚊细胞有保护作用。进一步采用实时定量PCR技术，分析Opsin、Arrestin、Gqα、PLC基因在蚊活体抗性品系和敏感品系中的表达差异。结果蚊活体与蚊细胞一致，Opsin、Arrestin、Gqα、PLC基因在淡色库蚊抗性蚊中的表达分别是敏感蚊的10.42、5.64、3.34、2.16倍（p<0.05）。Western blotting技术检测发现Opsin蛋白在无锡、塘口抗性蚊中较相应敏感蚊高表达。本实验室邹萍等在研究Arrestin基因与蚊溴氰菊酯抗性的关系时发现，当Arrestin基因在蚊细胞内高表达后，溴氰菊酯处理后的细胞存活率、Opsin基因与CYP6A1基因表达均增高；Arrestin基因低表达后，细胞存活率、Opsin基因与CYP6A1基因表达均降低。综合以上结果提示，GPCR信号通路可能作为一种新的机制参与了蚊抗药性的形成，即Arrestin可调控Opsin的表达，进而通过调控Gqα及PLC酶活性，影响CYP6A1基因的表达而导致蚊对溴氰菊酯抗性。以淡色库蚊活体为研究对象，采用实时定量PCR技术，研究不同地区溴氰菊酯抗性和敏感蚊、对溴氰菊酯不同抗性水平的蚊、对不同杀虫剂抗性蚊中Opsin基因的表达水平。结果显示，无锡抗性蚊中Opsin基因表达是敏感蚊的5.81倍（p<0.05），用接触筒法区分的南京抗性蚊中Opsin基因表达是敏感蚊的4.53倍（p<0.05）。经溴氰菊酯逐代筛选的塘口抗性蚊（LC50分别为0.05、0.1、0.5、0.55ppm）中Opsin基因表达分别是敏感蚊（LC500.02ppm）的1.30、2.50、3.99、10.42倍（p<0.05）。济宁对氯氰菊酯抗性蚊、对DDVP抗性蚊、对残杀威抗性蚊中Opsin基因的表达分别是敏感蚊的4.46、10.00、23.05倍（p<0.05）。分别提取塘口、无锡对溴氰菊酯抗性蚊和敏感蚊的全蛋白，采用Western blotting技术检测Opsin、Arrestin蛋白表达差异，结果发现Opsin蛋白在塘口、无锡抗性蚊中较相应敏感蚊高表达1.94及1.68倍， Arrestin蛋白在塘口、无锡抗性蚊中的表达量分别是相应敏感蚊的1.20及1.10倍。以上结果提示，Opsin基因在杀虫剂抗性蚊中高表达是一种普遍现象，其有望作为蚊抗药性检测的潜在靶标，值得进一步研究。
黄晓薇[3]（2010）在《泛素—蛋白酶体途径对拟除虫菊酯神经毒性的影响及机制初探》文中指出拟除虫菊酯（pyrethroids, Py）是继有机氯、有机磷和氨基甲酸酯之后迅速发展起来的新型农药,根据化学结构可分为不含氰基的Ⅰ型如联苯菊酯（bif enthrin, BF）和含有氰基的Ⅱ型如溴氰菊酯（deltamethrin, DM）。它们具有选择性毒性、哺乳动物体内代谢和排泄迅速、环境残留较少等特点。自上世纪70年代以来,拟除虫菊酯已经被广泛应用,而作为一种神经毒物,其神经毒性日益引起普遍关注。本室对DM的神经毒性的研究已有近20年的历史,发现DM染毒可使大鼠脑组织氧化损伤,神经细胞Ca2+内流增加,线粒体膜电位下降,细胞色素C释放增加以及caspase-3活力改变,对DM神经毒性的了解已有长足的进步,但目前确切的神经毒作用机制仍未十分明了。自上世纪初始人们关注的热点主要集中在蛋白质的化学结构和生物学功能,以及蛋白质的合成。而对于蛋白质的降解过程关注较少。2004年诺贝尔化学奖授予科学家以表彰他们在蛋白质降解调节机制的重大发现,这个蛋白质降解机制即泛素-蛋白酶体途径（ubiquitin-proteasome pathway, UPP）。它是近年来受到重视的调节蛋白质降解与功能的重要系统,其主要功能在于降解细胞内半衰期较短的调节蛋白和结构异常、错构或受损伤的蛋白。UPP参与许多细胞生命过程,包括细胞周期调控、信号转导、DNA损伤修复、抗原提呈以及细胞凋亡等,并与神经系统许多疾病的发生发展密切相关,如帕金森病（Parkinson’s disease,PD）、阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）等,因此对该途经的研究已成为目前医学研究的热点之一,而对该途径参与毒作用机制的报道并不多见。本研究以大鼠为研究对象,在以往DM神经毒性的作用机制研究的基础上,探索蛋白质的降解是否参与Py的神经毒作用机制中,为深入了解神经毒性提供新的思路。从整体方面,给予DM和蛋白酶体抑制剂MG-132,利用现代生物化学和分子生物学方法和技术,观察泛素-蛋白酶体途径在DM致大鼠海马细胞凋亡的中的作用,进一步的探讨DM致大鼠神经毒性的新途径。由于泛素-蛋白酶体途径是非特异性的,以BF为Ⅰ型拟除虫菊酯类代表,验证泛素-蛋白酶体途径致大鼠的神经损伤中的作用,不仅观察细胞凋亡,而且增加了有关细胞氧化应激。在体外条件下,以SH-SY5Y细胞为模型,探讨泛素-蛋白酶体途径在DM和BF所致细胞毒性中的作用,试图为拟除虫菊酯类农药中毒的预防和治疗提供科学依据。目的：观察DM对大鼠海马细胞泛素化蛋白表达的影响。方法：采用DM 12.5mg/kg体重（溶剂色拉油）对雄性Wistar大鼠一次腹腔注射,分别于5h、24h、48h后处死,免疫组织化学法观察大鼠海马CA1、CA2、CA3、CA4区泛素化蛋白的表达；免疫蛋白印迹法（western blot）检测海马细胞泛素化蛋白的表达。结果：经DM染毒后,不同时间点的泛素化蛋白表达用免疫组织化学方法测定。其结果：在海马CA1区,各DM处理组泛素化蛋白表达为5h（0.30±0.04）、24h（0.27±0.03）、48h（0.23±0.02）,与对照组（0.18±0.02）相比,差异有统计学意义（P<0.05）。海马CA2区,各DM处理组泛素化蛋白表达为5h（0.29±0.04）、24h（0.26±0.03）、48h（0.22±0.02）,与对照组（0.19±0.02）相比,差异有统计学意义（P<0.05）。海马CA3区,各DM处理组泛素化蛋白表达为5h（0.25±0.04）、24h（0.21±0.03）、48h（0.19±0.02）,与对照组（0.15±0.01）相比,差异有统计学意义（P<0.05）。海马CA4区,各DM处理组泛素化蛋白表达为5h（0.28±0.03）、24h（0.23±0.02）、48h（0.19±0.03）组,与对照组（0.17±0.01）相比,差异均有统计学意义（P<O.05）。Western blot发现,DM染毒5h、24h、48h组的泛素化蛋白分别为（9.55±1.74）、（8.06±1.55）、（8.53±0.92）,与对照组（5.58±0.85）相比,差异均有统计学意义（P<0.05）。小结：在本实验条件下,DM染毒可使大鼠海马细胞泛素化蛋白表达增加,提示泛素-蛋白酶体系统被大量激活。在接触DM时海马各区域泛素化蛋白表达最为明显为5小时,且随时间推移,逐渐减少,表明机体可能对接触DM有应激反应,将DM诱导的异常蛋白泛素化并降解,以维持细胞稳态。目的：研究DM对大鼠海马细胞凋亡的影响。方法：动物模型建立同第一节。将单侧新鲜海马制成单细胞悬液,流式细胞术（FCM） AV/PI法检测大鼠海马细胞凋亡率,并用单细胞凝胶电泳法（彗星试验）检测大鼠海马细胞DNA损伤。另一侧海马用裂解液匀浆取上清,western blot检测bcl-2蛋白及procaspase-3的表达。结果：（1）流式细胞术检测发现,大鼠经DM分别染毒5h、24h、48h,其海马细胞早期凋亡率分别为（13.45±2.62）%,（23.81±2.97）%,（15.34±1.27）%,其中,5h、48h组与对照组（4.55±0.86）%相比,差异有统计学意义（P<0.05）,24h组与对照组相比,差异有统计学意义（P<0.01）。（2）彗星试验发现,DM染毒5h、24h、48h后,其海马细胞尾部DNA百分含量分别为（10.12±1.26）,（11.91±1.28）,（9.89±±1.07）,与对照组（2.85±0.32）相比,差异有统计学意义（P<0.01）。DM染毒5h、24h、48h后,其海马细胞Olive尾矩（OTM）分别为（1.98±±0.23）,（2.56±±0.31）,（1.84±±0.23）,与对照组（0.38±±0.041）相比,差异有统计学意义（P<O.01）。（3）经DM染毒后,bcl-2蛋白表达与对照组（0.42±±0.03）相比,24h组（0.12±0.02）、48h组（0.13±±0.02）分别下降了71%和69%,差异有统计学意义（P<0.01）。5h组（0.41±±0.04）与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。（4）经DM染毒后,不同时间点procaspase-3蛋白表达均减少。与对照组（1.01±0.13）相比,5h组（0.72±±0.08）下降了28%,差异有统计学意义（P<0.05）；24h组（0.27±±0.04）、48h组（0.20±±0.04）分别下降了73%和80%,差异有统计学意义（P<0.01）。小结：本实验利用流式细胞术AV/PI双标染色法和彗星试验,发现DM以12.5mg/kg体重分别处理大鼠5h、24h和48h后,其海马细胞早期凋亡率和DNA损伤均显着增加。其可能的机制是DM可抑制大鼠脑bc1-2蛋白表达；caspase-3前体的表达逐步减少,意味着已被水解成有活性的caspase-3的量逐渐增多,最终参与到细胞凋亡的进程中。目的：观察UPP对DM致大鼠海马细胞凋亡的影响。方法：雄性Wistar大鼠24只,随机分为4组：对照组（腹腔注射lml/kg的色拉油后24h处死）；DM组（以12.5 mg/kg的DM腹腔注射染毒,24h后处死）；MG-132+DM组（蛋白酶体抑制剂MG-132 0.5mg/kg体重腹腔注射2h后,在腹腔另一侧注射12.5 mg/kg DM,DM作用24h后处死）；MG-132组（MG-132以0.5mg/kg体重腹腔注射2h,再腹腔另一侧注射等容量的色拉油,色拉油作用24h后处死）。大鼠断头处死,冰上分离海马。将单侧新鲜海马制成单细胞悬液,流式细胞术（FCM）检测大鼠海马细胞凋亡率,并用单细胞凝胶电泳（彗星试验）检测大鼠海马细胞DNA损伤。另一侧海马用裂解液匀浆取上清,western blot检测bc1-2蛋白的表达以及用全波段多功能酶标仪测定大鼠海马caspase-3酶活力。结果：（1）与DM组（27.29±2.41）%相比,MG-132+DM组其大鼠海马细胞早期凋亡率（19.94±2.07）%下降了27%,差异有统计学意义（P<0.05）。MG-132组的海马细胞早期凋亡率与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。（2）彗星试验发现,MG-132+DM组其海马细胞尾部DNA百分含量为（8.47±0.89）,与DM组（11.30±1.36）相比,差异有统计学意义（P<0.05）。MG-132+DM组其海马细胞Olive尾矩（OTM）为（1.51±0.23）,与DM组（2.17±0.35）相比,差异有统计学意义（P<0.05）。MG-132组其海马细胞尾部DNA百分含量及0live尾矩（OTM）与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。（3）bc1-2蛋白的表达：MG-132+DM组海马细胞bc1-2蛋白的表达为（2.01±0.23）,与DM组（0.43±0.06）相比,提高了367%,差异有统计学意义（P<0.01）。MG-132组,其海马细胞bc1-2蛋白的表达与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。（4）caspase-3酶活力：MG-132+DM组海马细胞caspase-3的活力为（4.55±0.46）,与DM组相比降低了14%,差异有统计学意义（P<O.05）。MG-132组海马细胞caspase-3的活力与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。小结：本实验中,MG-132以0.5mg/kg体重提前处理大鼠2h再给予DM染毒,整体凋亡率、DNA损伤、caspase-3酶活力三个细胞凋亡指标与DM组相比均明显下降,bc1-2蛋白的表达显着上升。提示蛋白酶体抑制剂MG-132以0.5mg/kg提前处理大鼠2h能一定程度抑制DM致大鼠海马细胞的凋亡,说明UPP途径参与DM致大鼠海马细胞凋亡,阻断UPP途径能一定程度抑制DM对海马细胞的损伤。目的：探讨UPP在DM致大鼠海马细胞凋亡的机制。方法：动物分组同第三节。大鼠断头处死,冰上取海马,采用免疫共沉淀方法检测bc1-2与泛素的相互作用,并观察MG-132对此相互作用的影响。结果：大鼠经DM染毒24h后,其海马细胞bcl-2蛋白泛素化水平增高了约90%,与对照组相比,差异有统计学意义（P<0.01）。MG-132+DM组其bc1-2蛋白泛素化水平下降了约46%,与DM组相比,差异有统计学意义（P<0.01）；MG-132组其bc1-2蛋白泛素化水平与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。小结：DM致大鼠海马细胞凋亡的机制可能是提高bc1-2蛋白的泛素化,MG-132能抑制DM诱导的bc1-2蛋白的泛素化,减少bc1-2蛋白的降解,以保护细胞免受毒物的损害作用。目的：研究UPP对BF致大鼠海马细胞凋亡的影响。方法：21只健康成年Wistar雄性大鼠,体重180-200g,按体重随机分为7组（每组3只）：对照组（腹腔注射色拉油后24h处死）；BF 24h组（以7mg／kg的BF腹腔注射染毒,24h后处死）；BF5d组（以7mg/kg的BF腹腔注射染毒,连续5d,每天一次,最后一次给药24h后处死）；MG-132+BF 24h组（MG-132以0.5mg/kg体重腹腔注射1h后,BF以7mg/kg体重在另一侧腹腔注射,BF作用24h后处死）；MG-132+BF 5d组：MG-132腹腔注射1h后,在另一侧腹腔注射BF,连续5d,最后一次BF染毒24h后处死；MG-132 24h组（MG-132以0.5mg/kg体重腹腔注射1h后,在另一侧腹腔注射色拉油,色拉油作用24h后处死）；MG-132 5d组（MG-132以0.5mg/kg体重腹腔注射1h后,在另一侧腹腔注射色拉油,连续5d,最后一次给予色拉油24h后处死）。大鼠断头处死,冰上分离海马。将单侧新鲜海马制成单细胞悬液,流式细胞术（FCM）检测大鼠海马细胞凋亡率。结果：BF 24h组和5d组,其海马细胞早期凋亡率分别（51.57±5.22）%,（50.23±6.86）%,与对照组（33.43±7.06）%相比,分别升高了约54.26%和50.25%,差异有统计学意义（P<0.05）。MG-132+BF 24h组,其海马细胞早期凋亡率为（40.23±7.69）%,与BF 24h组相比,下降了约21.99%,差异有统计学意义（P<0.05）。MG-132+BF 5d组海马细胞晚期凋亡率为（39.33±9.31）%,与BF 5d组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。MG-132 24h组其海马细胞早期凋亡率为（51.03±5.08）%,与对照组相比,升高了约52.65%,差异有统计学意义（P<0.05）。MG-132 5d组其海马细胞早期凋亡率为（51.77±3.59）%,与对照组相比,升高了约54.86%,差异有统计学意义（P<0.05）。小结：BF染毒后,能诱导大鼠海马细胞发生凋亡。预先给予MG-132,能在一定程度抑制BF诱导细胞凋亡的发生,提示UPP参与BF致大鼠海马细胞凋亡的过程。目的：探讨UPP对BF致大鼠海马细胞氧化应激的影响。方法：动物分组同第一节。大鼠断头处死取单侧海马组织制成10%的匀浆液,试剂盒测定其MDA、SOD、GSH的含量变化。结果：（1）丙二醛（MDA）含量：BF 24h和5d组,海马细胞MDA含量分别为（4.07±0.53）和（4.21±0.45）,与对照组（2.53±0.21）相比,分别升高约61%和66%,差异有统计学意义（P<0.05）。MG-132+BF 24h组,其海马细胞MDA含量为（1.94±0.38）,与BF 24h组相比,降低约52%,差异有统计学意义（P<0.01）。MG-132+BF 5d组与BF 5d组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。MG-132 24h和5d组,其海马细胞MDA含量与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。（2）超氧化物歧化酶（SOD）活力单位：BF 5d组其海马细胞SOD活力单位为（19.51±2.15）,与对照组（30.41±8.27）相比下降约36%,差异有统计学意义（P<0.05）。BF 24h组与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）。MG-132+BF 5d组（28.01±3.49）与BF 5d组（19.52±2.15）相比升高约43%,差异有统计学意义（P<0.05）。MG-132+BF 24h组其海马细胞SOD活力单位与BF 24h组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。MG-132 24h和5d组与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。（3）谷胱甘肽（GSH）含量：BF 5d组为（2.13±0.56）,与对照组（3.16±0.36）相比,降低约33%,差异有统计学意义（P<0.05）。BF 24h组与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。MG-132+BF 24h组,其海马细胞GSH含量为（4.33±0.53）,与BF 24h组（2.47±0.55）相比,显着增高,升幅约75%,差异有统计学意义（P<0.01）。MG-132+BF 5d组与BF 5d组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。MG-132 24h和5d组,其海马细胞GSH含量与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。小结：BF染毒后能诱导大鼠海马细胞氧化损伤,MDA含量增高,SOD、GSH含量下降。MG-132能在一定程度的抑制BF诱导的大鼠海马细胞氧化损伤,提示UPP参与BF致大鼠海马细胞氧化应激的过程。目的：探讨UPP对Py致SH-SY5Y细胞存活率的影响。方法：设7个组,每组8个平行样。分别为空白对照组,溶剂对照（1‰DMSO）组,DM组、MG-132+DM组、BF组、MG-132+BF组,MG-132组,其中DM、BF各设7个剂量组,均为1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3mol／L。MG-132终浓度为1×10-6μmol/L,分别提前2h和1h处理细胞后与DM、BF联合处理。DM、BF处理24h后以MTT法测定细胞存活率。结果：（1）DM组1×10-9-1×10-3mol／L的细胞存活率分别为105.48%,95.32%,98.15%,82.09%,74.79%,72.06%和80.45%。其中1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3mol／L四个DM剂量组细胞的存活率与空白对照组相比明显下降,差异有统计学意义（P<0.01）。经过浓度为1×10-6μmol／L的MG-132预处理2h后,DM各剂量组的细胞存活率分别为109.35%,97.14%,95.67%,91.86%,82.53%,75.49%,78.74%。其中1×10-6、1×10--mol／L DM染毒剂量的细胞存活率与相应DM染毒的细胞存活率相比,显着升高,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）BF组1×10-9-1×10-2mol／L的细胞存活率分别为101.12%,94.24%,92.52%,92.61%,87.67%,76.22%和66.95%。其中,1×10-5、1×10-4、1×10-3mol／L三个BF剂量组细胞的存活率与空白对照组相比明显下降,差异有统计学意义（P<0.01）。经过浓度为1×10-6μmol／L的MG-132预处理1h后,BF各剂量组的细胞存活率分别为105.64%,98.32%,94.75%,90.68%,95.24%,86.24%,70.84%,其中1×10-51×10-4mol／L BF染毒剂量的细胞存活率与相应BF染毒的细胞存活率相比,显着升高,差异有统计学意义（P<0.05）。小结：DM、BF分别以一定剂量（DM:1×10-6-1×10-3mol／L;BF:1×10-5-1×10-3mol／L）能抑制SH-SY5Y细胞的生长,MG-132对Py的神经细胞毒作用具有较好的抑制作用,提示UPP途径参与Py的神经细胞毒性过程。总之,本课题“泛素-蛋白酶体途径对拟除虫菊酯农药致大鼠神经毒性的影响及机制初探”的研究仅是个开端,在毒作用机制研究中,考虑蛋白降解途径。初步得出的结论是：在本研究中,Ⅱ型拟除虫菊酯农药DM可引起神经细胞凋亡,泛素化蛋白增加。利用蛋白酶体抑制剂MG-132,证实泛素-蛋白酶体途径参与DM诱导的细胞凋亡,增加细胞DNA损伤,提高bcl-2蛋白泛素化。并且发现bcl-2蛋白的泛素化降解很可能是DM引起神经细胞凋亡的机制之一。同时以Ⅰ型拟除虫菊酯农药联苯菊酯（bifenthrin,BF）,验证了UPP参与BF所致神经细胞毒性,包括细胞凋亡和氧化损伤。在体外试验也初步发现阻断UPP能减低Py的细胞毒性,提高存活率。综上所述,在神经系统或神经细胞中UPP通路是参与农药中毒的机制,可以抑制该通路发挥其对机体和细胞的神经保护作用。
石微[4]（2010）在《溴氰菊酯致大鼠DNA损伤及损伤后修复功能的影响》文中进行了进一步梳理目的通过建立大鼠慢性溴氰菊酯（DM）染毒模型,探索DM所致肝脏DNA损伤的修复机制。方法本课题采用慢性毒性实验,将大鼠随机分为4组（每组8只）,分别为低剂量组（溴氰菊酯1.56mg/kg）中剂量组（溴氰菊酯3.12mg/kg）.高剂量组（溴氰菊酯6.25 mg/kg）及对照组,连续灌胃染毒5d停2d,染毒时间为24w。观察在实验期间,各组大鼠的行为变化；实验结束大鼠在禁食、但自由饮水24h后处死,取各脏器称重；染色法观察肝脏病理损害；酶化学法测定丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响；单细胞凝胶电泳EB染色观察DNA损伤；RT-PCR检测MGMT和XRCC-5的表达。结果光镜下见染毒组肝脏出现不同程度的病理表现；染毒组大鼠肝脏的脏器系数与对照组比较有不同程度的升高；各染毒组与对照组比较,MDA均升高,SOD、GSH-PX活性均降低,P<0.05差别有统计学意义。染毒组大鼠肝细胞的尾DNA%（Tail DNA%）、尾矩（Tail Moment）和(Olive尾矩（Olive Tail Moment）均高于对照组（P<0.05）。与对照组相比,低剂量染毒组MGMT基因表达量明显增加（P<0.05）,中剂量组和高剂量组与对照组比较差别无显着性（P>0.05）。与对照组相比,染毒组XRCC-5基因表达量差别无显着性（P>0.05）。结论溴氰菊酯引起大鼠肝脏慢性病理损害,抑制肝脏抗氧化酶活性致氧化损伤；对肝细胞DNA具有损伤作用,多种修复酶参与DM所导致DNA损伤过程。
关培英[5]（2008）在《拟除虫菊酯类农药法医毒物动力学研究（一） ——氰戊菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯在家兔体内的死后分布研究》文中认为目的:1.建立家兔拟除虫菊酯类农药灌胃染毒致死模型。2.建立拟除虫菊酯类农药气相色谱、气相色谱/质谱联用检测方法。3.研究拟除虫菊酯类农药在灌胃染毒致死家兔体内的分布。方法:1.动物模型建立家兔24只,随机分为实验组（15只）和对照组（9只）,实验组分为氰戊菊酯组,甲氰菊酯组和氯氰菊酯组,分别经口灌胃染毒1.64g/kg、0.65g/kg和0.53g/kg,对照组家兔注入等体积生理盐水。2.观察从开始染毒到动物死亡的中毒症状。3.样品采集与处理家兔灌胃后,实验组家兔血压、呼吸和心电全部消失后,迅速解剖动物,取全部心血、外周血、胆汁、尿和部分心、肝、脾、肺、肾、脑、胃壁等组织,放置于-20℃冰箱内保存待检。另一部分心、肝、脾、肺、肾、脑、胃和肌肉等组织用4%甲醛固定,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜下观察。4.拟除虫菊酯类农药分析样品经酸处理后,三氯甲烷萃取,气相色谱和气相色谱-质谱联用检测,根据三种拟除虫菊酯类农药各自的特征离子峰、保留时间定性与内标法、工作曲线法定量。结果:1.症状实验组家兔在经口灌胃后出现中毒症状,染毒后2-3h部分实验家兔出现湿毛,角弓反张,大小便失禁,痉挛,角膜反射减弱或消失,肌张力下降,呼吸减弱或消失。三种拟除虫菊酯农药染毒家兔分别于染毒后9.97±3.97h、6.37±2.71h和7.95±3.15h死亡。对照组家兔未出现以上症状,未死亡。拟除虫菊酯农药致死家兔主要脏器病理改变基本相似,为一般中毒表现。2.气相色谱法:本研究建立气相色谱检测生物样本中拟除虫菊酯类农药的方法,达到良好的分离,线性范围为2-400μg/g或μg/ml,最低检出浓度是0.125μg/g或μg/ml,回收率均在95%以上。3.家兔体内的拟除虫菊酯类农药分布实验组家兔体内拟除虫农药的平均含量从高到低依次为:氰戊菊酯组:胃壁、肝、脾、大脑、肺、胆汁、心、肾、周围血、心血;甲氰菊酯组:胃壁、肾、肝、大脑、心、脾、胆汁、肺、周围血、心血;氯氰菊酯组:胃壁、肝、肾、心、肺、尿、脾、大脑、周围血、心血胆汁。结论:1.本研究建立了三种拟除虫菊酯类农药灌胃染毒致死的动物模型,三种拟除虫菊酯农药染毒家兔分别于染毒后9.97±3.97h、6.37±2.71h和7.95±3.15h死亡。本模型可应用于拟除虫菊酯类农药意外死亡和中毒案件的法医学研究。2.三种拟除虫菊酯类农药经口灌胃致死家兔体内分布趋势分别为氰戊菊酯组:胃壁、肝、脾、大脑、肺、胆汁、心、肾、周围血、心血;甲氰菊酯组:胃壁、肾、肝、大脑、心、脾、胆汁、肺、周围血、心血;氯氰菊酯组:胃壁、肝、肾、心、肺、尿、脾、大脑、周围血、心血胆汁。为拟除虫菊酯类农药中毒致死案件的检材采取、检测、结果分析、死因判定及法医学鉴定提供科学依据。3.拟除虫菊酯类农药意外死亡和中毒案件进行法医学鉴定时,除常见检材心血和外周血外仍需采取肝、肾、胆汁、心、脾、脑等组织进行全面的农药定性和定量分析,并结合症状及体征发现进行综合判定。
夏伟[6]（2008）在《溴氰菊酯对鲫鱼的分子毒理效应研究》文中研究指明溴氰菊酯是人工合成拟除虫菊酯杀虫剂中杀虫毒力最大的一个品种。目前主要用于防治棉田、菜地、果树和茶叶上的农业害虫以及卫生害虫,它能有效杀害对有机磷等产生抗药性的昆虫,具有一定的优越性。由于其使用广泛,通过地表径流等途径进入水体的可能性大,会对渔业生产和生态环境造成影响。通过鱼类的毒性试验,能够在一定程度上综合地反应出此类农药对水体的污染状况,对保护渔业生产和水环境有着积极的意义。本文以鲫鱼成鱼为实验材料,在大量预实验的基础上按浓度梯度设置5个浓度组:10μg/L、18μh/L、26μg/L、34μg/L、42μg/L和一个空白对照组,测定溴氰菊酯对鲫鱼96hLC50。在LC50基础上设置3个不同的浓度组和一个空白对照组,研究亚急性条件下溴氰菊酯对鲫鱼血清生理生化指标、肝总酯酶和羧酸酯酶活力、肝脏和肾脏等四种组织的酯酶同工酶电泳以及对鲫鱼肝脏和肾脏DNA-蛋白质交联影响情况。结果表明,溴氰菊酯对鲫鱼的96hLC50为21.6μg/L。经4.32μg/L、8.64μg/L、12.96μg/L浓度处理后,随着溴氰菊酯浓度的增加和染毒时间的延长,血清蛋白和与对照组相比明显降低,而血清尿素氮与对照组相比明显升高,表明溴氰菊酯导致了鲫鱼体内的蛋白质代谢紊乱,并对肝脏和肾脏造成了严重的损害。随着溴氰菊酯浓度的增加,血清总脂,肝脏总酯酶和羧酸酯酶活力变化规律一致均为先升高后降低,表明溴氰菊酯影响了鲫鱼的脂类代谢。本研究中,肝脏总酯酶活力和羧酸酯酶活力的变化规律一致,原因可能是在酯酶中,羧酸酯酶对降解溴氰菊酯的毒性起着主要的作用。鲫鱼的肝脏、肌肉、肾脏、鳃等组织的酯酶同工酶电泳图谱中表明,肝脏和肾脏的酶谱带变化较肌肉和鳃的大明显,表明溴氰菊酯可能主要影响了鲫鱼机体脂类物质的消化吸收和代谢。随着染毒浓度的增加和染毒时间的延长,肝脏的EST6酶带和肾脏的EST3条带消失,表明溴氰菊酯对鲫鱼肝脏和肾脏的损害加强,导致这两种酶的合成终止。在染毒的中期,肾脏中出现了EST1条带,推测EST1可能与溴氰菊酯在体内某一代谢过程中产物有紧密联系。DNA-蛋白质交联（DPC）是一种遗传损伤标志物。本研究中,溴氰菊酯能诱导肝脏和肾脏DPC的产生。在肾脏中,随着溴氰菊酯浓度的增加和暴露的延长,DPC交联率明显增高,呈现出明显的浓度和时间效应,而在肝脏中只有高浓度组才会出现这种效应。
赵翊[7]（2008）在《Ⅱ型拟除虫菊酯对雄性小鼠生殖毒性作用》文中研究说明目的研究Ⅱ型拟除虫菊酯类农药对雄性小鼠生殖系统的毒性作用及其机制。方法本研究采用亚慢性毒性试验,选用毒性属中等且具有代表性的Ⅱ型拟除虫菊酯类农药溴氰菊酯（DM）和氯氰菊酯（CP）作为受试物。1.选用雄性昆明种小鼠70只随机分为7组（每组10只）,分别为溴氰菊酯（DM）0.9、1.8、3.6mg/kg组;氯氰菊酯（CP）3.5、7.0、14.0mg/kg组及色拉油对照组;连续30d经口灌胃染毒,在禁食、但自由饮水24h后,颈椎脱臼处死,立即分离双侧附睾及睾丸,称重并制备睾丸匀浆;采用WL-9000型精子质量检测系统对精子进行运动参数测定,采用常规方法检查畸形精子并计算畸形率,比色法测定小鼠睾丸组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性、丙二醛（MDA）、羟自由基（-OH）含量和总抗氧化能力（T-AOC）。2.选用雄性昆明种小鼠70只随机分为7组（每组10只）,分别为溴氰菊酯（DM）0.9、1.8、3.6mg/kg组;氯氰菊酯（CP）3.5、7.0、14.0mg/kg组及色拉油对照组;经口灌胃染毒60d后,颈椎脱臼处死,取双侧睾丸,4%的中性甲醛固定,常规染色观察睾丸形态学的变化,采用免疫组化的方法分别检测雄性小鼠睾丸细胞中P53和Bcl-2蛋白表达。结果1.一般情况:随着染毒时间的延长,实验组小鼠体重增长慢于对照组;各组小鼠睾丸、附睾脏器系数的差异无统计学意义。2.各实验组小鼠精子畸形率随剂量的增高有上升趋势,但经检验差异无统计学意义;DM 3.6mg/kg组精子的平均直线运动速度（VSL）、平均路径速度（VAP）、侧摆幅度（ALH）、运动的直线性（LIN）、运动的摆动性（WOB）与对照组相比降低（P＜0.05）;CP 14.0mg/kg组平均曲线运动速度（VCL）、平均直线运动速度（VSL）、平均路径速度（VAP）与对照组相比降低（P＜0.05）。3.DM1.8、3.6 mg/kg与CP14.0mg/kg组小鼠睾丸内的GSH-PX活力与对照组相比有不同程度的下降（P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05）;DM1.8、3.6mg/kg与CP14.0mg/kg组-OH含量与对照组相比升高（P＜0.05）;DM1.8、3.6mg/kg与CP14.0mg/kg组小鼠睾丸内的MDA含量均高于对照组（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05）;DM1.8、3.6mg/kg与CP7.0、14.0mg/kg组小鼠睾丸组织T-AOC均低于对照组（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05）。4.实验组小鼠睾丸组织出现不同程度病理改变。5.P53蛋白主要表达在各级精母细胞,对照组P53阳性细胞率（22.44±4.24）%,DM3.6mg/kg组P53蛋白阳性细胞率高于对照组（P＜0.01）;Bcl-2蛋白主要表达于睾丸间质细胞和初级精母细胞,对照组Bcl-2阳性细胞率为（8.68±0.78）%,DM3.6mg/kg组Bcl-2阳性细胞率明显高于对照组（P＜0.01）。在平均光密度值的比较中,DM3.6 mg/kg和CP14.0mg/kg组P53蛋白表达平均光密度值高于对照组（均为P＜0.01）:DM1.8、3.6mg/kg和CP14.0mg/kg组Bcl-2蛋白表达平均光密度值低于对照组（P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01）。结论在本实验设定的条件下,长期低浓度接触Ⅱ型拟除虫菊酯可引起小鼠生长发育的抑制,对睾丸有损伤作用,对雄性生殖有不良影响。Ⅱ型拟除虫菊酯对睾丸内一些酶活性的产生影响,导致机体抗氧化能力下降,诱导小鼠生精细胞和间质细胞的过度凋亡,睾酮分泌减少,最终使得试验小鼠精子运动能力下降可能是其引起雄性生殖损伤的机制之一。
胡琼予[8]（2007）在《溴氰菊酯对鲫的毒性作用研究及残留检测》文中进行了进一步梳理本研究对溴氰菊酯杀虫剂的各种毒性作用进行了综合性评价，以期为水产养殖的安全使用提供依据。以鲫（Carassius auratus）为试验鱼，研究了溴氰菊酯对鲫的急性毒性；研究了溴氰菊酯对鲫不同组织中的解毒代谢酶的影响以探讨其对机体解毒机制的毒性损伤；选择乙酰胆碱酯酶（AChE）为对象研究了溴氰菊酯对鲫靶标酶的毒性损伤；研究了溴氰菊酯对鲫的遗传毒性；以草鱼（Ctenopharyngodon idellus）和南美白对虾（Penaeus Vannamei）为试验材料，建立了水产品中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯残留量的电子捕获气相色谱（GC-ECD）法。主要研究结果如下：在试验控制条件下，溴氰菊酯对平均体长4.5cm，平均体重2.7g的鲫的96hLC50为61.17μg／L，安全浓度为6.117μg／L，属于高毒级药物。在试验条件下，2.039-6.117μg／L的溴氰菊酯对鲫的肝、鳃、肾等组织的解毒代谢酶活性变化规律大致一致表现为诱导机制，对其机体的抗氧化功能未造成损伤：在不同组织中解毒代谢酶活性受影响的程度不同，其中鳃的变化明显大于肝和肾；不同的溶剂对溴氰菊酯临床使用的毒性作用会产生影响。在试验条件下，2.039-6.117μg／L组的溴氰菊酯对鲫的肝、鳃、肾等组织的AChE活性表现为抑制到一定程度后转为诱导机制，各个溴氰菊酯浓度组并未影响各组织的AChE功能也未造成机体的组织损伤，鱼体对溴氰菊酯产生了一定的耐受性；在不同组织中AChE活性受影响的程度不同，其中肝的变化明显大于鳃和肾；溶剂对照组在试验中与空白对照组相比仍有一定的差异，这个结果与前一试验一致。在溴氰菊酯对鲫遗传损伤试验中，溴氰菊酯处理的浓度低于6.117μg／L时在试验期间未见与对照组的显着差异，仅在6.117μg／L浓度组发现微核率和总核异常率的明显变化，并且变化规律相似，随着溴氰菊酯处理的浓度和时间的增加，微核率和总核异常率也呈正相关增加；溴氰菊酯具有一定的遗传毒性。水产品中的拟除虫菊酯经乙腈提取，正己烷脱脂，ENVI-18柱和氧化铝柱AL-N净化后进样分析。结果表明，该方法中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的质量浓度在1.0μg／L-500.0μg／L范围内线性关系良好。3种菊酯加标水平在1.0μg／Kg-10.0μg／Kg时，方法回收率为78.5％-100.8％之间，相对标准偏差为3.1％-9.4％，本方法氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的最低检出限均为0.2μg／Kg。该方法处理后杂质干扰少，灵敏度高，检出限量低，适用性较强，能够满足水产品中拟除虫菊酯素类杀虫剂残留的检测。
孙敏[9]（2007）在《褪黑素对溴氰菊酯大鼠脑组织氧化损伤保护作用的研究》文中提出拟除虫菊酯是根据天然除虫菊素衍化发展而来的一类人工合成农药,具有广谱、高效、低残留及在哺乳动物体内代谢转化迅速的特点,广泛应用于农业、林业、卫生部门的害虫防治。拟除虫菊酯根据有无α氰基分为两种类型,溴氰菊酯（Deltamethrin,DM）是一种Ⅱ型拟除虫菊酯杀虫剂。DM主要作用于中枢神经系统,大鼠中毒症状是流涎、乱抓、旋转性抽搐、痉挛直至死亡。目前研究认为DM神经毒性作用可能的机制之一是与谷氨酸信号传导功能紊乱有关,而谷氨酸NMDA受体拮抗剂MK-801虽然在细胞水平能一定程度地降低DM的神经毒作用,但在体内实验中因其本身对小鼠具有较强的毒性而不能得以有效地使用。DM神经毒性作用可能的机制之二是DM引起的脑组织氧化损伤,表现为脂质过氧化程度升高,抗氧化酶活性降低。褪黑素（Melatonin,MT）是松果体腺分泌的生物活性小分子,研究表明MT在阻止氧化性物质对体内生物大分子造成的氧化损伤、保护体内抗氧化酶的活力中有着重要的作用。与其他的抗氧化物质相比,具有极强的脂溶性和水溶性、能穿过体内多种生理屏障等优点,在防止神经退行性病变帕金森病（PD）、早老性痴呆（AD）、亨廷顿病等疾病方面有很好的应用前景。本研究在DM诱导大鼠脑组织氧化损伤的基础上,探讨MT对DM所致脑组织氧化损伤的保护作用以及MT对DM诱导大鼠脑组织HO-1蛋白表达的影响,目的是研究褪黑素是否对DM引起的大鼠脑组织的氧化损伤具有保护作用及其可能的机制,为防治溴氰菊酯中毒提供科学依据。第一部分MT对DM染毒5 d大鼠脑组织氧化损伤的保护作用目的:探讨MT在DM染毒5 d致大鼠脑组织氧化损伤中的保护作用。方法:雄性Wistar大鼠分为5组:橄榄油对照组、MT对照组（25.0 mg/kg MT）、DM组（12.5 mg/kg DM）、MT1（25.0 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM）组、MT2组（2.5 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM）。连续5d腹腔注射,在第5 d给药后4 h断头处死各组大鼠,全能酶标仪比色测定大鼠大脑皮层、海马和小脑组织的丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果:（1）与橄榄油对照组相比,DM组海马、大脑皮层、小脑MDA含量明显升高（p <0.01）,海马、大脑皮层的GSH-Px活性明显降低,小脑CAT活性明显下降（p <0.05）。（2）与DM组相比,MT1组海马和大脑皮层MDA含量明显降低,GSH-Px、CAT和GSH活性明显升高（p <0.05）, SOD活性无明显变化（p >0.05）。MT1组小脑MDA含量明显降低（p <0.05）,GSH-Px、CAT和GSH活性有升高的趋势但无统计学差异（p >0.05）,SOD活性无明显变化。（3）与DM组相比,MT2组海马MDA含量明显降低,GSH-Px活性明显升高（p <0.05）;MT2组大脑皮层MDA含量明显降低（p <0.05）,GSH-Px、CAT、GSH,SOD活性无明显变化。此外,MT1组大脑皮层GSH、GSH-Px活力明显高于MT2组（p <0.05）。（4）褪黑素对照组与橄榄油对照组相比,MDA含量及SOD、CAT、GSH和GSH-Px活性无明显差异（p >0.05）。结论:DM连续染毒5 d能诱导大鼠大脑皮层、海马和小脑MDA含量显着升高,对抗氧化酶系统影响在海马和皮层主要为抑制GSH-Px的活性,对小脑主要是抑制CAT的活性。褪黑素能明显降低溴氰菊酯引起的各脑区的脂质过氧化反应,增强抗氧化酶活性,对不同脑区的氧化损伤均有一定的保护作用。第二部分MT对DM染毒10 d大鼠脑组织和血清氧化损伤的保护作用目的:研究DM染毒10 d对大鼠血清氧化损伤的时间-效应关系及MT保护作用的时间-剂量-效应关系,同时研究DM染毒10 d对大鼠不同脑区脑组织的氧化损伤以及MT的保护作用。方法:雄性wistar大鼠分为5组:橄榄油对照组、DM组（12.5 mg/kg DM）、MT1组（7.5 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM）、MT2组（2.5 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM）、MT3组（0.8mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM）,连续10 d腹腔注射。在给药的第1 d、第4 d、第7 d对每组大鼠均进行尾尖采血,第10 d给药4 h后断头处死留取血清并分离大脑皮层、海马和小脑组织。全能酶标仪测定血清和组织中MDA含量以及SOD、CAT、GSH、GSH-Px活性。结果:（1）与对照组相比,DM组血清中MDA含量第1 d没有明显改变,从第4 d到第10 d,随给药时间的延长MDA明显升高（p <0.05）;DM组血清中GSH和GSH-Px活性第4 d到第10 d明显降低（p <0.05）,CAT和SOD活性在第7 d和第10 d明显降低（p <0.05）。与DM组相比,MT1组血清MDA含量从第4 d到第10 d随给药时间的延长明显降低（p <0.05）,CAT、GSH和GSH-Px活性从第4 d到第10 d逐渐升高（p <0.05）,SOD活性在第7 d和第10 d明显升高（p <0.05）。与DM组相比,MT2组和MT3组血清MDA含量在第7 d和第10 d明显降低（p <0.05）;MT2组血清CAT、GSH-Px活性从第4 d到第10 d逐渐升高（p <0.05）,GSH、SOD活性在第7 d和第10 d明显升高（p <0.05）;MT3组血清CAT、GSH、SOD和GSH-Px活性在第7 d和第10 d明显升高（p <0.05）。（2）与对照组比较,DM组海马、皮层、小脑MDA含量明显升高,分别升高了80.00%、43.35%和39.16%（p <0.01）, SOD、GSH、CAT、GSH-Px活性均明显下降（p <0.05）。（3）与DM组相比,MT1组、MT2组和MT3组海马、皮层和小脑的MDA含量均明显降低,SOD、GSH、CAT、GSH-Px活性均明显升高（p <0.05）。（4）MT3组大脑皮层GSH、GSH-Px活性,海马CAT、GSH-Px活性和小脑CAT活性明显低于MT1组（p <0.05）。结论:DM染毒10d,血清和脑组织中MDA含量均明显增加,而抗氧化酶活性均明显降低,表明DM对血清和脑组织造成的氧化损伤具有一致性,可通过检测血清中氧化/抗氧化指标的变化来监测脑组织氧化损伤的程度。并且DM对血清的氧化损伤有时间-效应关系,即随给药时间的延长,脂质过氧化程度越重,抗氧化酶活性越低。而MT能有效改善DM对血清损伤的时间-效应关系,并在组织和血清中呈现时间-剂量-效应关系,即随着给药时间的延长,给予的MT剂量越大,血清和组织中氧化损伤程度越低。第三部分MT对DM脑组织HO-1蛋白表达诱导作用的影响目的:探讨褪黑素在溴氰菊酯对脑组织HO-1蛋白表达诱导作用中的机制。方法:雄性wistar大鼠分为5组:橄榄油对照组、DM组（12.5 mg/kg DM）、MT1组（7.5 mg/kg MT+12.5 mg/kg DM）、MT2组（2. 5 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM）、MT3组（0.8 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM）。连续10 d给予相应剂量的药物,在第10 d给药4 h后,用免疫组织化学法检测大脑皮层、海马和小脑组织中HO-1蛋白的表达。用流式细胞术检测大脑皮层、海马中HO-1蛋白的表达。结果:（1）免疫组织化学法结果显示:与对照组相比,DM组大脑皮层、海马和小脑组织HO-1蛋白表达明显增多（p <0.01）。与DM组相比,MT1组、MT2组和MT3组大脑皮层、海马、小脑组织HO-1蛋白表达明显降低（p <0.01）。不同剂量的MT组之间相比,MT2组海马HO-1蛋白表达明显高于MT1组（p <0.01）,MT3组大脑皮层、海马和小脑组织HO-1蛋白表达明显高于MT1组（p <0.01）,MT3组小脑HO-1蛋白表达明显高于MT2组（p <0.01）。（2）流式细胞术结果显示:与对照组相比,DM组海马细胞、皮层细胞HO-1蛋白表达明显升高（p <0.01）;与DM组相比,MT1组、MT2组、MT3组海马细胞、皮层细胞HO-1蛋白表达显着降低（p <0.01）。结论:DM能诱导大鼠大脑皮层、海马、小脑HO-1蛋白表达增高,MT则能降低由DM诱导的HO-1表达的升高。MT对DM诱导HO-1蛋白表达的抑制作用呈现剂量-效应关系,即给予的MT剂量越大,HO-1表达受抑制的程度越大。
陈丹,石年,黄晓薇,刘琳琳[10]（2006）在《溴氰菊酯对大鼠脑组织线粒体膜通透性和细胞色素C表达的影响》文中认为目的研究溴氰菊酯（DM）对大鼠脑组织线粒体膜通透性及细胞色素C表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为实验组（4个不同染毒时间）和对照组,每组5只。实验组按12．5 mg/kg DM一次腹腔注射,5、24、48、72 h后处死；对照组一次腹腔注射5 mg/kg的色拉油,分别提取大鼠大脑皮层和海马的线粒体,测定线粒体膜通透性、细胞色素C氧化酶,并测定大鼠大脑皮层、海马CA1、CA2、CA3、CA4区细胞色素C的表达。结果实验组与对照组相比,5、24、48、72 h组的线粒体膜通透性增大；皮层和海马CA1区、CA2区5、24、48 h组（0．57±．04、0．67±0．09、0．58±0．04）、CA4区24 h组（0．81±0．18）细胞色素C表达增强,吸光度值的差异有统计学意义（P＜0．05或P＜0．01）；CA2区72 h组、CA3区及CA4区5、48、72 h组细胞色素C表达,吸光度值的差异则无统计学意义（P＞0．05）；细胞色素C氧化酶的活力则受到抑制,差异有统计学意义（P＜0．01）。结论DM能明显增加大鼠脑组织线粒体膜通透性,促使细胞色素C表达增强。
二、溴氰菊酯对大鼠脑组织G蛋白转换的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、溴氰菊酯对大鼠脑组织G蛋白转换的影响（论文提纲范文）
（1）基于鳃和脑部AChE分析的环境胁迫下斑马鱼行为响应机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 研究背景 |
| 1.1 水体污染现状 |
| 1.2 农药和重金属污染及危害 |
| 1.2.1 重金属对水生生物毒性研究 |
| 1.2.2 拟除虫菊酯类农药对水生生物毒性研究 |
| 1.2.3 重金属与拟除虫菊酯类药物联合作用 |
| 1.3 乙酰胆碱酯酶简介 |
| 1.4 污染物胁迫下水生生物行为响应 |
| 1.5 研究目的与意义 |
| 第二章 氯化镉和溴氰菊酯对斑马鱼的急性毒性作用 |
| 2.1 实验目的 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 实验药物 |
| 2.3 实验设计 |
| 2.4 统计分析 |
| 2.5 结果与讨论 |
| 第三章 氯化镉和溴氰菊酯暴露对斑马鱼鳃乙酰胆碱酯酶的影响 |
| 3.1 实验目的 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 药品与仪器 |
| 3.2.2 实验动物 |
| 3.3 实验设计 |
| 3.3.1 暴露实验 |
| 3.3.2 组织匀浆制备 |
| 3.3.3 总蛋白含量测定 |
| 3.3.4 AChE活性测定 |
| 3.4 统计分析 |
| 3.5 结果与讨论 |
| 第四章 氯化镉和溴氰菊酯暴露对斑马鱼脑乙酰胆碱酯酶的影响 |
| 4.1 实验目的 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 药品与仪器 |
| 4.2.2 实验动物 |
| 4.3 实验设计 |
| 4.3.1 暴露实验 |
| 4.3.2 组织匀浆制备 |
| 4.3.3 总蛋白含量测定 |
| 4.3.4 AChE活性测定 |
| 4.4 统计分析 |
| 4.5 结果与讨论 |
| 第五章 斑马鱼AChE活性与暴露时间、外在行为的关系 |
| 5.1 斑马鱼脑和鳃AChE与污染物暴露时间的关系 |
| 5.2 斑马鱼鳃和脑AChE与外在行为的关系 |
| 第六章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
（2）视蛋白基因参与蚊抗药性机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 白纹伊蚊视蛋白基因（Opsin）克隆及其与溴氰菊酯抗性关系的研究 |
| 材料与方法 |
| 一、材料 |
| 二、方法 |
| （一）白纹伊蚊 Opsin 基因克隆及生物信息学分析 |
| （二）高表达 Opsin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响 |
| （三）低表达 opsin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性及相关基因表达的影响 |
| 结果 |
| 一、白纹伊蚊 Opsin 基因克隆及生物信息学分析 |
| 二、高表达 Opsin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响 |
| 三、低表达 Opsin 对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响 |
| 讨论 |
| 第二部分 视蛋白基因（Opsin）参与蚊抗药性机制的研究 |
| 材料与方法 |
| 一、材料 |
| 二、方法 |
| （一）高表达 Opsin 对蚊细胞 GPCR 信号通路相关基因及酶的影响 |
| （二）低表达 Opsin 对蚊细胞 GPCR 信号通路相关基因及酶的影响 |
| （三）Opsin 基因及 GPCR 信号通路相关基因在蚊活体敏感和抗性品系中的表达分析 |
| （四）Opsin、Arrestin 蛋白在蚊活体敏感和抗性品系中的表达分析 |
| （五）Opsin 基因在不同地区、不同抗性水平、不同杀虫剂筛选蚊活体中的表达分析 |
| 结果 |
| 一、高表达 Opsin 对蚊细胞 GPCR 信号通路相关基因及酶的影响 |
| 二、低表达 Opsin 对蚊细胞 GPCR 信号通路相关基因及酶的影响 |
| 三、Opsin 基因及 GPCR 信号通路相关基因在蚊活体敏感和抗性品系中的表达分析 |
| 四、Opsin、Arrestin 蛋白在蚊活体敏感和抗性品系中的表达分析 |
| 五、Opsin 基因在不同地区、不同抗性水平、不同杀虫剂筛选蚊活体中的表达分析 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 主要参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
（3）泛素—蛋白酶体途径对拟除虫菊酯神经毒性的影响及机制初探（论文提纲范文）
| 缩写词 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 UPP在DM致大鼠神经毒性的作用及机制初探 |
| 第一节 DM对大鼠海马细胞泛素化蛋白表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二节 DM对大鼠海马细胞凋亡的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三节 UPP对DM致大鼠海马细胞凋亡的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四节 UPP对DM致大鼠海马细胞凋亡的机制 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 UPP对BF致大鼠神经毒性的影响及机制初探 |
| 第一节 UPP对BF致大鼠海马细胞凋亡的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二节 UPP对BF致大鼠海马细胞氧化应激的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 UPP对Py所致SH-SY5Y细胞毒性的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 总结 |
| 综述 |
| 附录Ⅰ攻读学位期间发表论文目录 |
| 附录Ⅱ 附图 |
| 致谢 |
（4）溴氰菊酯致大鼠DNA损伤及损伤后修复功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 实验材料 |
| 1.1 主要试剂和材料 |
| 1.2 仪器设备 |
| 第二章 实验方法 |
| 2.1 动物分组及染毒方式 |
| 2.2 脏器系数的计算 |
| 2.3 肝脏组织学观察 |
| 2.4 酶化学法测细胞内抗氧化指标 |
| 2.5 彗星试验检测DNA损伤 |
| 2.6 RT-PCR(Reverse Transcription PCR) |
| 2.7 统计学处理 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 行为变化 |
| 3.2 各组大鼠肝脏的湿重及脏器系数的变化 |
| 3.3 光镜下肝脏组织形态学变化 |
| 3.4 肝内氧化和抗氧化指标活性的变化 |
| 3.5 DM对大鼠肝脏细胞DNA的损伤作用 |
| 3.6 DM对肝细胞MGMT及XRCC-5 mRNA表达的影响 |
| 3.7 附图 |
| 第四章 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 附录 |
| 致谢 |
（5）拟除虫菊酯类农药法医毒物动力学研究（一） ——氰戊菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯在家兔体内的死后分布研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 正文 |
| 前言 |
| 第一部分 氰戊菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯农药家兔灌胃染毒致死动物模型的建立 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 第二部分 氰戊菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯在家兔体内的死后分布研究 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 正文 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
（6）溴氰菊酯对鲫鱼的分子毒理效应研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 农药概述 |
| 1.2 农药对水环境的影响 |
| 1.3 溴氰菊酯的毒性研究进展 |
| 1.3.1 溴氰菊酯的理化性质 |
| 1.3.2 溴氰菊酯的急性毒性 |
| 1.3.3 溴氰菊酯的亚慢性毒性 |
| 1.3.4 溴氰菊酯的致畸和致突变性 |
| 1.3.5 溴氰菊酯对人的毒性 |
| 1.4 溴氰菊酯对水生生物的毒性 |
| 1.5 溴氰菊酯的中毒机理 |
| 1.6 鱼类的毒性实验方法 |
| 1.6.1 鱼类的急性实验 |
| 1.6.2 鱼类的慢性实验 |
| 1.6.3 鱼类的致畸实验 |
| 1.6.4 鱼类致突变实验 |
| 1.6.5 鱼类的毒物联合作用实验 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料及条件 |
| 2.1.1 实验用鱼 |
| 2.1.2 适应性驯养 |
| 2.1.3 药物 |
| 2.1.4 饲养条件 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 溴氰菊酯对鲫鱼的急性半致死实验 |
| 2.3.2 溴氰菊酯对血清生理生化指标的影响 |
| 2.3.3 鲫鱼肝脏和肾脏总酯酶和羧酸酯酶活力的测定 |
| 2.3.4 鲫鱼肝脏酯酶同工酶电泳 |
| 2.3.5 鲫鱼肝脏和肾脏DPC的测定 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 溴氰菊酯对鲫鱼的急性半致死实验 |
| 3.2 溴氰菊酯对血清生理生化指标的影响 |
| 3.2.1 溴氰菊酯对血清总蛋白的影响 |
| 3.2.2 溴氰菊酯对血清球蛋白和白蛋白的影响 |
| 3.2.3 溴氰菊酯对血清尿素氮的影响 |
| 3.2.4 溴氰菊酯对血清总脂的影响 |
| 3.3 溴氰菊酯对鲫鱼肝脏总酯酶和羧酸酯酶活力的影响 |
| 3.4 溴氰菊酯对鲫鱼酯酶同工酶的影响 |
| 3.5 溴氰菊酯对鲫鱼肝脏和肾脏DPC的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 溴氰菊酯的半致死实验 |
| 4.2 溴氰菊酯对鲫鱼血清生理生化指标的影响 |
| 4.2.1 溴氰菊酯对鲫鱼血清蛋白的影响 |
| 4.2.2 溴氰菊酯对鲫鱼血清尿素氮的影响 |
| 4.2.3 溴氰菊酯对鲫鱼血清总脂的影响 |
| 4.3 溴氰菊酯对肝酯酶和酯酶同工酶的影响 |
| 4.3.1 溴氰菊酯对肝脏总酯酶活力和羧酸酯酶活力的影响 |
| 4.3.2 溴氰菊酯对鲫鱼酯酶同工酶的影响 |
| 4.4 溴氰菊酯对鲫鱼肝脏和肾脏DPC影响 |
| 4.5 小结 |
| 参考文献 |
| 硕士期间发表的论文 |
| 致谢 |
（7）Ⅱ型拟除虫菊酯对雄性小鼠生殖毒性作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 本研究的意义和目的 |
| 第一部分 Ⅱ型拟除虫菊酯对雄性小鼠精子运动参数和睾丸脂质过氧化指标的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 Ⅱ型拟除虫菊酯类农药对小鼠睾丸组织中凋亡蛋白P53、Bcl-2表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 思考和展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 硕士期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（8）溴氰菊酯对鲫的毒性作用研究及残留检测（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 文献综述 |
| 1 拟除虫菊酯杀虫剂的发展概况 |
| 2 拟除虫菊酯的作用机理 |
| 3 拟除虫菊酯杀虫剂在水产养殖中的应用现状 |
| 4 拟除虫菊酯杀虫剂对水生态系统的毒理学效应 |
| 4.1 拟除虫菊酯杀虫剂对鱼类的急性毒性效应 |
| 4.2 拟除虫菊酯杀虫剂对鱼类的亚急性毒性效应 |
| 4.3 拟除虫菊酯杀虫剂对鱼类胚胎孵化的影响及致畸效应 |
| 4.4 拟除虫菊酯杀虫剂对鱼类的致突变效应 |
| 4.5 拟除虫菊酯杀虫剂对浮游生物的生态毒理学 |
| 4.6 拟除虫菊酯杀虫剂对水生态系统的研究展望 |
| 5 拟除虫菊酯在鱼体内的蓄积与释放 |
| 6 拟除虫菊酯在水体和水产品中的残留分析方法 |
| 6.1 色谱分析方法 |
| 6.2 免疫分析方法 |
| 7 溴氰菊酯菊酯简介 |
| 8 本研究的立项依据和目的 |
| 材料和方法 |
| 1 溴氰菊酯对鲫的急性毒性试验 |
| 1.1 试验药品的来源及配制 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 试验条件 |
| 1.4 试验方法 |
| 2 溴氰菊酯对鲫鳃肾肝组织解毒代谢酶的影响 |
| 2.1 试验药品的来源及配制 |
| 2.2 试验鱼来源及饲养 |
| 2.3 试验条件 |
| 2.4 试验设计 |
| 2.4.1 溴氰菊酯浓度的确定 |
| 2.4.2 染毒方式 |
| 2.4.3 鱼体组织的前处理 |
| 2.5 分析方法 |
| 3 溴氰菊酯对鲫鳃肾肝组织靶标酶的影响 |
| 3.1 试验药品的来源及配制 |
| 3.2 试验鱼来源及饲养 |
| 3.3 试验条件 |
| 3.4 试验设计 |
| 3.4.1 溴氰菊酯浓度的确定 |
| 3.4.2 染毒方式 |
| 3.4.3 鱼体组织的前处理 |
| 3.5 分析方法 |
| 4 溴氰菊酯对鲫遗传损伤的研究 |
| 4.1 试验药品的来源及配制 |
| 4.2 试验鱼来源及饲养 |
| 4.3 试验条件 |
| 4.4 试验设计 |
| 4.4.1 溴氰菊酯浓度的确定 |
| 4.4.2 染毒方式 |
| 4.4.3 血涂片的准备 |
| 4.4.4 数据记录及结果分析 |
| 5 水产品中氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯残留量的测定方法的建立 气相色谱法 |
| 5.1 主要仪器及试剂 |
| 5.2 色谱条件 |
| 5.3 分析步骤 |
| 5.3.1 标准曲线的绘制 |
| 5.3.2 样品及其制备 |
| 5.3.3 提取 |
| 5.3.4 净化 |
| 5.3.5 样品测定 |
| 5.3.6 结果计算 |
| 5.3.7 加标回收率的测定 |
| 5.3.8 精密度的测定 |
| 5.3.9 方法最低检测限(MDL)的测定 |
| 试验结果及讨论 |
| 1 溴氰菊酯对鲫的急性毒性试验 |
| 1.1 急性毒性试验中鲫的反应症状 |
| 1.2 急性毒性试验中鲫的死亡情况 |
| 2 溴氰菊酯对鲫鳃肾肝组织解毒代谢酶的影响 |
| 2.1 鲫各组织中GSH的含量 |
| 2.2 各组织中GSH-Px的活性 |
| 2.3.各组织中GST的活性 |
| 2.4 讨论 |
| 3 溴氰菊酯对鲫鳃肾肝组织中靶标酶影响的研究 |
| 3.1 各组织中的AChE的活性 |
| 3.2 讨论 |
| 4 溴氰菊酯对鲫遗传损伤的研究 |
| 4.1 微核细胞、核异常细胞镜检特征 |
| 4.2 不同浓度的溴氰菊酯对鲫血红细胞微核率的影响 |
| 4.3 不同浓度的溴氰菊酯对鲫血红细胞核异常率的影响 |
| 5 水产品中氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯残留量的测定方法的建立 气相色谱法 |
| 5.1 程序升温的优化 |
| 5.2 试验鱼肌肉的选择 |
| 5.3 配制标准溶液溶剂的选择 |
| 5.4 提取溶剂的选择 |
| 5.5 甲醇水溶液体积分数的选择 |
| 5.6 净化柱的选择 |
| 5.7 洗脱液的选择 |
| 5.8 色谱图及标准曲线 |
| 5.9 加标回收率、精密度及最低检出限(MDL) |
| 结论 |
| 缩略语表 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 图版 |
| 攻读硕士期间发表文章情况 |
（9）褪黑素对溴氰菊酯大鼠脑组织氧化损伤保护作用的研究（论文提纲范文）
| 缩写词 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 一、目的与意义 |
| 二、研究内容和技术路线 |
| 第一部分 MT对DM染毒5d大鼠脑组织氧化损伤的保护作用 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 MT对DM染毒10d大鼠脑组织和血清氧化损伤的保护作用 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第三部分 MT对DM诱导大鼠脑组织HO-1蛋白表达的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 小结 |
| 综述 褪黑素抗氧化保护作用机制及应用的研究进展 |
| 附图 |
| 致谢 |
（10）溴氰菊酯对大鼠脑组织线粒体膜通透性和细胞色素C表达的影响（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 1.主要试剂与仪器: |
| 2.实验动物及处理: |
| 3.脑组织线粒体的提取: |
| 4.脑线粒体膜通透性的测定: |
| 5.Cyt C表达的测定: |
| 6.Cyt C氧化酶(COx)的测定: |
| 7.蛋白含量的测定: |
| 8.统计及分析: |
| 结果 |
| 1.DM对大鼠脑线粒体膜通透性的影响: |
| 2.DM对大鼠脑皮层和海马细胞色素C表达的影响: |
| 3.DM对大鼠脑皮层和海马线粒体COx的影响: |
| 讨论 |
四、溴氰菊酯对大鼠脑组织G蛋白转换的影响（论文参考文献）
- [1]基于鳃和脑部AChE分析的环境胁迫下斑马鱼行为响应机制研究[D]. 司桂云. 山东师范大学, 2016(03)
- [2]视蛋白基因参与蚊抗药性机制的研究[D]. 孙艳. 南京医科大学, 2012(01)
- [3]泛素—蛋白酶体途径对拟除虫菊酯神经毒性的影响及机制初探[D]. 黄晓薇. 华中科技大学, 2010(11)
- [4]溴氰菊酯致大鼠DNA损伤及损伤后修复功能的影响[D]. 石微. 青岛大学, 2010(03)
- [5]拟除虫菊酯类农药法医毒物动力学研究（一） ——氰戊菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯在家兔体内的死后分布研究[D]. 关培英. 山西医科大学, 2008(03)
- [6]溴氰菊酯对鲫鱼的分子毒理效应研究[D]. 夏伟. 华中师范大学, 2008(10)
- [7]Ⅱ型拟除虫菊酯对雄性小鼠生殖毒性作用[D]. 赵翊. 兰州大学, 2008(12)
- [8]溴氰菊酯对鲫的毒性作用研究及残留检测[D]. 胡琼予. 四川农业大学, 2007(04)
- [9]褪黑素对溴氰菊酯大鼠脑组织氧化损伤保护作用的研究[D]. 孙敏. 华中科技大学, 2007(05)
- [10]溴氰菊酯对大鼠脑组织线粒体膜通透性和细胞色素C表达的影响[J]. 陈丹,石年,黄晓薇,刘琳琳. 中华劳动卫生职业病杂志, 2006(06)