一、人脐静脉内皮细胞用于构建组织工程心脏瓣膜的实验研究（论文文献综述）
聂佳莹[1]（2021）在《新机械方案制备富集脂肪源细胞外囊泡的成脂水凝胶并构建组织工程脂肪》文中指出背景:脂肪移植术已广泛用于美容和重建手术中的软组织填充,但存在移植后不确定重吸收（例如30%-70%的重吸收）、有限的存活率以及对供体部位不可避免的伤害等缺陷。商业化的透明质酸和胶原蛋白可以用作软组织填充产品,但是它们的填充效果不能长期保持。因此,迫切需要开发一种作为永久性软组织填充剂的可注射产品。脱细胞脂肪组织（decellularized adipose tissues,DAT）支架具有与脂肪组织细胞外基质相似的生物学特性,包括结构,机械模量和蛋白质组成。基于DAT的优势,DAT已在脂肪组织工程学中得到了广泛的研究。但是,进一步改善DAT的血管生成将有利于DAT的脂肪形成。此外,DAT水凝胶的可注射性更适合于微创填充。因此,我们创造性地使用机械方法从脂肪抽吸物中分离出脂肪组织来源的细胞外囊泡（adipose tissue derived extracellular vesicles,AT-EVs）作为血管生成和脂肪生成的诱导剂,并制备了富含AT-EVs的DAT水凝胶用于组织工程脂肪。方法:本研究分为两个部分,其一是AT-EVs和DAT的获取和表征。首先采用CD63-perilipin免疫荧光染色法检测AT-EVs在脂肪组织中的分布;然后通过匀浆并反复冷冻和融化（下文简称为冻融）从脂肪抽吸物中获取脂肪组织提取液（Adipose liquid extract,ALE）和少脂质脂肪组织。通过差速离心法从ALE中分离出AT-EVs,使用透射电镜、Nano Sight粒径分析、western blotting对AT-EVs进行表征。DAT水凝胶是通过优化的脱细胞技术制备的,使用扫描电镜对DAT水凝胶进行表征。其二是联合AT-EVs与DAT水凝胶构建工程组织脂肪。首先是通过将三个不同浓度的AT-EVs与血管内皮细胞和3T3-L1脂肪祖细胞共培养,筛选出AT-EVs促进血管生成和脂肪生成的最佳剂量。然后以最佳剂量与DAT水凝胶混合,将富集AT-EVs的DAT水凝胶注射到重度免疫缺陷小鼠-SCID小鼠的右背部皮下,并在左侧背部皮下注射等体积的DAT水凝胶作为对照组。术后第14天,将AT-EVs补充注射到右侧背部的新生组织中,并向左侧背部注射相同量的PBS溶液作为对照。在术后第2、4和8周收集两侧的样品,并进行体积测量、HE染色以及CD31-perilipin免疫荧光染色。结果:经CD63-perilipin免疫荧光染色发现,在脂肪组织的细胞间隙中存在AT-EVs,通过组织匀浆后差速离心,我们可以获取结构为圆形双层膜囊、颗粒粒径在33.0～272.5 nm之间,峰粒径为141.5 nm、与脂肪组织相比,表达较高的EVs表面标记物（CD63和TSG101）,不表达细胞骨架蛋白（β-actin）和细胞外基质蛋白（纤维连接蛋白）的AT-EVs。脂肪组织经脱细胞之后,SEM显示DAT主要由排列松散的条纹状胶原构成,多孔,未见脂滴和细胞核。制备成DAT水凝胶后,SEM示微观结构更致密,孔隙更多,孔径明显小于DAT。体外实验示,AT-EVs促进血管生成和脂肪生成的最佳剂量为50μg/ml。在体内实验中,结果显示实验组水凝胶在术后第4周和第8周体积保留率高于对照组。CD31荧光染色示实验组水凝胶血管新生高于对照组在术后第2周、第4周和第8周。HE染色、perilipin荧光染色示实验组水凝胶脂肪新生高于对照组在术后在第4周和第8周。结论:新机械方案可以在不通过体外培养的条件下获取AT-EVs,且富含AT-EVs的DAT水凝胶可促进血管生成和脂肪生成,并可以作为脂肪组织工程学的有前途的生物材料。
潘超[2]（2021）在《载丹参酮ⅡA磺酸钠生物凝胶样支架制备及其生物3D打印实验研究》文中研究表明背景与目的:近年来,冠心病尤其大多急性冠脉综合征患者都表现出血管内皮功能失调、炎性因子升高等特征,内皮功能紊乱已成为预测该类不良事件的重要因素之一。用来治疗冠脉狭窄性心血管疾病的支架系统虽具有一定的近期疗效,但仍存在诸多弊端。生物3D打印（Bio-3D printing,3DP）技术作为生命科学领域最前沿的发展方向,将其应用于医疗行业已是大势所趋。丹参酮ⅡA磺酸钠（sodium tanshinone ⅡA sulfonate,STS）是中药丹参的主要活性成分丹参酮ⅡA的水溶性衍生物,许多研究表明其具有保护细胞和促血管化作用。将STS与明胶-甲基丙烯酸酐（Gelatin methacrylate,GelMA）水凝胶混合,提高打印墨水的生物活性,并利用生物3D打印技术,制备含人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）的生物凝胶膜与支架。通过检测相关指标,来评价STS能否在生物3D打印过程中对细胞产生保护作用以及能否促进三维支架血管化,为中药丹参在生物3D打印领域的应用提供新思路、新方法。方法:选用人脐静脉内皮细胞（HUVECs）为实验对象。（1）利用购买的HUVECs进行体外活力实验,CCK-8活力检测法探索出最适细胞生长的丹参酮ⅡA磺酸钠的浓度范围;（2）将不同浓度的STS与GelMa水凝胶混合,制备出含丹参酮ⅡA磺酸钠的明胶-甲基丙烯酸酐（STS/GelMa）生物墨水,并利用细胞生物3D打印机采用挤压法制备出含不同浓度的丹参酮ⅡA磺酸钠/明胶-甲基丙烯酸酐生物凝胶膜,通过评价其降解性、可注射性与表面征象,并结合（1）选出适合后续实验的STS最终浓度;（3）将含终浓度STS的GelMa生物墨水与HUVECs按一定比例混合,利用3D打印机制备含HUVECs的STS/GelMa生物凝胶膜,CCK-8活力检测法和荧光PCR体外扩增法分别评价其活性、促血管化作用;（4）以终浓度的STS、GelMa水凝胶和HUVECs细胞悬液为打印材料,将这三种材料按照一定比例共混为STS/GelMa/HUVECs混合生物墨水,利用3D打印机制备出含HUVECs的STS/GelMa生物凝胶样支架,通过CCK-8活力检测法和荧光PCR体外扩增法评价该支架的生物相容性。结果:（1）内皮细胞活力:与对照组相比,STS浓度在25-75ug/m L范围内,其活性呈上升趋势（P<0.05）;当STS浓度大于75ug/m L时,细胞活力呈下降趋势。因此,选用25-75ug/m L浓度的丹参酮ⅡA磺酸钠作为后续实验研究。（2）STS/GelMa凝胶膜的降解性评价:随着时间的增加,各组STS/GelMa凝胶膜均发生降解;与对照组相比,加入STS会加速STS/GelMa生物水凝胶的降解,且浓度越高其降解速度越快。可注射性评价:在最适浓度范围内的生物水凝胶其可注射性好,不受浓度影响。表面征象评价:显微镜下示与对照组相比,加入STS会使凝胶膜表面出现空隙、凹陷现象,且浓度越高该现象越明显。综合上述实验结果,选出50ug/m L时为STS的最终浓度,在该浓度下,STS/GelMa生物水凝胶的可注射性好、降解速度适中;且含STS的GelMa生物凝胶膜表面征象较为致密、平坦,空隙、凹陷现象相对较少。（3）含HUVECs的STS/GelMa凝胶膜中细胞活力:STS/GelMa/HUVECs和GelMa/HUVECs凝胶膜内细胞均呈良性增殖生长、能保持较好活性;与对照组相比,加入STS后随着培养时间的增加,含STS的凝胶膜内细胞活性更强（P<0.05）。荧光PCR体外扩增实验表明:STS/GelMa/HUVECs和GelMa/HUVECs凝胶膜内的PECAM-1、eNOS和VEGFA基因表达信号均上调;与对照组相比,加入STS后随着培养时间的增加,含STS的凝胶膜内HUVECs的PECAM-1、eNOS和VEGFA基因表达量更高（P<0.05）。以上实验结果表明加入STS可促进细胞增殖生长,并增加其促新血管生长的可能性。（4）含HUVECs的STS/GelMa凝胶样支架细胞生物相容性实验表明:STS/GelMa/HUVECs和GelMa/HUVECs凝胶样支架内细胞均可良性生长;与对照组相比,加入STS后随着培养时间的增加,含STS的凝胶样支架内细胞活性和血管形成相关基因表达量更高（P<0.05）。此次实验结果与生物凝胶膜结果基本相符,说明加入STS的确有利于STS/GelMa/HUVECs内细胞的生长与增殖,而且对支架血管化也有一定促进作用。结论:本实验将STS应用于生物3D打印实验中,不仅增加了GelMa水凝胶的生物活性,而且减少了打印过程中细胞的损伤,增加了细胞增殖活性;最重要的是加入STS提高了打印样品的生物相容性,为研究中药丹参在生物3D打印领域的应用提供新思路、新方法。
覃中杰[3]（2021）在《流体剪切力-材料表面化学共刺激对人脐静脉内皮细胞行为影响的研究》文中提出目的:流体剪切力（FSS）联合材料表面化学官能团共同刺激人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,观察不同材料表面上HUVECs对梯度FSS的应答情况,探讨材料化学对细胞响应剪切力刺激的作用。方法:通过自组装单分子层技术在玻片表面分别制备末端基团为-OH、-CH3和-NH2的自组装单分子层,空白Glass玻片作为对照,通过检测材料表面水接触角对材料进行表征。将HUVECs分别接种于Glass、-OH、-NH2和-CH3组玻片表面,培养15分钟内检测ATP的释放量,1小时检测NO的释放量,1小时后Western blotting对内皮型一氧化氮合酶（e NOS）的表达进行测定,48小时后在激光共聚焦显微镜下观察HUVECs中黏着斑及细胞骨架的形成,BCA法测定总蛋白量。根据已有的平行板流动腔搭建剪切力刺激平台,将HUVECs分别接种于4组玻片表面,当细胞融合至80%时分别加载5dyn/cm2、15dyn/cm2、20dyn/cm2 FSS 1小时,加载剪切力15分钟内检测ATP的释放量;1小时检测NO的释放量。加载剪切力1小时后Western blotting检测e NOS的表达,BCA法测定总蛋白量。结果:通过水接触角的检测证明自组装单分子层技术成功制备了表面分别具有亲/疏水性适中的-NH2、强亲水性-OH和强疏水性-CH3化学官能团的材料。将HUVECs接种在Glass以及具有不同末端基团的玻片上,单纯材料表面化学刺激下各组内皮细胞各项应答无明显差异。与内皮细胞在Glass表面上细胞骨架和黏着斑对比:-NH2亲水性和疏水性适中,内皮细胞在-NH2玻片上形成了黏附质量最佳的细胞骨架和黏着斑;-OH基团具有强亲水性,-CH3基团具有强疏水性,均不利于细胞黏附,-OH和-CH3玻片上形成了黏附质量相对较差的细胞骨架和黏着斑。在已有的平行板流动腔装置的基础上成功搭建了剪切力刺激平台。加载梯度FSS于材料表面化学共同刺激内皮细胞后发现,LFSS（5dyn/cm2）没有引起Glass和-NH2上的内皮细胞产生应答,但是低剪切力引起了-OH和-CH3的强烈应答;PFSS（15dyn/cm2）和HFSS（20dyn/cm2）引起了所有组细胞的应答,其中-NH2组的应答水平最强烈,其次为Glass组,-OH与-CH3组应答水平相当且处于最低状态。-OH和-CH3组在FSS梯度刺激时,LFSS时应答最强烈,其次PFSS,最弱为HFSS。结论:材料表面化学官能团通过影响HUVECs在材料表面形成的黏着斑和细胞骨架的质量,改变了HUVECs响应FSS刺激的起始阈值和使细胞产生最佳应答的剪切力阈值,从而使内皮细胞对剪切力刺激的应答状态发生改变。HUVECs上黏着斑和细胞骨架可能是材料表面化学刺激与物理剪切力刺激的共同作用位点。
张迎梅[4]（2020）在《静电纺PGS/SF复合医用管材的制备及性能研究》文中研究表明生物材料对于构建人工血管是必不可少的,其中生物弹性体具有类似于软组织的特性,是一类用于诊断、修复或替换机体软组织如血管、尿管、气管、肌腱、韧带等的很重要的生物材料。小口径人工血管因其移植后与宿主血管的顺应性不匹配,从而出现血栓、内膜增生等问题导致移植失败。由于小口径人工血管的顺应性和制备材料的弹性有直接关系,因此,寻找一种合适的生物弹性体构建小口径人工血管是非常必要的。本文主要对聚癸二酸甘油酯（PGS）在人工血管方面的应用做了深入的研究。PGS是一类具有生物相容性、可降解性和弹性的生物弹性体,合成过程简单,且具有可调节的机械性能。本课题选择生物弹性体PGS和天然丝素蛋白（SF）为原材料,采用静电纺丝的方法制备小口径人工血管。课题首先探索了小口径人工血管的形貌和结构,研究了其拉伸性能、弹性、缝合固位强力和顺应性,此外还研究了其体外降解性能和生物学性能。实验结果表明,小口径人工血管的形貌和结构与纺丝液浓度、PGS/SF 比例以及固化条件有关,可通过改变这些条件对小口径人工血管的制备进行优化。当固化温度为130℃、固化时间为24h时,小口径人工血管具有良好的弹性和力学性能,其断裂强度、缝合固位强力和顺应性等与天然血管具有可比性,且随着PGS 比例的增加,综合性能有所提高。体外降解实验表明,PGS的加入加速了小口径人工血管的降解速度。细胞实验表明本研究制备的小口径人工血管样品能够促进人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的黏附和增殖。综上所述,该论文制备的小口径人工血管在组织工程人工血管领域具有潜在的应用价值。
刘飞,张冠鑫,刘晓红,王立成,徐志云[5]（2020）在《灭菌处理牛心包制备脱细胞支架的内皮化》文中研究表明背景:组织工程学研究常用的动物组织不可避免地存在各种微生物附着,而无菌是组织工程材料临床应用的一项基本要求。目的:观察体积分数75%乙醇灭菌对牛心包性能及生物相容性的影响。方法:将牛心包组织分别用无菌PBS（对照组）、含1%抗生素（青霉素/链霉素/两性霉素B溶液）的PBS、氯己定及体积分数75%乙醇进行灭菌处理。采用LB固体培养基评价4种方法的杀菌效果;采用VB染色评估4组处理对牛心包组织结构的影响;通过CCK-8实验测定4种处理抽提液的细胞毒性。将体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包制作为脱细胞支架,与人脐静脉内皮细胞共培养,观察细胞的黏附与内皮化效果。结果与结论:①体积分数75%乙醇和氯己定处理24 h的牛心包满足完全灭菌的要求,1%抗生素处理组和对照组可见明显菌落形成;②VB染色显示,体积分数75%乙醇、氯己定和1%抗生素处理的牛心包胶原纤维呈波浪状排列整齐,结构紧凑,弹性纤维含量较少但结构清晰;③体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包不影响L929细胞的增殖活性,培养1-3 d内的细胞存活率均在100%以上;氯己定灭菌处理的牛心包有很强的细胞毒性,导致细胞死亡;④人脐静脉内皮细胞可在脱细胞支架表面正常生长与黏附;在20 d的种植期内,第8-12天脱细胞支架表面黏附的细胞最多;⑤结果说明,体积分数75%乙醇能够有效消灭附着在牛心包上的所有微生物,不会影响牛心包的组织学完整性与生物相容性。
周为[6]（2019）在《基于模具辅助的心脏主动脉瓣膜3D打印及细胞损伤仿真分析》文中指出随着心脏瓣膜病的发病率不断上升,利用3D打印技术制造具备良好生长、修复及重建能力的组织工程瓣膜成为了人工心脏瓣膜研究的热点。瓣膜的建模、水凝胶材料的打印、瓣膜的成型工艺以及打印后细胞的损伤给制造组织工程瓣膜带来了巨大的挑战。本文针对心脏主动脉瓣膜3D打印及细胞损伤分析开展研究如下:首先,针对心脏主动脉瓣膜的结构提出模具辅助打印概念,同时结合薄膜壳理论和心瓣流体力学理论构建出心脏主动脉瓣叶、瓣叶辅助模具及瓣叶封闭环的模型,辅助模具为主动脉瓣叶提供力学支撑及维持瓣叶型面,可以有效防止瓣叶结构的坍塌。构建的模型与人体天然的心脏主动脉瓣膜相比其几何形态和尺寸参数相近。其次,研究水凝胶从微针头挤出时胀大行为对瓣膜成形精度的影响,通过仿真分析、挤出实验得出黏度、挤出压力对挤出胀大行为的影响规律及程度。结果显示:黏度决定水凝胶材料在基底平台上的成型,并且随着黏度的增大挤出胀大比减小;挤出压力影响水凝胶材料的成型质量,并且随着挤出压力的增大挤出胀大比增大。然后,分析瓣叶支撑模具、瓣叶及瓣叶封闭环的关键打印路径,针对关键路径通过多次实验调整打印参数和打印路径。基于模具辅助打印工艺,利用质量分数25%的泊洛沙姆、质量分数分别为2%、6%的海藻酸钠-明胶水凝胶打印出完整的心脏主动脉瓣膜。与浴打印工艺构建的瓣膜相比,其加工周期较短,打印成本较低,同时成型后材料杂质少。最后,考虑混合骨髓间充质干细胞进行心脏主动脉瓣膜打印后细胞的损伤,结合细胞损伤的数学模型,在以细胞所受载荷时长、内部最大打印压力为细胞损伤衡量标准的准则下,通过仿真分析来研究不同喷嘴长度、喷嘴直径对细胞损伤的影响。结果显示:随着喷嘴长度的增加,细胞内部压力峰值增大,细胞所受载荷时长增长幅度趋于稳定;随着喷嘴直径的减小,细胞内部压力峰值骤增,细胞所受载荷时长先减后增。
程光存,严中亚,李春生,严宇,韦晓勇[7]（2015）在《纳米羟基磷灰石薄膜与人脐静脉血管内皮细胞的增殖》文中提出背景:合肥大学材料系和中国科学院安徽光学密精机械研究所联合研究应用脉冲激光沉积合成技术制备出一种新型的纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜。目的:观察纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜与人脐静脉血管内皮细胞的相容性。方法:将体外分离培养的传2-4代人脐静脉血管内皮细胞悬液接种于纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜上,培养3,7,21 d后,扫描电子显微镜下观察细胞在纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜上的生长情况。分别采用纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜常温浸提液、纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜高温浸提液、高密度聚乙烯浸提液及苯酚溶液培养人脐静脉血管内皮细胞,72 h后采用MTT法检测细胞增殖情况。结果与结论:扫描电镜观察培养3 d时,人脐静脉血管内皮细胞呈梭形或多边形,伸出突起黏附于纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜上;7 d时,可见瓣膜表面细胞伸展充分,连接融合;21 d时,细胞成片融合,牢固覆盖于瓣膜表面,部分区域形成细胞外基质。MTT检测结果显示,纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜对人脐静脉血管内皮细胞无细胞毒性,具有良好的细胞相容性。
孙艳丽,韩宏光,黄带发,贺顺川,李予杰[8]（2013）在《组织工程心脏瓣膜的构建:现状与前景》文中研究表明背景:目前临床上应用的心脏生物瓣和机械瓣都存在一些缺陷和不足,而组织工程心脏瓣膜有可能避免这些问题的出现,成为瓣膜替代物的理想选择。目的:探讨构建组织工程心脏瓣膜的实验研究进展。方法:应用数据库检索的方法分析关于组织工程心脏瓣膜的实验研究文献,组织工程心脏瓣膜的三大要素为种子细胞、支架材料和细胞种植。结果与结论:心脏瓣膜修复和置换是目前治疗心脏瓣膜性疾病的主要外科手段。目前,主要用于构建组织工程心脏瓣膜的种子细胞有血管内皮细胞、内皮祖细胞以及骨髓间充质干细胞等。经脱细胞处理的支架具有良好的生物力学性能和组织相容性,细胞种植后支架表面会形成一层连续的细胞层,其构建的组织工程心脏瓣膜是可行的。组织工程心脏瓣膜有着良好的应用前景,但目前还有很多问题需要解决,还处于研究的初级阶段。
周建良[9]（2011）在《PEG交联去细胞瓣多信号复合材料生物学性能研究》文中指出目的:PEG交联去细胞瓣构建复合材料,并评价其体外生物相容性。方法:（1）合成功能团为丙烯酰基的枝化状PEG,同时在去细胞瓣上引入巯基,通过丙烯酰基与巯基发生迈克尔加成反应,构建PEG交联去细胞瓣复合材料。（2）生物力学测试评价PEG交联对去细胞瓣机械性能的影响; CCK-8法检测复合材料浸提液对人脐静脉内皮细胞增殖率影响,以评价其生物相容性。结果:复合材料构建条件温和、效果确切;复合材料抗拉强度明显高于去细胞瓣（P<0.05）,且与天然瓣膜抗拉强度相比,差异无统计学差异（P>0.05）。复合材料与去细胞瓣毒性评级均为0级,与阴性对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）;人脐静脉内皮细胞在含复合材料浸提液的培养液中形态良好,增殖旺盛。结论:PEG交联去细胞瓣的方法能够构建与天然瓣膜相似抗拉强度且无细胞毒性的复合材料。目的:评价PEG交联去细胞瓣复合材料结合粘附肽（精-甘-天冬氨酸RGD肽）的可行性和有效性。方法:复合材料与1ml不同浓度（1.5mg/ml,1mg/ml,0.5mg/ml,0.25mg/ml）GRGDSPC肽溶液在37℃反应,在不同时间点（1h,2h,4h）,用分光光度法检测复合材料结合GRGDSPC肽质量,并行免疫荧光定性检测,去细胞瓣作为阴性对照。结果:GRGDSPC肽能有效地结合于复合材料,且一片复合材料与1ml GRGDSPC肽（1mg/ml）在37℃条件下反应2h,结合GRGDSPC肽质量最大为（0.79±0.01）mg。结论:PEG交联去细胞瓣复合材料,能够在体外有效地结合RGD肽,构建RGD-复合材料。目的:评价PEG交联去细胞瓣复合材料结合血管内皮细胞生长因子（VEGF）的可行性和有效性。方法:复合材料与1ml不同浓度（500pg/ml,1000pg/ml,2000pg/ml）VEGF溶液在37℃反应,在不同时间点（1h,2h,4h,12h）,用ELISA法检测复合材料结合VEGF质量,并行免疫荧光检测,去细胞瓣作为阴性对照。结果:VEGF能有效地结合于复合材料,且一片复合材料与1ml VEGF（1000pg/ml）在37℃反应4h,其结合VEGF质量最大为（896.87±3.27）pg。结论:PEG交联去细胞瓣复合材料,能够在体外有效地结合VEGF,构建VEGF-复合材料。目的:评价PEG交联去细胞瓣复合材料同时结合RGD肽和VEGF的可行性和有效性。方法:复合材料与1ml反应液（包含1mg/mlGRGDSPC肽和1000pg/mlVEGF）在37℃反应4h,对反应后复合材料行免疫荧光检测,去细胞瓣作为阴性对照。结果:GRGDSPC肽和VEGF能同时有效地结合于复合材料。结论:PEG交联去细胞瓣复合材料,能够在体外有效地结合RGD肽和VEGF,构建PEG交联去细胞瓣多信号（RGD、VEGF）复合材料。目的:分离、培养、鉴定脐带血内皮祖细胞,为其作为组织工程种子细胞提供实验依据。方法:密度梯度离心法分离新鲜脐血中单个核细胞,在含碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子培养液中培养,通过形态学、免疫荧光和流式细胞仪等对贴壁细胞进行鉴定;并与脐静脉内皮细胞进行增殖和迁移能力比较。结果:随培养时间延长,贴壁细胞形态发生明显改变,从小圆变成梭形,逐渐形成特征性克隆和典型成熟内皮细胞鹅卵石样形态;体外培养7天后,90%以上贴壁细胞呈Dil-ac-LDL和FITC-UEA-I双染阳性;贴壁细胞流式细胞仪分析显示:培养7 d的细胞VEGFR-2、CD34和CD133表达分别占（77.35±4.86）%、（52.42±6.64）%和（19.36±2.14）%,培养28天的细胞VEGFR-2和CD34表达分别占（81.06±7.31）%和（7.62±3.14）%,而未检测到CD133表达;人内皮祖细胞增殖和迁移能力明显高于人脐静脉内皮细胞（P<0.05）。结论:用密度梯度离心法和贴壁筛选法,可成功分离出脐带血内皮祖细胞,该方法简单、经济、可行;且内皮祖细胞可向内皮细胞分化,增殖和迁移能力强,有望成为理想种子细胞。第二节:PEG交联去细胞瓣多信号复合材料生物学性能测定目的:研究PEG交联去细胞瓣多信号（RGD、VEGF）复合材料对内皮祖细胞粘附和增殖的影响,为进一步构建TEHV提供依据。方法:A组去细胞瓣,B组PEG交联去细胞瓣复合材料,C组VEGF-复合材料,D组为RGD-复合材料,E组PEG交联去细胞瓣多信号（RGD、VEGF）复合材料。然后在各组材料上种植EPCs,分别在种植后2h、4h、8h用细胞计数和3H-TdR掺入法检测各组材料上细胞数和每分钟脉冲数,反映EPCs在各组材料上粘附性;分别在种植后2d、4d、8d,用细胞计数和3H-TdR掺入法检测各组瓣膜支架上细胞数和每分钟脉冲数,反映各组材料上EPCs增殖情况。在种植8d时,取各组瓣膜支架行苏木素-伊红染色和扫描电镜,以检测EPCs在各组材料上生长情况,并取E组支架材料上细胞行RT-PCR检测t-PA和eNOS的表达,以评价新内皮抗血栓形成功能。结果:（1）种植后2h、4h、8h时各组细胞数和每分钟脉冲数为:D组>E组>C组>A组>B组,其中A组与B组之间各个时间点均无统计学差异（P>0.05）,8h时D组与E组之间的差异无统计学意义（P>0.05）,其余时间点各组之间的差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）种植2d、4d、8d时各组细胞数和每分钟脉冲数为:A组均大于B组（P>0.05）,C组、D组和E组均大于同一时间点A组和B组（P<0.05）;种植2d时,E组>C组（P<0.05）,D组>E组（P>0.05）;种植4d时,E组>D组（P<0.05）,D组>C组（P<0.05）;种植8d时,E组>D组（P<0.05）,D组>C组（P>0.05）。（3）苏木素-伊红染色和扫描电镜检测显示:种植8d后,与其它组相比,E组瓣膜支架上可见一致密融合细胞层,并且该新内皮层细胞t-PA和eNOS表达与人脐静脉内皮细胞相似。结论:PEG交联去细胞瓣多信号（RGD、VEGF）复合材料上RGD肽和VEGF,能够协同促进内皮祖细胞在复合材料上粘附和增殖,有利于TEHV构建。
李春生[10]（2009）在《羟基磷灰石材料对人脐静脉内皮细胞生理功能影响的实验研究与犬体内植入实验的初步研究》文中指出背景:各种心脏瓣膜疾病发病率很高,瓣膜置换术是国际上公认治疗心脏瓣膜病的有效方法。而机械瓣又是临床上应用最多的一种人工心脏瓣膜,但在临床应用中存在的一个最大问题就是必须终生进行抗凝治疗,否则会因瓣膜及其附近发生血栓,既影响瓣膜的启闭功能,又可引起体内重要脏器的栓塞。部分病人还会因为抗凝药物使用不当而出现出血、栓塞、机械瓣功能失灵,甚至心力衰竭等并发症。因此解决机械瓣膜的凝血问题是目前机械瓣膜研制的核心内容。目的:体外法检测羟基磷灰石材料（Hydroxyapatite,HA）对人脐静脉内皮细胞的生理功能的影响,并种植于犬体内观察其表面内皮化情况,为应用组织工程方法构建组织工程化机械瓣膜提供理想的支架材料。方法:第一部分:将由细胞株传代培养的人脐静脉内皮细胞一组与羟基磷灰石材料体外复合培养,另一组不加材料单独接种培养作为对照组。分别收集第1,3,5,7天培养液,ELISA法检测t-PA,PAI-1的含量,以了解HA材料对人脐静脉内皮细胞的生理功能的影响。第二部分:将羟基磷灰石材料,人工机械瓣膜瓣叶材料分别植入犬右心房,通过Ⅷ因子染色,扫描电镜观察以了解材料表面内皮化情况。结果:（1）人脐静脉内皮细胞能在羟基磷灰石材料上良好的粘附、生长、增殖,检测t-PA,PAI-1的含量与空白对照组无明显差异性（P＞0.05）。（2）羟基磷灰石材料植入犬右心房八周后,消化其表层细胞。Ⅷ因子染色证实为血管内皮细胞,扫描电镜观察其表面形成内皮细胞层:人工机械瓣膜瓣叶材料表面未见内皮细胞层,且见少量血栓附着。结论:羟基磷灰石材料对人脐静脉内皮细胞的生理功能无影响,具有良好的细胞相容性,植入犬体内内皮化良好,可以成为组织工程化机械瓣膜支架材料来源。
二、人脐静脉内皮细胞用于构建组织工程心脏瓣膜的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、人脐静脉内皮细胞用于构建组织工程心脏瓣膜的实验研究（论文提纲范文）
（1）新机械方案制备富集脂肪源细胞外囊泡的成脂水凝胶并构建组织工程脂肪（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 制备AT-EV(使用新机械方案)和DAT并进行表征 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.2.1 实验材料 |
| 1.2.2 主要试剂与仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.3.1 CD63-perilipin脂肪组织免疫荧光染色 |
| 1.3.2 ALE和少脂质脂肪组织的获取 |
| 1.3.3 制备DAT水凝胶 |
| 1.3.4 AT-EVs的获取以及纯化 |
| 1.3.5 DAT水凝胶的表征-SEM |
| 1.3.6 AT-EVs的表征 |
| 1.3.7 统计分析 |
| 1.4 结果 |
| 1.4.1 AT-EVs在脂肪组织的分布 |
| 1.4.2 DAT水凝胶的表征 |
| 1.4.3 AT-EVs的表征 |
| 1.5 讨论 |
| 1.6 结论 |
| 参考文献 |
| 第2章 脂肪源细胞外囊泡联合脂肪组织水凝胶制备组织工程脂肪 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 主要试剂与仪器 |
| 2.3 方法 |
| 2.3.1 AT-EVs的促血管作用 |
| 2.3.2 AT-EVs的促成脂分化中的作用 |
| 2.3.3 富含AT-EVs的 DAT水凝胶于SCID小鼠皮下构建脂肪组织工程 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 AT-EVs促进3T3-L1 脂肪祖细胞的成脂分化 |
| 2.4.2 AT-EVs促进血管内皮细胞管的形成 |
| 2.4.3 AT-EVs增加了脂肪组织新生物的体积保留 |
| 2.4.4 AT-EVs促进脂肪组织新生物的脂肪生成和血管生成 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 结论 |
| 参考文献 |
| 本研究创新性自我评价 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间研究成果 |
| 综述 脱细胞脂肪组织制备：能否成为异体注射或原位成脂的软组织填充物 |
| 参考文献 |
（2）载丹参酮ⅡA磺酸钠生物凝胶样支架制备及其生物3D打印实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 绪论 |
| 一、生物3D打印技术在心血管疾病中的应用及研究进展 |
| 1.生物3D打印技术的概述及现状 |
| 2.生物3D打印技术与心血管系统 |
| 3.展望 |
| 二、丹参酮ⅡA磺酸钠在心血管系统中的应用现状 |
| 1.丹参酮ⅡA磺酸钠的来源 |
| 2.丹参酮ⅡA磺酸钠的基础研究 |
| 3.丹参酮ⅡA磺酸钠的临床研究 |
| 三、血管内皮细胞功能失调在心血管疾病中的研究进展 |
| 1.血管内皮功能障碍与动脉粥样硬化 |
| 2.血管内皮功能障碍与冠状动脉粥样硬化性心脏病 |
| 3.血管内皮功能障碍与高血压 |
| 四、本论文的研究内容及目的 |
| 1.研究目的 |
| 2.研究内容 |
| 第二部分 实验研究 |
| 一、含丹参酮ⅡA磺酸钠生物墨水的理化性能及生物相容性评价 |
| 1.引言 |
| 2.材料与方法 |
| 3.结果与讨论 |
| 二、丹参酮ⅡA磺酸钠/明胶-甲基丙烯酸酐/HUVECs生物墨水的3D打印 |
| 1.引言 |
| 2.材料与方法 |
| 3.结果与讨论 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在校期间主要研究成果 |
（3）流体剪切力-材料表面化学共刺激对人脐静脉内皮细胞行为影响的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 实验1:材料表面化学自组装单分子层材料的制备与表征 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 自组装单分子层技术制备材料 |
| 1.3 结果分析 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 小结 |
| 实验2:材料表面化学刺激对人脐静脉内皮细胞行为的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 数据处理 |
| 2.4 结果分析 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 小结 |
| 实验3:材料表面化学联合F=5dyn/cm~2(LFSS)刺激对HUVECs为的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 数据处理 |
| 3.4 结果分析 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 小结 |
| 实验4:材料表面化学联合F=15dyn/cm~2(PFSS)刺激对HUVECs影响的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 数据处理 |
| 4.4 结果分析 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 小结 |
| 实验5:材料表面化学联合F=20dyn/cm~2(HFSS)刺激对HUVECs影响的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.3 数据处理 |
| 5.4 结果分析 |
| 5.5 讨论 |
| 5.6 小结 |
| 材料表面化学联合剪切力刺激对HUVECs行为影响的讨论与综合分析 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料表面化学联合流体剪切力共同刺激对HUVECs行为影响的结果 |
| 6.3 结果分析与讨论 |
| 6.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略词对照表 |
| 血管内皮细胞中黏着斑与细胞骨架介导的流体剪切力转导的研究进展 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（4）静电纺PGS/SF复合医用管材的制备及性能研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 用于构建小口径人工血管的生物弹性体 |
| 1.2.1 生物弹性体概述 |
| 1.2.2 PGS的性能及应用 |
| 1.3 静电纺丝技术在人工血管中的应用 |
| 1.3.1 静电纺丝技术构建人工血管的优势 |
| 1.3.2 静电纺丝原理 |
| 1.3.3 静电纺丝过程的影响因素 |
| 1.3.4 静电纺丝技术构建人工血管的实验研究 |
| 1.4 本课题的研究内容及意义 |
| 第二章 PGS/SF电纺材料的制备及其形貌结构分析 |
| 2.1 实验部分 |
| 2.1.1 实验材料与试剂 |
| 2.1.2 实验仪器 |
| 2.1.3 实验方法 |
| 2.2 结果与讨论 |
| 2.2.1 形貌分析 |
| 2.2.2 FTIR分析 |
| 2.2.3 X射线衍射分析 |
| 2.2.4 TG分析 |
| 2.2.5 DSC分析 |
| 2.2.6 氨基酸含量测试 |
| 2.2.7 接触角测试 |
| 2.3 本章小结 |
| 第三章 PGS/SF电纺管材的生物力学性能研究 |
| 3.1 实验部分 |
| 3.1.1 实验材料与试剂 |
| 3.1.2 实验仪器 |
| 3.1.3 实验方法 |
| 3.2 结果与讨论 |
| 3.2.1 径向拉伸性能 |
| 3.2.2 循环拉伸性能 |
| 3.2.3 缝合固位强力 |
| 3.2.4 动态顺应性 |
| 3.3 本章小结 |
| 第四章 PGS/SF电纺材料的体外降解及生物学性能研究 |
| 4.1 实验部分 |
| 4.1.1 材料与试剂 |
| 4.1.2 实验仪器 |
| 4.1.3 实验方法 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 体外降解性能 |
| 4.2.2 加载肝素的PGS/SF电纺材料红外光谱分析 |
| 4.2.3 溶血率 |
| 4.2.4 抗凝血性 |
| 4.2.5 体外细胞相容性评价 |
| 4.3 本章小结 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（5）灭菌处理牛心包制备脱细胞支架的内皮化（论文提纲范文）
| 文章快速阅读： |
| 文题释义： |
| 0引言Introduction |
| 1 材料和方法Materials and methods |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间及地点 |
| 1.3 材料 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.4.1 牛心包获取及分组处理 |
| 1.4.2 牛心包微生物培养实验 |
| 1.4.3 牛心包组织形态学观察 |
| 1.4.4 抽提液细胞毒性测定 |
| 1.4.5直接接触毒性实验 |
| 1.4.6 脱细胞支架内皮细胞化实验 |
| 1.5 主要观察指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1 灭菌效果检测 |
| 2.2 牛心包组织形态学观察结果 |
| 2.3 心包抽提液细胞毒性检测结果 |
| 2.4 体外直接接触毒性实验结果 |
| 2.5牛心包脱细胞支架内皮化实验结果 |
| 3 讨论Discussion |
（6）基于模具辅助的心脏主动脉瓣膜3D打印及细胞损伤仿真分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景及意义 |
| 1.2 人工心脏瓣膜的国内外研究现状 |
| 1.2.1 人工心脏瓣膜的发展 |
| 1.2.2 人工心脏瓣膜3D打印 |
| 1.3 存在的问题 |
| 1.4 本文主要研究内容 |
| 2 心脏主动脉瓣膜建模 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 模具辅助打印 |
| 2.3 心脏主动脉瓣膜建模理论 |
| 2.4 心脏主动脉瓣膜建模过程 |
| 2.4.1 主动脉瓣叶建模 |
| 2.4.2 主动脉瓣叶支撑模具建模 |
| 2.4.3 主动脉瓣叶封闭环建模 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 心脏主动脉瓣膜挤出成型胀大分析 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 水凝胶挤出胀大模型建立 |
| 3.2.1 理论模型建立 |
| 3.2.2 仿真模型建立 |
| 3.2.3 边界条件与参数设置 |
| 3.3 仿真结果与讨论 |
| 3.3.1 喷嘴流道过渡段的流场仿真结果 |
| 3.3.2 工艺参数对水凝胶挤出胀大的影响 |
| 3.4 挤出胀大实验 |
| 3.4.1 材料黏度对凝胶纤维挤出成型的影响 |
| 3.4.2 挤出压力对凝胶纤维挤出成型的影响 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 基于模具辅助的心脏主动脉瓣膜3D打印 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 水凝胶材料特性 |
| 4.3 心脏主动脉瓣膜3D打印流程 |
| 4.4 心脏主动脉瓣膜3D打印成型 |
| 4.4.1 主动脉瓣叶支撑模具打印成型 |
| 4.4.2 主动脉瓣叶打印成型 |
| 4.4.3 主动脉瓣叶封闭环打印成型 |
| 4.5 本章小结 |
| 5 心脏主动脉瓣膜挤出成型细胞损伤仿真分析 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 细胞损伤数学模型 |
| 5.3 细胞损伤仿真模型 |
| 5.3.1 多相流模型确定 |
| 5.3.2 液体属性分析 |
| 5.3.3 模型建立和网格划分 |
| 5.3.4 仿真模块参数设置 |
| 5.4 仿真结果与讨论 |
| 5.4.1 喷嘴长度对细胞损伤的影响分析 |
| 5.4.2 喷嘴直径对细胞损伤的影响分析 |
| 5.5 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 |
| 致谢 |
（7）纳米羟基磷灰石薄膜与人脐静脉血管内皮细胞的增殖（论文提纲范文）
| 0 引言 Introduction |
| 1 材料和方法 Materials and methods |
| 2 结果 Results |
| 3 讨论 Discussion |
（8）组织工程心脏瓣膜的构建:现状与前景（论文提纲范文）
| 文章亮点: |
| 0引言Introduction |
| 1 资料和方法Data and methods |
| 资料来源: |
| 资料检索公式: |
| 入选标准: |
| 2 组织工程心脏瓣膜的构建Construction of tissue-engineered heart valves |
| 2.1 构建组织工程心脏瓣膜的种子细胞 |
| 2.1.1 血管内皮细胞 |
| 2.1.2 内皮祖细胞 |
| 2.1.3 干细胞 |
| 2.2 构建组织工程心脏瓣膜的支架材料 |
| 2.2.1 Triton X-100-SD法脱猪主动脉瓣膜细胞 |
| 2.2.2 丹参酚酸B处理脱细胞猪心脏瓣膜 |
| 2.2.3聚乙二醇纳米微球改性去细胞瓣 |
| 2.3 细胞种植 |
| 2.3.1 类金刚石涂层瓣膜与犬血管内皮细胞 |
| 2.3.2 脱细胞猪主动脉瓣支架与骨髓基质干细胞 |
| 3 问题与展望Problems and prospects |
（9）PEG交联去细胞瓣多信号复合材料生物学性能研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分：PEG 交联去细胞瓣复合材料构建及其体外生物相容性 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4. 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 第二部分：PEG 交联去细胞瓣多信号复合材料构建 |
| 第一节：构建RGD-复合材料 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二节：构建VEGF-复合材料 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第三节：构建PEG 交联去细胞瓣多信号复合材料 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 第三部分：PEG 交联去细胞瓣多信号复合材料生物学性能研究 |
| 第一节：内皮祖细胞分离、培养与鉴定 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第二节：PEG 交联去细胞瓣多信号复合材料生物学性能测定 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 结论、创新与展望 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（10）羟基磷灰石材料对人脐静脉内皮细胞生理功能影响的实验研究与犬体内植入实验的初步研究（论文提纲范文）
| 使用的英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一部分 羟基磷灰石材料对人脐静脉内皮细胞生理功能 影响的实验研究 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 羟基磷灰石材料犬体内植入实验 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 实验用HA制备数据 |
四、人脐静脉内皮细胞用于构建组织工程心脏瓣膜的实验研究（论文参考文献）
- [1]新机械方案制备富集脂肪源细胞外囊泡的成脂水凝胶并构建组织工程脂肪[D]. 聂佳莹. 南昌大学, 2021(01)
- [2]载丹参酮ⅡA磺酸钠生物凝胶样支架制备及其生物3D打印实验研究[D]. 潘超. 陕西中医药大学, 2021
- [3]流体剪切力-材料表面化学共刺激对人脐静脉内皮细胞行为影响的研究[D]. 覃中杰. 西南医科大学, 2021(01)
- [4]静电纺PGS/SF复合医用管材的制备及性能研究[D]. 张迎梅. 苏州大学, 2020(02)
- [5]灭菌处理牛心包制备脱细胞支架的内皮化[J]. 刘飞,张冠鑫,刘晓红,王立成,徐志云. 中国组织工程研究, 2020(28)
- [6]基于模具辅助的心脏主动脉瓣膜3D打印及细胞损伤仿真分析[D]. 周为. 大连理工大学, 2019(02)
- [7]纳米羟基磷灰石薄膜与人脐静脉血管内皮细胞的增殖[J]. 程光存,严中亚,李春生,严宇,韦晓勇. 中国组织工程研究, 2015(12)
- [8]组织工程心脏瓣膜的构建:现状与前景[J]. 孙艳丽,韩宏光,黄带发,贺顺川,李予杰. 中国组织工程研究, 2013(50)
- [9]PEG交联去细胞瓣多信号复合材料生物学性能研究[D]. 周建良. 华中科技大学, 2011(07)
- [10]羟基磷灰石材料对人脐静脉内皮细胞生理功能影响的实验研究与犬体内植入实验的初步研究[D]. 李春生. 安徽医科大学, 2009(S1)