一、脑nestin-ir神经元的发现-形态、化学、投射和功能(论文文献综述)
王缓缓[1](2017)在《基底前脑巢蛋白阳性及阴性胆碱能神经元自然衰老及抗损伤的研究》文中认为研究背景基底前脑一般指位于大脑半球内侧面一些灰质结构,与其他脑区无明显界限。基底前脑是一个具有高度异质性的区域,含有多种不同化学属性的神经元,主要包括胆碱能神经元、谷氨酸能神经元以及r-氨基丁酸神经元等。最近研究发现成年大鼠和成人基底前脑存在着一群巢蛋白免疫阳性(nestin-ir)神经元,并证实这群神经元属于胆碱能神经元。进一步研究发现巢蛋白免疫阳性(nestin-ir)胆碱能神经元对学习记忆及对中枢神经系统的损伤与修复起重要作用。国内外初步研究提示相对于巢蛋白阴性胆碱能神经元,基底前脑的巢蛋白免疫阳性胆碱能神经元可能具有更强的抗损伤能力,表现出更好的神经可塑性。目的本课题采用基底前脑神经元原代培养方法,通过细胞免疫荧光染色研究巢蛋白免疫阳性及阴性胆碱能神经元抗衰老及抗氧化损伤能力的不同,进一步揭示两种神经元的神经可塑性的差异,为相关的神经系统疾病的治疗来提供新基础。方法实验采用出生24h以内的新生SD大鼠,每次用量8只左右,取其基底前脑处的神经元进行体外培养,培养周期11天,分别在培养的第1天,第3天,第5天,第7天,第9天和第11天,取培养的基底前脑神经元细胞爬片进行免疫荧光实验,研究巢蛋白免疫阳性及免疫阴性胆碱能神经元的自然衰老过程。抗损伤的研究采用出生24h以内的新生SD大鼠,每次用量8只左右,取其基底前脑部位的神经元进行体外培养,在培养的第3天时,放入150μmol/L H2O2构建细胞损伤模型,作用12h后,取出培养的基底前脑神经细胞爬片进行免疫荧光实验,观察两种神经元得抗损伤能力差异。结果体外培养第三天和第五天细胞生长达到高峰,这时神经元胞体较大,神经元突起粗大,部分神经元之间形成网状的突触连接。其中可见巢蛋白阳性神经元胞体较大,突起粗大且长;巢蛋白阴性神经元胞体小,突起较少。体外培养五天之后的神经元细胞数目逐渐减少,胞体饱和度降低。但巢蛋白阳性神经元数目下降速率缓慢,占细胞总数的比例逐渐增加,巢蛋白阴性神经元数目下降速率较快,所占细胞总数的比例逐渐下降。正常衰老组从培养第7天开始巢蛋白阳性及阴性胆碱能神经元数目差异明显,用T检验方法,P<0.05,有统计学意义。这表明在相同的培养条件下,巢蛋白免疫阳性和阴性胆碱能神经元自然衰老和死亡速度是不同,巢蛋白免疫阳性胆碱能神经元细胞数目下降的速率比巢蛋白阴性胆碱能神经元慢。在神经元抗氧化损伤实验中,用T检验方法分析正常组和损伤组的巢蛋白阳性及阴性胆碱能神经元发现,正常组中两种神经元数目无明显差异,P>0.05,无统计学意义。而损伤组中神经元P<0.05,有统计学意义。这充分说明H2O2氧化损伤干预后巢蛋白阳性胆碱能神经元存活的数目较巢蛋白阴性胆碱能神经元多,细胞形态更好,比巢蛋白阴性胆碱能神经元有更强的抗损伤能力。结论体外培养的基底前脑神经元自然衰老及氧化损伤研究结果表明,与巢蛋白阴性胆碱能神经元相比,基底前脑的巢蛋白阳性胆碱能神经元抗衰老和抗损伤能力更强,表现出较强的神经可塑性。
张昊,王勇[2](2016)在《秋水仙碱对基底前脑巢蛋白阳性和阴性胆碱能神经元的影响》文中提出目的:通过研究侧脑室注射秋水仙碱前后基底前脑巢蛋白阳性和阴性胆碱能神经元变化,探讨巢蛋白表达对基底前脑神经元机能的影响及其可能机制。方法:成年健康雌性SD大鼠随机分为正常对照组和侧脑室注射秋水仙碱组,术后分别于24 h、48 h、3 d、7 d、14 d和28 d取脑行冷冻切片与免疫组织化学显色,比较秋水仙碱注射后不同时间点基底前脑巢蛋白+和巢蛋白-胆碱能神经元的数目变化。结果:大鼠侧脑室秋水仙碱注射后24 h,基底前脑的内侧隔核(MS)、斜角带核垂直支(vDB)和水平支(hDB)的巢蛋白+和巢蛋白的胆碱能神经元数目都急骤下降。随着时间的推移巢蛋白+神经元数目逐渐恢复,术后14 d,巢蛋白+神经元数目基本恢复至正常水平,但巢蛋白-胆碱能神经元数目一直维持较低水平。结论:侧脑室注射秋水仙碱后,基底前脑巢蛋白+和巢蛋白-的胆碱能神经元都急骤减少,但巢蛋白+神经元在减少后可逐渐恢复,而巢蛋白-神经元则不能恢复。
马同军,丁见,刘嵩,熊克仁[3](2012)在《眼镜蛇毒对成年大鼠海马CA3区Nestin表达的影响》文中提出目的探讨眼镜蛇毒对成年大鼠海马CA3区巢蛋白(Nestin)阳性细胞表达的影响。方法采用免疫组织化学方法,观察并比较Nestin阳性细胞在眼镜蛇毒组、生理盐水组、正常对照组大鼠海马CA3区的表达。结果眼镜蛇毒组大鼠海马CA3区Nestin阳性细胞较生理盐水组、正常对照组表达明显增强(P<0.01)。结论眼镜蛇毒对成年大鼠海马CA3区Nestin表达有上调作用。
孙国刚,欧册华,陈波,陈跃,范光碧[4](2008)在《急性应激对成年鼠血浆肾素活性、AngⅡ水平和海马细胞骨架的影响》文中提出目的:观察急性应激对雌、雄成鼠血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的影响和应激鼠背侧海马细胞骨架的改变。方法:按雌、雄性分组,将SD成鼠束缚并倒悬应激6h/d,3d后通过放射免疫法测定PRA、AngⅡ水平,用免疫组织化学方法观察海马巢蛋白(nestin)、神经丝蛋白200(NF200)表达的变化。结果:雌、雄性应激大鼠血浆PRA水平均比正常对照组显着下降(P<0.01),而且雌、雄动物血浆PRA/AngⅡ比值下降幅度接近。②应激组背侧海马齿状回、CA3区内nestin、NF200免疫阳性物总面积(sum of area,SA)和累积吸光度(integral absorbance,IA)均明显低于对照组(P<0.01)。结论:急性应激时大鼠背侧海马内神经元的细胞骨架损害可能与应激动物血浆PRA水平变化存在某种联系。
孙国刚,陈波,徐杰,范光碧,陈跃,聂业[5](2008)在《应用改进的大鼠应激模型证实海马CA3区神经元Nestin、NPY表达变化》文中研究说明【目的】应用改良的连续、恒定复合型应激大鼠模型,观察其血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平和海马CA3区的Nestin、NPY表达。【方法】将雌性成鼠束缚并倒悬应激6h/d,用放射免疫法测定急性应激(3d)后血浆PRA、AngⅡ水平,用免疫组织化学方法观察应激3d、21d后CA3区锥体层细胞的Nestin、NPY表达变化。【结果】①急性应激组血浆PRA和AngⅡ水平比正常对照组显着降低(P<0.01),尤以PRA水平的变化更明显。②急、慢性应激组海马CA3区的Nestin、NPY免疫阳性反应产物总面积(SA)和体视学光密度(IOD)值均较对照组低(P<0.01),急性组的组织损害比慢性组更严重。【结论】本研究成功地构建了具有科学理论依据和实用价值的复合性应激大鼠模型,并利用此模型证实应激早期大鼠血浆PRA和AngⅡ水平有降低;观察急、慢性应激大鼠海马CA3区NPY和Nestin表达变化及其变化规律,结果提示NPY及其水解产物在应激所致海马神经元细胞骨架损害和谷氨酸释放过程中可能产生一定的影响。
孙国刚,范光碧,陈波,徐杰,高小青,聂业[6](2008)在《正常成鼠海马不同部位CA3区巢蛋白、神经肽Y表达观察》文中提出目的和方法通过免疫组织化学和苏木精复染的方法,观察正常成年SD大鼠海马CA3区锥体细胞层内巢蛋白(nestin)、神经肽Y(NPY)的表达特点。结果整个海马内各部CA3区的巢蛋白、NPY免疫阳性反应都是高度一致的。在背侧海马中部和腹侧海马CA3区的巢蛋白、NPY和NF200强阳性细胞密集地排列,而背侧海马嘴部和尾部CA3区的三类强阳性细胞则呈稀疏排列,后者散在地分布在大胞体的弱阳性和阴性反应的细胞之间。结论成鼠海马各部CA3区锥体层能一致地表达巢蛋白和NPY,其中免疫强阳性细胞细胞属于成熟的神经元,而弱阳性或阴性细胞则属于神经前体细胞。
范光碧,孙国刚[7](2007)在《捆绑应激对学习和记忆的影响研究进展》文中指出
冯亚玫[8](2007)在《鸡INR的显微形态及SP-mRNA的分布》文中研究表明肠Remak神经(Intestinal nerve of Remak,INR)是禽类特有的一条自主神经节链,由空肠和十二指肠交界处延伸至泄殖腔,其间频繁地发出分支到肠道。不同于哺乳动物,禽类肠神经系统由内源性神经丛和INR共同组成,INR对禽类的消化、生殖都有重要的调节作用。P物质(Substance P,SP)是一种由11个氨基酸组成的脑肠肽,对维持肠道的正常功能起到重要的作用。本试验在光镜下研究鸡INR的显微形态,合成地高辛标记SP-RNA探针并用ISHH的方法从基因水平研究了SP-mRNA在INR内的分布,为进一步研究禽类特有的INR对消化、免疫和生殖等生理过程的调节作用提供形态依据。试验Ⅰ鸡INR显微形态学研究INR是禽类特有的一条神经节链。取鸡IN制备冰冻切片并将切片分别进行苏木精-伊红和甲苯胺蓝染色。在光镜下观察INR内神经元的形态,统计神经元的数量,测量神经元的面积并用SPSS软件对数据进行分析。通过观察发现,不同肠段INR内神经元的形态存在差异。数量统计显示INR神经节内包含大量的神经元胞体,一只鸡的INR内神经元的总数为31821个,并且直肠段INR内的细胞数量最多,为27109个。空肠段INR内神经元的平均面积最大,达到478.46μm2,面积较大的神经元所占的比例也最高;而直肠段INR内单个神经元的平均面积最小,约为391.74μm2。可以推测不同段INR中神经细胞的形态、大小和数量具有一定差异,这种差异可能与其对胃肠道功能的调节有关。试验ⅡSP-mRNA探针的合成以GenBank中查得的序列号为XM 418674的SP-mRNA序列为参照设计引物。提取鸡的总RNA,通过反转录套式PCR扩增目的片段从鸡的总RNA中扩增SP基因片段,将目的DNA的纯化回收后,用TA克隆的方法将目的片段克隆到pGM-easy T载体中并转化大肠杆菌,挑取阳性克隆,测序鉴定为目的片段。分别利用pGM-T easy质粒中T7和SP6启动子及T7和SP6RNA聚合酶,以,线性化的SP/pGM-T easy为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针。将合成好的DNA探针进行纯化,然后进行斑点杂交实验检验探针的标记效率和浓度。斑点杂交实验表明探针合成成功,浓度接近100 ng/μl,可以用于ISHH试验。试验ⅢINR内的原位杂交反应通过原位杂交(in situ hybridization histochemistry,ISHH)技术,用自行合成的探针探查SP-mRNA在鸡INR中的分布情况.结果表明,鸡INR中ISHH阳性神经元数量众多,空回肠段和直肠段INR中的阳性细胞分别占神经元总量的82.98%和98.01%。阳性细胞呈多突起的椭圆形或梭形,在INR神经节中较有规律地层状分布或成群出现,在神经节边缘分布更为密集,并且在节间束也有少量的阳性细胞分布。本试验从基因水平证明INR中大部分神经元有SP的mRNA转录,这些神经元作为外来SP神经纤维支配肠道和输卵管。
李东培,汪华侨,姚志彬[9](2004)在《脑nestin-ir神经元的发现-形态、化学、投射和功能》文中提出巢蛋白(nestin)属于中间丝蛋白家族,由于其主要在胚胎期和成年的神经前体细胞表达的特性,自发现以来,一直被视为神经前体细胞的标志物。然而,本实验室首次观察到,正常成年大鼠和成人一些脑区内的神经元也呈nestin免疫阳性反应。关于这些nestin免疫反应阳性神经元(nestin-ir神经元)的许多特性尚需阐明,如这些nestin-ir神经元的化学属性是什么?是否为投射神经元?投射的靶区何在等。近几年来,本实验室针对这些神经元的分布、形态及其可能的特性和功能进行了一些相关的研究,现将已取得的研究成果作一综述。
二、脑nestin-ir神经元的发现-形态、化学、投射和功能(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、脑nestin-ir神经元的发现-形态、化学、投射和功能(论文提纲范文)
(1)基底前脑巢蛋白阳性及阴性胆碱能神经元自然衰老及抗损伤的研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
前言 |
材料和方法 |
结果 |
讨论 |
结论 |
参考文献 |
附录 |
附录I 中英文缩略语词汇表 |
附录II 研究生期间已发表的论文 基底前脑巢蛋白阳性胆碱能神经元抗损失作用 |
(2)秋水仙碱对基底前脑巢蛋白阳性和阴性胆碱能神经元的影响(论文提纲范文)
1 材料和方法 |
1.1 实验动物及实验试剂 |
1.2 动物模型与切片 |
1.3 巢蛋白和ChAT免疫组织化学反应 |
1.4 计数细胞和统计学处理 |
2 结果 |
2.1 基底前脑巢蛋白阳性神经元的分布及注射秋水仙碱后神经元数目的变化 |
2.2 基底前脑ChAT阳性神经元的分布及秋水仙碱注射后神经元数目的变化 |
2.3 秋水仙碱对基底前脑巢蛋白+和巢蛋白-胆碱能神经元的影响 |
3 讨论 |
3.1 巢蛋白在基底前脑神经元中的表达 |
3.2 巢蛋白在神经损伤的表达修复 |
3.3 巢蛋白表达调控机制对AD疾病的研究 |
(3)眼镜蛇毒对成年大鼠海马CA3区Nestin表达的影响(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 蛇毒 |
1.2 实验动物 |
1.3 实验方法 |
1.4 阳性细胞计数及图像处理 |
1.5 统计学分析 |
2 结果 |
3 讨论 |
(4)急性应激对成年鼠血浆肾素活性、AngⅡ水平和海马细胞骨架的影响(论文提纲范文)
材 料 和 方 法 |
1 动物分组 |
2 应激处理 |
3 采血、取脑及组织处理 |
4 血浆肾素活性、血管紧张素Ⅱ的水平测定 |
5 切片和组织染色 |
6 图像采集 |
7 统计学处理 |
结 果 |
1 血浆PRA和AngⅡ的水平测定结果 |
2 背侧海马nestin、NF200的表达变化 |
讨 论 |
1 急性应激对雌、雄成鼠血浆PRA和AngⅡ水平的影响 |
2 关于应激早期大鼠海马内的细胞骨架损害 |
3 应激时血浆PRA水平变化与海马神经细胞损害的可能关系 |
(6)正常成鼠海马不同部位CA3区巢蛋白、神经肽Y表达观察(论文提纲范文)
1 材料和方法 |
1.1 动物 |
1.2 取脑、组织处理和染色 |
1.3 图象采集与数据分析 |
2 结果 |
2.1 NPY、nestin免疫阳性反应的空间分布规律 |
2.2 海马各部CA3区的nestin、NPY和NF200阳性细胞的形态特点 |
3 讨论 |
(7)捆绑应激对学习和记忆的影响研究进展(论文提纲范文)
1 神经科学关于学习和记忆的基本原理研究 |
2 恐惧记忆与心理压力对脑内神经细胞形态的影响研究概况 |
3 经典的学习与记忆的脑内形态学理论的缺陷和最新发现 |
4 巢蛋白和脑内神经元研究的新进展 |
5 NMDA受体活性同nestin-ir阳性神经细胞关系研究新动向 |
(8)鸡INR的显微形态及SP-mRNA的分布(论文提纲范文)
中文摘要 |
英文摘要 |
前言 |
第一部分 文献综述 |
第一章 INR概述 |
1.INR内神经元的分类及形态特征 |
2.INR神经元的电生理特性 |
3.INR的投射方式 |
4.INR的发育 |
5.INR内神经递质和神经肽的分布 |
5.1 肽能神经的分布 |
5.2 乙酰胆碱酯酶(AChE)阳性神经分布 |
5.3 儿茶酚胺能神经分布 |
6.INR内副交感和交感节后神经元的组成 |
7.INR的功能 |
参考文献 |
第二章 P物质研究进展 |
1 SP的部分生物学特点 |
1.1 SP的结构 |
1.2 SP的代谢 |
2.SP的分布 |
2.1 SP在神经系统的分布 |
2.2 SP在神经系统以外的分布 |
3.SP的生理作用 |
3.1 在中枢神经系统中的作用 |
3.2 在周围神经系统中的作用 |
3.3 在痛觉调制中的作用 |
3.4 对心血管系统的作用 |
3.5 免疫调节作用 |
3.6 对神经内分泌的影响 |
3.7 对生殖内分泌的影响 |
4.SP与肠道的关系 |
4.1 SP在肠道内源性神经中的分布及其对肠道的作用 |
4.1.1 SP在肠道内源性神经中的分布 |
4.1.2 SP神经在肠道的发育 |
4.1.3 SP对肠道的作用及机制 |
4.2 SP与肠道疾病的关系 |
参考文献 |
第二部分 实验研究 |
第一章 鸡INR显微形态学研究 |
1.材料及方法 |
1.1 实验动物 |
1.2 方法 |
1.2.1 取材及冰冻切片 |
1.2.2 HE染色和甲苯胺蓝染色 |
1.2.3 数量统计 |
1.2.4 面积测算 |
2.结果 |
2.1 形态学观察结果 |
2.2 数据统计结果 |
2.2.1 INR神经元的数量统计结果 |
2.2.2 神经细胞平均面积的统计结果 |
3.讨论 |
参考文献 |
第二章 SP-mRNA探针的合成 |
1.材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 动物 |
1.1.2 试剂 |
1.2 方法 |
1.2.1 引物的设计 |
1.2.2 鸡的总RNA的提取 |
1.2.3 通过反转录套式PCR扩增目的片段 |
1.2.4 目的DNA的纯化回收 |
1.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 |
1.2.6 SP/pGM-easy T 质粒的构建 |
1.2.7 将SP/pGM-easy T 质粒转化到大肠杆菌TOP10株感受态细胞中 |
1.2.8 目的片段DNA的鉴定 |
1.2.9 线形化SP/pGM-easy T DNA |
1.2.10 回收线形化的SP/pGM-easy T DNA |
1.2.11 体外转录及Dig(异羟基洋地黄毒苷配基,地高辛配基)标记 |
1.2.12 转录后DNA探针的纯化 |
1.2.13 斑点杂交 |
2.结果 |
2.1 通过套式PCR扩增目的片段的电泳结果 |
2.1.1 一扩RT-PCR的电泳结果 |
2.1.2 二扩PCR的电泳结果 |
2.2 目的片段的鉴定结果 |
2.3 SP/pGM-easy T重组质粒测序结果 |
2.4 纯化的SP-RNA探针的电泳结果 |
2.5 斑点杂交试验结果 |
3.讨论 |
参考文献 |
第三章 INR内的原位杂交反应 |
1.材料与方法 |
1.1 实验动物 |
1.2 试剂 |
1.3 方法 |
1.3.1 实验准备 |
1.3.2 组织切片的制备 |
1.3.3 原位杂交实验 |
1.3.4 甲苯胺蓝染色 |
1.3.5 数量统计 |
2.结果 |
2.1 原位杂交试验结果 |
2.2 甲苯胺蓝染色结果 |
2.3 数量统计结果 |
3.讨论 |
参考文献 |
全文总结 |
附录 |
论文发表情况 |
致谢 |
四、脑nestin-ir神经元的发现-形态、化学、投射和功能(论文参考文献)
- [1]基底前脑巢蛋白阳性及阴性胆碱能神经元自然衰老及抗损伤的研究[D]. 王缓缓. 大理大学, 2017(02)
- [2]秋水仙碱对基底前脑巢蛋白阳性和阴性胆碱能神经元的影响[J]. 张昊,王勇. 解剖学杂志, 2016(03)
- [3]眼镜蛇毒对成年大鼠海马CA3区Nestin表达的影响[J]. 马同军,丁见,刘嵩,熊克仁. 蛇志, 2012(02)
- [4]急性应激对成年鼠血浆肾素活性、AngⅡ水平和海马细胞骨架的影响[J]. 孙国刚,欧册华,陈波,陈跃,范光碧. 中国病理生理杂志, 2008(10)
- [5]应用改进的大鼠应激模型证实海马CA3区神经元Nestin、NPY表达变化[J]. 孙国刚,陈波,徐杰,范光碧,陈跃,聂业. 中山大学学报(医学科学版), 2008(05)
- [6]正常成鼠海马不同部位CA3区巢蛋白、神经肽Y表达观察[J]. 孙国刚,范光碧,陈波,徐杰,高小青,聂业. 南方医科大学学报, 2008(09)
- [7]捆绑应激对学习和记忆的影响研究进展[J]. 范光碧,孙国刚. 四川解剖学杂志, 2007(02)
- [8]鸡INR的显微形态及SP-mRNA的分布[D]. 冯亚玫. 南京农业大学, 2007(05)
- [9]脑nestin-ir神经元的发现-形态、化学、投射和功能[J]. 李东培,汪华侨,姚志彬. 神经解剖学杂志, 2004(06)