一、一氧化氮对大鼠移植胰腺再灌注损伤的保护作用（论文文献综述）
高宏杰[1]（2021）在《基于优化算法的痰瘀同治方抗心肌缺血再灌注损伤分子网络机制研究》文中认为1 研究目的心肌缺血再灌注损伤（Myocardial ischemia-reperfusion injury,MI/RI）常发生在心脏手术、冠脉搭桥、心肌梗塞后再通、心脏移植以及休克等情况下,已成为血运重建后常见的严重并发症。课题组的自拟方痰瘀同治方经过多年的临床观察发现其抗MI/RI疗效显着。故本研究拟采用网络药理学研究方法,探讨痰瘀同治方抗MI/RI的核心药效物质基础、潜在作用靶点及分子网络机制,对课题组前期开展的痰瘀同治方抗MI/RI的系列作用机制研究进行总结、补充和完善,为今后深入开展痰瘀同治方抗MI/RI的药理药效作用机制的实证研究指出方向。同时,为更好的预测和分析痰瘀同治方抗MI/RI的分子网络机制,本研究对随机游走算法进行了优化和验证,为优化后的算法应用于中医药领域的网络药理学研究提供了参考依据。2 研究方法2.1基于优化算法的痰瘀同治方抗MI/RI的分子网络机制研究应用OMIM数据库、GeneCards数据库、DisGeNET数据库和Pubmed数据库获得MI/RI的靶点。应用TCMSP数据库、TCMID数据库和化学专业数据库获得中药成分,应用SwissADME数据库筛选中药的活性成分,并用SwissTargetPrediction数据库预测中药活性成分的靶点。将痰瘀同治方中药活性成分的靶点和MI/RI的靶点做映射,获得痰瘀同治方抗MI/RI的潜在作用靶点,应用String数据库筛选出核心潜在作用靶点。运用cytoscape3.7.2软件构建痰瘀同治方“中药活性成分-靶点-MI/RI”关系的网络图,计算痰瘀同治方中药活性成分抗MI/RI的网络效力值,得出痰瘀同治方抗MI/RI的核心中药活性成分。应用Cluego插件对痰瘀同治方抗MI/RI的核心靶点进行富集分析,探讨痰瘀同治方抗MI/RI的可能的潜在作用机制。为了快速有效的发现其可能的潜在作用机制,本研究对随机游走算法进行了优化,形成了基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法,并对该算法进行了验证。将优化后的算法应用于构建痰瘀同治方“中药活性成分-靶点-MI/RI”的关系网络中,获得痰瘀同治方抗MI/RI的可能潜在的核心靶点,应用Cluego插件对核心靶点进行富集分析,探讨痰瘀同治方抗MI/RI的可能潜在的分子网络机制。2.2痰瘀同治方祛痰中药组/化瘀中药组抗MI/RI的分子网络机制研究应用TCMSP数据库、TCMID数据库和化学专业数据库获取祛痰中药组/化瘀中药组的中药成分,应用SwissADME数据库筛选出中药的活性成分,并用SwissTargetPrediction数据库预测中药活性成分的靶点。将痰瘀同治方祛痰中药组中药活性成分/化瘀中药组中药活性成分的靶点与MI/RI的靶点做映射,分别获得痰瘀同治方祛痰中药组/化瘀中药组抗MI/RI的潜在的可能的靶点。应用String数据库获得祛痰中药组/化瘀中药组的核心靶点。应用DAVID数据库对祛痰中药组/化瘀中药组抗MI/RI的核心靶点进行富集分析,探讨痰瘀同治方祛痰中药组/化瘀中药组抗MI/RI的可能的潜在分子网络机制。3 结果3.1基于优化算法的痰瘀同治方抗MI/RI的分子网络机制研究（1）MI/RI靶点共1283个;（2）痰瘀同治方中药活性成分683个,预测中药活性成分靶点共1452个;（3）痰瘀同治方抗MI/RI的靶点共398个,运用String数据库获得核心靶点共337个;（4）应用cytoscape3.7.2软件构建痰瘀同治方“中药活性成分-靶点-MI/RI”关系网络,共有885个节点和12462条边,根据计算出的网络效力值获得痰瘀同治方抗MI/RI的核心中药活性成分;（5）对痰瘀同治方抗MI/RI的337个核心靶点进行富集分析,结果显示:GO分析生物反应过程共986个,KEGG信号通路共79条;（6）基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法构建痰瘀同治方“中药活性成分-靶点-MI/RI”的核心网络共有节点269个,中药活性成分节点32个,疾病靶点节点237个。采用分子对接等方法对优化算法进行验证。（7）对痰瘀同治方“中药活性成分-靶点-MI/RI”核心网络的237个靶点进行富集分析,结果显示:GO分析生物反应过程共739个,KEGG信号通路共131条。3.2痰瘀同治方祛痰中药组/化瘀中药组抗MI/RI的分子网络机制研究（1）痰瘀同治方祛痰中药组中药成分共173个,中药活性成分87个,预测中药活性成分靶点共560个;痰瘀同治方化瘀中药组中药成分共143个,中药活性成分194个,预测中药活性成分靶点共430个。（2）痰瘀同治方祛痰中药组抗MI/RI的靶点共178个,应用String数据库获得核心靶点140个;痰瘀同治方化瘀中药组抗MI/RI的靶点共155个,应用String数据库获得核心靶点113个。（3）对痰瘀同治方祛痰中药组抗MI/RI的140个核心靶点进行富集分析,结果显示:GO分析中生物反应过程共469个,KEGG信号通路共114条;对痰瘀同治方化瘀中药组抗MI/RI的113个核心靶点进行富集分析,结果显示:GO分析中生物反应过程共495个,KEGG信号通路共108条。4 结论4.1本研究提出的基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法可以准确快速的提取痰瘀同治方“中药活性成分-靶点-MI/RI”核心网络,为该算法应用于中医药领域的网络药理学研究提供参考。4.2痰瘀同治方抗MI/RI核心中药活性成分共32个,核心中药为人参、川芎、薤白等6味中药。4.3痰瘀同治方呈现多成分、多靶点、多信号通路协同抗MI/RI的作用特点。本研究得出的痰瘀同治方抗MI/RI的“炎症反应”机制、痰瘀同治方祛痰中药组抗MI/RI的“凋亡过程负调控”作用机制与课题组前期的研究结果相吻合。此外,痰瘀同治方抗MI/RI的作用机制可能与“PI3K-Akt信号传导通路”“TNF信号通路”“ERK1和ERK2级联的正调控”“一氧化氮生物合成过程的正调控”“MAPK级联”作用机制有关。痰瘀同治方祛痰中药组抗MI/RI的作用机制还可能与“cAMP信号通路”有关,痰瘀同治方化瘀中药组抗MI/RI的作用机制可能与“HIF-1信号通路”和“血管内皮生长因子信号通路”有关。
张召辉[2]（2009）在《缺血后处理对大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究》文中进行了进一步梳理研究一缺血后处理对大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤和细胞凋亡的保护作用及其机制目的:探讨缺血后处理对大鼠移植胰腺冷缺血再灌注损伤和细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:24只糖尿病SD大鼠随机分为缺血再灌注组（I/R组,n=6）和缺血后处理组（IPO组,n=18）,IPO组又根据不同方法分为3个亚组:IPO1组（再灌注30s缺血30s 1次,n=6）、IPO2组（再灌注30s /缺血30s 3次,n=6）和IPO3组（再灌注30s/缺血30s 6次,n=6）,I/R组和IPO组均行胰腺移植,24只SD大鼠为供体;6只SD大鼠为假手术组（Sham组,n=6）;检测各组再灌注前、后血糖;再灌注后2 h血清中TNF-α和NO的含量、移植胰组织中SOD、MPO和MDA量;TUNEL法观察移植胰组织细胞凋亡情况,Western Blot检测移植胰组织Bax和Bcl-2蛋白表达。结果:1.再灌注后IPO组相对于I/R组血糖低（P<0.05, P<0.01, P<0.05）;IPO2组较IPO1组和IPO3组血糖低（P<0.05, P<0.05）;2.再灌注后IPO组较I/R组血清中TNF-α含量低（P<0.01, P<0.01 , P<0.01）、NO含量高（P<0.01, P<0.01 , P<0.01）; IPO2组血清中TNF-α相对于IPO1组和IPO3组低（P<0.05, P<0.05）、NO含量相对于IPO1组和IPO3组高（P<0.05, P<0.05）。3.再灌注后IPO组较I/R组移植胰组织中SOD含量高（P<0.01, P<0.01, P<0.01）;,MDA和MPO含量低（P<0.01, P<0.01 , P<0.01）, IPO2组相对于IPO1组和IPO3组SOD含量高（P<0.05, P<0.05）、MDA和MPO含量低（P<0.05, P<0.05）。4.再灌注后IPO组较I/R组移植胰组织中AI值低（P<0.01, P<0.01 , P<0.01）,IPO2组相对于IPO1组和IPO3组AI值低（P<0.05, P<0.05）;5. I/R组胰组织Bax蛋白高表达,Bcl-2蛋白低表达,IPO各组再灌注后移植胰组织Bax蛋白低表达,Bcl-2蛋白高表达,而IPC2组Bcl-2蛋白表达最高Bax蛋白表达最低。结论:1.缺血后处理对大鼠移植胰腺的缺血再灌注损伤具有保护作用,机制可能是提高SOD活性、增加内源性NO合成、下调TNF-α和减少PMNs粘附与聚集。2.缺血后处理可以减少移植胰腺缺血再灌注后的细胞凋亡,机制可能是减少氧自由基、上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白。3.再灌注30s/缺血30s循环3次是最佳的大鼠移植胰缺血后处理诱导办法。研究二IPO, IPC, IPC-IPO对胰腺冷缺血再灌注损伤和细胞凋亡保护作用的对比研究目的:对比研究缺血后处理（IPO）与缺血预处理（IPC）对胰腺缺血再灌注损伤和细胞凋亡的保护作用;并分析缺血后处理与缺血预处理联合应用（IPC-IPO）是否能更为有效的减轻胰腺冷热缺血再灌注损伤。方法:24只糖尿病大鼠随机分为4组:I/R组:单纯2小时冷缺血后再灌注,无其它干预;IPC组:在冷缺血开始前,给予供体2个循环的“5分钟缺血-5分钟再灌注”的缺血预处理;IPO组:结束冷缺血后,在开始长时间灌注的起始阶段,给予受体3个循环的“30秒灌注-30秒再缺血”缺血后处理;IPC-IPO组:在冷缺血开始前,供体给予2个循环的“5分钟缺血-5分钟再灌注”缺血预处理,并且在结束冷缺血后,在开始长时间灌注的起始阶段,给予3个循环的“30秒灌注-30秒再缺血”缺血后处理。6只SD大鼠为假手术组（Sham组,n=6）;检测各组再灌注前、后血糖;再灌注后2 h血清中TNF-α和NO的含量、移植胰组织中SOD、MPO和MDA量;TUNEL法观察移植胰组织细胞凋亡情况,Western Blot检测移植胰组织Bax和Bcl-2蛋白表达情况。结果:1.干预组（IPC组、IPO组、IPC-IPO组）的血糖水平明显低于I/R组（P<0.01, P<0.01, P<0.01）; IPC组与IPO组的血糖水平相当（P>0.05）,IPC-IPO组与IPC组、IPO组相比,血糖水平也无明显差异（P>0.05,P>0.05）;2.再灌注后干预组（IPC组、IPO组、IPC-IPO组）较I/R组血清中TNF-α含量低（P<0.01, P<0.01, P<0.01）、NO含量高（P<0.01, P<0.01, P<0.01）; IPC组与IPO组的TNF-α及NO水平相当（P>0.05）,IPC-IPO组与IPC组、IPO组相比,TNF-α及NO水平也无明显差异（P>0.05）;3.再灌注后干预组（IPC组、IPO组、IPC-IPO组）较I/R组血清中SOD含量高（P<0.01, P<0.01, P<0.01）、MDA和MPO含量低（P<0.01, P<0.01, P<0.01）; IPC组与IPO组的SOD、MDA和MPO水平相当（P>0.05）,IPC-IPO组与IPC组、IPO组相比,SOD、MDA和MPO水平也无明显差异（P>0.05）;4.再灌注后干预组（IPC组、IPO组、IPC-IPO组）的移植胰组织中AI值明显低于I/R组（P<0.01, P<0.01, P<0.01）; IPC组与IPO组的移植胰组织中AI值相当（P>0.05）,IPC-IPO组与IPC组、IPO组相比,移植胰组织中AI值也无明显差异（P>0.05）;5. I/R组胰组织Bax蛋白高表达,Bcl-2蛋白低表达,干预组（IPC组、IPO组、IPC-IPO组）再灌注后移植胰组织Bax蛋白低表达,Bcl-2蛋白高表达。结论:1. IPO和IPC对胰腺的冷缺血再灌注损伤及细胞凋亡都具有保护作用,且两者的保护作用无显着差异。2. IPO与IPC都可通过抑制中性粒细胞的聚集,减少炎性细胞因子TNF-α的释放,减少超氧化物歧化酶失活,以清除氧自由基,上调抑凋亡基因Bcl-2的表达,下调促凋亡基因Bax的表达来发挥保护作用。且各种保护机制在IPO与IPC发挥的作用相当。3. IPC与IPO联合应用对大鼠胰腺冷缺血再灌注损伤和细胞凋亡的保护作用无叠加效应,IPC-IPO的保护作用与单独IPC或IPO相比无明显增强。研究三大鼠无创伤双后肢缺血后处理对移植胰腺缺血再灌注损伤的远隔保护作用目的:探讨大鼠无创伤双后肢缺血后处理对移植胰腺缺血再灌注损伤的影响及机制。方法:6只SD大鼠为假手术组（Sham组,n=6）;12只糖尿病SD大鼠随机分为缺血再灌注组（I/R组,n=6）;无创伤双后肢缺血后处理（RIPO组,n=6）。检测各组再灌注前、后血糖,再灌注后2 h血清中TNF-ɑ和NO,胰腺组织中MPO和MDA含量,并应用TUNEL检测移植胰凋亡细胞。结果:1.再灌注后I/R组相对于RIPO组血糖高（P<0.01）、血清中TNF-ɑ（P<0.01）、胰腺组织中MPO（P<0.01）和MDA（P<0.01）含量高,SOD、NO含量低（P<0.01）2.再灌注后I/R组相对于RIPO组胰腺组织凋亡指数高（P<0.01）。结论:无创伤双后肢缺血后处理对大鼠移植胰的缺血再灌注损伤具有保护作用,机制可能与可通过抑制中性粒细胞的聚集,减少炎性细胞因子TNF-α的释放,减少超氧化物歧化酶失活,从而清除氧自由基等有关。研究四缺血后处理对大鼠胰腺移植受体小肠肠粘膜屏障的影响目的:探讨缺血后处理对大鼠胰腺移植受体肠粘膜屏障的影响及机制。方法:12只正常大鼠为对照组,糖尿病大鼠大鼠随机分为缺血再灌注组（I/R组,n=12）,缺血后处理组（IPO组,n=12）,I/R组和IPO组大鼠均接受胰腺移植,再灌注后5 d检测小肠通透性和吸收功能,检测血清内毒素、TNF-α、NO和SOD,取受体回肠粘膜组织检测小肠湿/干比、微绒毛高度及宽度、MDA含量及MPO活性,同时取肠系膜淋巴结、肝及脾组织进行细菌培养,观察细菌移位情况。结果:再灌注后IPO组血清TNF-α含量（P<0.01）、内毒素含量（P<0.01）、MDA含量（P<0.01）、MPO活性（P<0.01）、小肠湿/干比（P<0.01）、小肠通透性（P<0.01）、细菌易位率（P<0.01）和小肠粘膜损伤程度均低于I/R组;血清NO和SOD含量、小肠吸收功能均高于I/R组（P<0.01）。结论:缺血后处理可保护胰腺移植大鼠小肠肠粘膜屏障,降低细菌移位率,机制可能与降低胰酶活性、减少TNF-α生成、减轻PMNs粘附与聚集、增加NO和SOD含量以减轻氧化应激有关。
李柏峰,张克忠,刘永锋,程颖,成东华,李铁民[3]（2008）在《氨基胍对大鼠胰腺移植保护作用的实验研究》文中指出目的探讨诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍对大鼠移植胰腺的保护作用。方法糖尿病大鼠模型30只随机分成3组:（1）空白对照组（n=6）,仅开腹手术,不作移植;（2）移植对照组（n=6）,仅作胰腺移植;（3）氨基胍处理组（n=18）,移植胰腺恢复血运前经阴茎背静脉注入盐酸氨基胍（AG）溶液,剂量分别为60,80,100mg/kg。再灌注4h后检测血清一氧化氮（NO）水平,血糖以及淀粉酶活性,定量分析胰腺组织中的结构型一氧化氮合酶（cNOS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性,并对胰腺进行组织形态学和组织化学检查。结果与移植对照组比较,氨基胍处理组血NO水平及淀粉酶活性明显降低,胰腺病理损害较轻,其中以AG80mg/kg亚组效果更显着（P<0.01）,且该亚组血糖及iNOS活性与表达也明显低于移植对照组（P<0.01）。结论诱导型一氧化氮合酶选择性抑制剂氨基胍在大鼠胰腺移植中起到保护作用。其作用机制可能与抑制NO的过量产生,减轻其作为自由基的细胞毒性有关。
冷怀明[4]（2002）在《《第三军医大学学报》2002年第24卷主题词索引》文中进行了进一步梳理
文玲[5]（2020）在《安胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠NF-κBp65、INOS、COX-2、TNF-α、IL-1β表达影响的实验研究》文中认为目的:探究安胰颗粒对左旋精氨酸诱导的重症急性胰腺炎大鼠核转录因子-κBp65（nuclear factor-κBp65,NF-κBp65）、诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、环氧合酶-2（cyclo-oxygenase,COX-2）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor,TNF-α）、白细胞介素1-β（interleukin 1-β,IL-1β）表达水平的影响,阐明安胰颗粒有效治疗重症急性胰腺炎的主要机制,丰富临床治疗重症急性胰腺炎的方法,改善重症急性胰腺炎的预后。方法:取鼠龄为42～49天的清洁级雄性成年SD（Sprague-Dawley,SD）大鼠120只,体重约200～250g,适应性喂养7天后,用电脑随机数字表随机分为4组。分别为正常组、模型组、中药组及西药组,每组30只大鼠。各组进一步分为3小时、6小时、12小时三小组,每组10只大鼠。中药组造模前连续三天以8g/kg的安胰颗粒水溶后灌胃,一天1次;正常组不做处理,自由饮水饮食;西药组造模前1小时予以人重组白介素10（Recombinant human interleukin-10,rh IL-10）10000U行腹腔注射;经以上预处理后,取模型组、中药组、西药组大鼠,造模前禁食不禁水12小时,以6%左旋精氨酸（L-arginine）溶液按150mg/100g剂量腹腔注射3次,每次间隔1小时,诱导SAP模型。用最后一次注射结束时间开始,按3小时、6小时、12小时时间点将四组大鼠分批麻醉后取腹主动脉血并处死大鼠进行解剖,观察胰腺大体形态,迅速摘取胰腺组织。采用酶联免疫吸附测定法测血清TNF-α、IL-1β水平;取胰腺组织,进行病理切片制作、用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）法检测NF-κBp65mRNA含量、用免疫组化法测定NF-κBp65、iNOS、COX-2表达。采集所有数据进行统计学分析。结果:（1）胰腺病理切片结果:正常组电镜下胰腺小叶结构清晰,腺泡细胞、腺管、胰岛形态结构正常,腺泡细胞内见深蓝色点状细胞核。模型组随时间延长,小叶结构模糊,细胞排列紊乱,可见成片破裂细胞堆积,视野模糊,腺泡细胞大面积空泡性坏死,细胞核游出或破碎,间隙增宽,炎性细胞浸润,间质小血管破裂坏死,红细胞溢出。中药组胰腺小叶结构尚可见,炎性细胞浸润、血管破裂、细胞坏死情况与模型组对比明显改善,细胞肿胀明显,尚可见清晰细胞轮廓及在位的细胞核。西药组胰腺电镜下改变与中药组大体相似。（2）血清TNF-α、IL-1β:除正常组外,其余各组造模后各时间点血清TNF-α、IL-1β均随时间延长而显着升高,12小时间点为本实验观察时间中的峰值,同时间点与正常组两两对比差异有统计学意义（其中TNF-α水平p<0.01,IL-1β水平p<0.05）;与模型组同时间点两两对比,中药组和西药组血清TNF-α、IL-1β显着下降,差异有统计学意义（p<0.01）。中药组和西药组对比差异无统计学意义（p>0.05）。（3）胰腺组织NF-κBp65mRNA:除正常组外,其余各组造模后各时间点胰腺组织NF-κBp65mRNA均随时间延长而显着升高,12小时间点为本实验观察时间中的峰值,同时间点与与正常组两两对比差异有统计学意义（p<0.01）;与模型组同时间点两两对比,中药组和西药组胰腺组织NF-κBp65mRNA显着下降,差异有统计学意义（p<0.01）。中药组和西药组对比差异无统计学意义（p>0.05）。（4）胰腺组织NF-κBp65、iNOS、COX-2:除正常组外,其余各组造模后各时间点胰腺组织NF-κBp65、iNOS、COX-2均随时间延长显着升高,12小时间点为本实验观察时间中的峰值,同时间点与正常组两两对比差异有统计学意义（p<0.01）;与模型组同时间点两两对比,中药组和西药组胰腺组织NF-κBp65、iNOS、COX-2显着下降,差异有统计学意义（p<0.01）。中药组和西药组对比差异无统计学意义（p>0.05）。（5）SAP大鼠胰腺组织NF-κBp65的表达量与TNF-α、IL-1β、iNOS、COX-2表达量分别呈高度正相关（p<0.05）,而各TNF-α、IL-1β、iNOS、COX-2间亦存在不同程度的正相关关系（p<0.05）。结论:1、左旋精氨酸诱导的大鼠SAP模型血清TNF-α、IL-1β以及胰腺组织NF-κBp65mRNA、NF-κBp65、iNOS、COX-2水平在3小时时间点开始显着升高,于本组实验的12小时达到峰值,NF-κBp65与各因子的表达量间呈高度正相关,而各因子间亦存在不同程度的正相关关系,说明NF-κBp65mRNA基因转录诱导了NF-κBp65蛋白表达,蛋白过表达又导致下游靶基因转录或激活靶基因转录,炎症放大与微循环障碍同时发生在SAP早期,且炎症因子与微循环之间相互影响。2、安胰颗粒能够有效改善SAP大鼠胰腺组织病理损伤,说明安胰颗粒对胰腺组织具有保护作用,是有效治疗SAP的病理生理基础。3、安胰颗粒胃灌注后不仅显着降低SAP大鼠血清TNF-α、IL-1β含量,还显着降低胰腺组织NF-κBp65mRNA表达及NF-κBp65、iNOS、COX-2表达,提示安胰颗粒通过核因子-炎症因子通路,防治SAP系统性炎症反应综合征,通过核因子-微循环因子通路改善微循环,有效减轻SAP发病过程中的炎性损伤及微循环障碍,达到有效治疗SAP的目的。
常威[6]（2020）在《西地那非对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及机制研究》文中指出目的:研究西地那非对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及机制。方法:将健康成年雄性Wistar大鼠21只,年龄8-10周龄,重量在240260g,采用随机数字法分成3组,每组7只,分别为假手术组（Sham组）,缺血再灌注组（IR组）,西地那非预处理组（Slid组）。Sham游离双侧肾蒂,切除左肾;Slid组于麻醉前30分钟按体重1ml/kg腹腔注射西地那非,Sham组和IR组于麻醉前30分钟按体重1ml/kg腹腔注射生理盐水;Sham组和IR组游离双侧肾蒂,用动脉夹将右侧肾蒂夹闭45分钟,于松开动脉夹前5分钟结扎左侧肾蒂并切除左肾。于再灌注24小时后处死大鼠,收集血液标本和肾脏组织;分离血清,检测血清中肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）水平,将右肾组织沿冠状面切开肾脏,一半肾脏组织置于4%多聚甲醛中固定,行石蜡包埋,切片做HE染色观察肾组织形态;另一半肾组织沿肾门放射状切成3份,分别检测肾组织中过氧化物歧化酶（SOD）活力,qRT-PCR检测肾组织中Bcl2、Bax、Caspase3的基因表达水平;Western Blot检测肾组织中Caspase3的蛋白表达。结果:1.与Sham组相比,IR组和Sild组,BUN和Cr水平显着增高,P<0.05;而与IR组相比,Sild组Cr及BUN水平明显下降,P<0.05;2.与Sham组相比,IR组和Sild组,SOD水平显着降低,P<0.05;而与IR组相比,Sild组SOD水平明显增高,P<0.05;3.与Sham组相比,IR组和Sild组,Bcl2、Bcl2/Bax mRNA表达水平降低,Caspase3 mRNA表达水平升高,P<0.05;而与IR组相比,Slid组Bcl2、Bcl2/Bax mRNA表达水平明显升高,Caspase3 mRNA表达水平明显降低,P<0.05;4.与Sham组相比,IR组和Sild组,肾组织中Caspase3蛋白含量明显增加,P<0.05;而与IR组相比,Slid组肾组织中Caspase3蛋白含量降低,P<0.05;5.HE染色观察肾组织损伤情况,IR组比Slid组肾组织病理损伤变化明显。结论:西地那非预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用。
洪芬芳[7]（2019）在《缺血预处理改善肝脏缺血再灌注损伤早期LTC4异常增加的分子机制》文中研究表明研究背景和目的:肝脏缺血再灌注（ischemia reperfushion,I/R）损伤是一个重大临床问题,在创伤、内毒素休克、重建血管外科、肝移植和肝肿瘤切除外科手术中均存在I/R损伤,是导致肝叶切除、肝移植术后器官功能障碍和衰竭的重要因素,为肝脏外科尚未完全解决的棘手问题。白三烯C4（LTC4）是主要经肝脏代谢的前炎症因子。研究表明,肝脏I/R损伤早期LTC4产物增加与膜脂质过氧化以及肝脏功能和形态组织损伤使LTC4代谢产物排泄减少有关,而LTC4积聚可能加重肝脏I/R导致的早已存在的炎症损伤。我们前期报道I/R早期LTC4堆积与LTC4合酶（LTC4S）表达上调和酶活性增强致LTC4合成增加有关。缺血预处理（ischemia preconditioning,IP）是指肝脏短暂缺血预适应对随后较长时间I/R损伤产生保护作用并提高其再生能力。一系列证据表明IP在与I/R损伤有关的肝移植等重大疾病中有保护作用,包括减少肝切除术中失血,降低氧化反应和过氧化物产生,稳定血流动力学及促进肝再生等。尽管有这些进展,IP减轻肝I/R机制尚未完全阐明。有关一氧化氮（nitric oxide,NO）在肝I/R中的作用已经取得一些进展。外源性的NO供体硝普钠通过保护总肝血流量有效的预防了肝损伤。IP被证明在肝切除术中通过改变NO的生成保护肝实质I/R损伤。本课题通过研究IP对肝脏I/R损伤早期LTC4含量及其合酶LTC4S的影响,并探索NO在其中的作用,进一步阐释IP调控肝脏I/R损伤早期LTC4异常增加的分子机制。为临床治疗肝移植和肝肿瘤切除等重大肝脏疾病提供新的干预靶标和手段。方法:雄性SD大鼠随机均分为4组:假手术（sham）组,肝脏缺血再灌注（I/R）组,缺血预处理（IP）组,IP+L-NAME（L-NAME）组。采用大鼠肝脏部分（70%左右）缺血1h再灌注5h损伤模型,缺血前15min始至复灌5h经颈外静脉输注生理盐水（按3ml/kg/min）。IP组:进行长时间肝脏I/R损伤前,用无创伤动脉夹夹闭供应肝左、中叶动静脉10分钟,再松夹10分钟作为IP,余处理同I/R早期组。L-NAME组:IP前10分钟经颈静脉插管给予NOS的非特异性抑制剂L-NAME（10mg/kg）,余处理同IP组。分别以RT-PCR、Western blotting和免疫组化法检查肝微粒体LTC4合酶（LTC4S）基因和蛋白表达,RT-HPLC检查肝组织LTC4含量及LTC4合酶活性,用血清ALT和AST评价肝功能,SOD,MDA和GSH用来评价膜脂质过氧化,HE染色检查肝组织学损伤。结果:与I/R组比较,IP组大鼠肝微粒体LTC4S基因和蛋白表达、微粒体LTC4合酶活性和组织LTC4含量明显下降（P<0.05）,免疫组化染色可见LTC4S阳性较少。同时IP组伴有血清ALT、AST和肝组织MDA含量明显降低（P<0.05）,SOD活性和GSH含量明显增加（P<0.05）;HE染色显示IP组再灌注5h肝脏组织结构破坏较轻。但IP的这些作用在应用一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）非特异性抑制剂L-NAME后被完全反转。结论:1、IP抑制LTC4产物增加可能也与其改善肝功能损伤、膜脂质过氧化、氧化应激和组织结构损伤有关。2、首次发现IP在肝脏I/R早期可能通过NO激活途径下调LTC4S的基因和蛋白表达,并抑制LTC4S活性,减少LTC4异常堆积,进而保护肝脏免于I/R损伤。
王锁刚[8]（2019）在《羟苯磺酸钙调控内质网应激GRP78/CHOP通路诱导肾缺血再灌注损伤保护的分子机制》文中进行了进一步梳理背景:肾缺血再灌注损伤（IRI）是肾脏外科手术和肾移植手术中的常见问题。肾IRI不仅会造成急性肾损伤（AKI）,而且是导致移植肾功能延迟恢复（DGF）、急性排斥反应（AR）和慢性移植肾肾病（CAN）等疾病的重要原因,已成为制约移植受者和移植肾长期存活的瓶颈。近年来,我国公民逝世后器官捐献（DCD）工作的广泛开展,肾移植例数已经跃居世界第二位,而肾IRI作为阻碍肾移植受者长期生存的关键因素依然是世界性难题。大量研究表明,肾IRI是一个多因素、多途径的复杂病理过程,涉及氧自由基损伤、炎症反应、细胞凋亡、内质网应激、线粒体损伤、细胞内Ca2+超载和微血管功能障碍等多种分子和细胞机制引起不同后果的因素参与其中。如何预防和减轻肾IRI是肾脏保护研究中的重要课题。缺血预处理是减轻肾IRI的有效策略,但因其是以肾脏多次缺血为代价的有创性干预措施,故临床应用受到了很大限制。积极探寻新的药物模拟缺血预适应是当前研究热点,但针对单一介质或机制的干预措施并不理想。羟苯磺酸钙为一种新型微血管保护剂,主要作用是降低毛细血管通透性、抑制血小板聚集反应、降低血液黏稠度、改善微循环障碍,并具有强还原性,是公认的强抗氧化剂。有研究证实,羟苯磺酸钙能够改善心肌IRI、肝脏IRI和骨骼肌IRI后肺损伤,但其在肾IRI中是否也有类似的结论?目前尚未检索到羟苯磺酸钙防治肾IRI的相关文献。据此,我们推测羟苯磺酸钙可能对肾IRI具有保护作用。本课题通过体内、体外实验,从不同角度探讨羟苯磺酸钙对肾IRI的影响及作用机制。目的:探讨羟苯磺酸钙在肾IRI中的保护作用,阐明羟苯磺酸钙可能通过抗氧化应激、抑制炎症反应、调控内质网应激凋亡信号通路等途径减轻肾IRI的分子机制,探索羟苯磺酸钙作为价廉、高效、低毒的潜在肾IRI拮抗剂的可能性,为临床防治肾IRI提供充分的理论基础和依据。方法:第一部分建立和评估SD大鼠肾缺血再灌注损伤模型采用右肾切除、左肾蒂夹闭的建模方式建立SD大鼠肾IRI模型;通过观察不同的肾缺血时间（0min、5min、15min、30min、45min、60min）再灌注24h对肾功能、肾组织病理形态及细胞凋亡水平的影响,评估不同缺血时间-再灌注肾损伤的严重程度,构建理想的大鼠急性肾IRI模型。第二部分羟苯磺酸钙预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制应用羟苯磺酸钙对大鼠肾IRI模型进行预处理,大鼠处死前采血测定肾功能（BUN、Scr、Cystatin C）;光学显微镜观察肾组织病理形态学变化,透射电子显微镜观察肾小管上皮超微结构变化;利用丙二醛（MDA）检测试剂盒-硫代巴比妥酸（TBA）法检测SD大鼠肾组织匀浆MDA含量,采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）的含量反映SD大鼠肾脏抗氧化应激能力,检测谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的水平以反映大鼠体内过氧化物分解水平,钼酸铵显色分光光度法检测过氧化氢酶（CAT）活性;ELISA法定量检测血清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的表达水平;应用TUNEL法检测肾组织中的细胞凋亡水平;免疫组织化学法检测肾组织内质网应激凋亡信号通路的关键因子GRP78、CHOP、Cleaved-Caspase-3、Cleaved-Caspase-12的表达和分布。第三部分羟苯磺酸钙调控内质网应激GRP78/CHOP通路减轻HK-2细胞缺血再灌注损伤的分子机制应用抗霉素A及A23187诱导建立HK-2细胞IRI模型,并应用羟苯磺酸钙进行预处理,采用MTT法计算细胞死亡率,结合细胞形态观察评价羟苯磺酸钙对细胞生长和活力的影响,以判断羟苯磺酸钙是否具有减轻HK-2细胞I/R损伤的作用;运用流式细胞术检测细胞凋亡率;检测细胞培养上清液中MDA含量及SOD、GSH-Px、CAT的活性,评价羟苯磺酸钙对HK-2细胞氧化应激反应的干预作用和影响;应用ELISA法定量检测培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-8表达水平,揭示羟苯磺酸钙可能抑制炎症反应的作用;Western blot检测内质网应激凋亡信号通路的关键蛋白GRP78、CHOP、Cleaved-Caspase-3、Cleaved-Caspase-12的表达,评价羟苯磺酸钙对内质网应激诱导凋亡的影响。结果:第一部分建立和评估SD大鼠肾缺血再灌注损伤模型采用右肾切除、左肾蒂夹闭的建模方式建立SD大鼠肾IRI损伤模型;不同的肾缺血时间对肾功能、肾组织病理及凋亡水平的影响不同,肾缺血时间越长,肾损伤越严重;肾缺血45min再灌注24h是理想的大鼠肾IRI模型,为本课题中构建大鼠肾IRI模型及后续动物实验奠定了基础。第二部分羟苯磺酸钙预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制应用羟苯磺酸钙对大鼠肾IRI模型进行预处理,肾功能结果显示,与I/R组比较,羟苯磺酸钙干预组大鼠BUN、Scr、Cystain C明显低于I/R组（P<0.05）,且呈显着的量效关系,说明羟苯磺酸钙对肾IRI模型大鼠具有肾保护作用;肾组织病理表现:光学显微镜和透射电子显微镜下观察,与I/R组比较,羟苯磺酸钙组大鼠的肾小管上皮细胞损伤明显减轻,肾组织病理学评分显着降低（P<0.05）,表明羟苯磺酸钙可改善肾IRI所致的肾组织损伤;与I/R组比较,羟苯磺酸钙干预组MDA明显低于I/R组（P<0.05）,SOD、GSH-Px、CAT显着高于I/R组（P<0.05）,提示羟苯磺酸钙可能通过抗氧化应激减轻肾IRI;ELISA检测大鼠血清中炎症细胞因子:与I/R组相比,羟苯磺酸钙干预组大鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8表达显着下调,且呈剂量依赖关系,提示羟苯磺酸钙通过抑制炎症反应的途径减轻大鼠肾IRI;内质网应激诱导凋亡:与I/R组比较,羟苯磺酸钙干预组大鼠肾组织内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP、Cleaved-Caspase-3、Cleaved-Caspase-12蛋白的表达和分布明显减少（P<0.05）,说明羟苯磺酸钙可降低内质网应激标志蛋白的表达水平,从而抑制内质网应激反应。第三部分羟苯磺酸钙调控内质网应激GRP78/CHOP通路减轻HK-2细胞缺血再灌注损伤的分子机制羟苯磺酸钙对HK-2细胞IRI模型活力的影响:不同处理组HK-2细胞在处理后的前3d,各组细胞活力无明显差异（P>0.05）;在第4d时,与I/R组相比,羟苯磺酸钙干预组细胞活力明显增强（P<0.05）,并呈显着的剂量依赖关系;细胞凋亡率水平:I/R组与正常对照组相比,凋亡程度明显增加,羟苯磺酸钙干预组细胞凋亡率与I/R组相比差异显着（P<0.05）,提示羟苯磺酸钙可减少HK-2细胞凋亡,且呈现一定的剂量依赖性;与I/R组比较,羟苯磺酸钙干预组MDA明显低于I/R组（P<0.05）,而SOD、GSH-Px、CAT显着高于I/R组（P<0.05）,提示羟苯磺酸钙通过抗氧化应激减轻HK-2细胞IRI;ELISA检测发现:与I/R组相比,羟苯磺酸钙干预组的炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的表达水平显着降低（P<0.05）;内质网应激诱导凋亡:Western blot检测GRP78、CHOP、Cleaved-Caspase-3、Cleaved-Caspase-12蛋白表达,与正常对照组相比,I/R组和不同浓度羟苯磺酸钙处理组均明显增高,但羟苯磺酸钙处理组GRP78、CHOP、Cleaved-Caspase-3、Cleaved-Caspase-12蛋白表达量均低于I/R组,差异具有显着性（P<0.01）。结论:1、大鼠肾缺血时间越长,肾损伤程度越严重;肾缺血45min再灌注24h为理想的大鼠急性肾I/R早期损伤模型。2、羟苯磺酸钙对大鼠肾缺血再灌注损伤和HK-2细胞缺血再灌注损伤具有保护效应。3、羟苯磺酸钙预处理对肾缺血再灌注损伤模型具有显着的抗氧化应激、抑制炎症反应及抗凋亡的作用。4、羟苯磺酸钙通过调控内质网应激的关键信号通路GRP78/CHOP而发挥对肾缺血再灌注损伤的保护作用。
蒋鹏,高宏君,尤剑鹏,梁泰生,顾新伟,张建强,梁方芳,黄福,武桢[9]（2018）在《扶芳藤含药血清对大鼠胰岛细胞的保护机制》文中研究说明目的探讨扶芳藤含药血清对大鼠胰岛细胞的保护作用及其机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为5组,每组8只,包括对照组（正常大鼠胰岛细胞予正常大鼠血清培养）、缺血预处理组（获取胰腺前阻断腹主动脉再开放,胰岛细胞予正常大鼠血清培养）、扶芳藤治疗组（正常大鼠胰岛细胞予大鼠扶芳藤含药血清培养）、扶芳藤组和空白组（正常大鼠分别予扶芳藤提取物或蒸馏水灌胃,用于制备大鼠血清）。采用双硫腙（DTZ）染色法观察并计算胰岛数量;采用吖啶橙（AO）/碘化丙啶（PI）染色法,计算胰岛细胞存活率;采用胰岛素释放实验计算刺激指数（SI）来评价胰岛细胞功能;采用谷胱甘肽（GSH）及一氧化氮（NO）试剂盒测定胰岛细胞内GSH、NO含量;采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）信使核糖核酸（mRNA）的表达水平。结果经DTZ染色后胰岛细胞呈特异性猩红色,各组间胰岛细胞数量比较,差异无统计学意义（均为P>0.05）。随培养时间延长,各组胰岛细胞活性均逐渐降低,分离培养72 h后,与对照组比较,扶芳藤治疗组细胞存活率更高,差异有统计学意义（P<0.05）。胰岛素释放实验检测结果提示,与对照组相比,缺血预处理组及扶芳藤治疗组的SI均升高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与对照组比较,缺血预处理组及扶芳藤治疗组胰岛细胞的GSH含量均升高、NO含量均降低、iNOS mRNA表达水平均降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论扶芳藤能通过提高GSH、降低iNOS表达及NO产生,提高胰岛细胞存活率,增强胰岛功能。
金波[10]（2017）在《脂氧素A4在大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及其机制的研究》文中提出目的探讨脂氧素A4（Lipoxin A4,LXA4）对大鼠肾缺血再灌注（ischaemia reperfusion,I/R）诱发急性肾损伤的影响及其内源性保护机制的研究,为治疗急性肾缺血再灌注损伤提供新颖的分子靶点。方法清洁级成年雄性Sprague Dawley（SD）大鼠24只,按照随机数字表法分为4组（n=6）:假手术组（sham组）、肾缺血再灌注组（I/R组）、脂氧素A4预处理组（LXA4组）和脂氧素A4受体抑制剂Boc-2预处理组（Boc-2组）。采用切除右肾后短暂夹闭左肾肾动脉的方法建立肾I/R损伤模型。sham组仅切除右肾;I/R组切除右肾后,短暂夹闭左肾肾动脉再灌注;LXA4组分别在肾I/R前36 h、24 h和12 h经尾静脉注射200μg/kg的LXA4;Boc-2组分别在肾I/R前36 h、24 h和12 h经尾静脉注射100 mg/kg的Boc-2,6 h后再经尾静脉注射200μg/kg的LXA4。在I/R后24 h时检测静脉血肌酐（serum creatinine,Scr）和尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、肾皮质超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）的水平;分别用Western blot和实时荧光定量PCR检测肾小管细胞凋亡相关因子cleaved caspase-3和Bcl-2以及线粒体损伤相关蛋白Mfn2、VDAC1和细胞色素C（cytochrome C）的表达变化;用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测肿瘤坏死因了-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-lβ）和白细胞介素-6（IL-6）的浓度。结果1.与sham组比较,I/R组（P<0.001）、LXA4组（P=0.035）和Boc-2组（P<0.001）Scr升高,I/R组（P<0.001）、LXA4组（P=0.019）和Boc-2组（P<0.001）BUN升高;与I/R组比较,LXA4组Scr（P<0.001）和BUN（P<0.001）降低;与LXA4组比较,Boc-2组Scr（P=0.004）和BUN（P=0.003）升高。2.与sham组比较,I/R组（P<0.001）、LXA4组（P=0.044）和Boc-2组（P<0.001）肾皮质SOD升高,I/R组（P<0.001）、LXA4组（P=0.033）和Boc-2组（P<0.001）MDA降低;与I/R组比较,LXA4组肾皮质SOD（P=0.003）降低,而MDA（P=0.001）升高;与LXA4组比较,Boc-2组肾皮质SOD（P=0.04）升高,而MDA（P=0.004）降低。3.与sham组比较,I/R组（P<0.001）、LXA4组（P<0.001）和Boc-2组（P<0.001）肾皮质cleaved caspase-3表达上调,而I/R组（P<0.001）、LXA4组（P<0.001）和Boc-2组（P<0.001）Bcl-2表达下调;与I/R组比较,LXA4组肾皮质cleaved caspase-3表达下调（P<0.001）,而Bcl-2表达上调（P<0.001）;与LXA4组比较,Boc-2组肾皮质cleaved caspase-3表达上调（P<0.001）,而Bcl-2表达下调（P<0.001）。4.与sham组比较,I/R组（P<0.001）、LXA4组（P=0.047）和Boc-2组（P<0.001）肾皮质Mfn2表达降低,I/R组（P<0.001）、LXA4组（P=0.003）和Boc-2组（P<0.001）VDAC1表达降低,I/R组（P<0.001）、LXA4组（P<0.001）和Boc-2组（P<0.001）cytochrome C表达升高;与I/R组比较,LXA4组肾皮质Mfn2（P=0.020）和VDAC1表达升高（P=0.001）,而cytochrome C表达降低（P=0.002）;与LXA4组比较,Boc-2组肾皮质Mfn2（P=0.003）和VDAC1（P<0.001）表达降低,而cytochrome C（P=0.014）表达升高。5.与sham组比较,I/R组TNF-α（P<0.001）、IL-6（P=0.001）和IL-1（P=0.001）表达升高;与I/R组比较,LXA4组肾皮质TNF-α（P=0.004）、IL-6（P=0.031）和IL-1（P=0.032）表达降低;与LXA4组比较,Boc-2组肾皮质TNF-α（P=0.014）、IL-6（P=0.023）和IL-1（P=0.025）表达升高。结论1.大鼠肾I/R后Scr和BUN水平升高;脂氧素A4预处理降低Scr和BUN水平;Boc-2逆转脂氧素A4的作用。2.大鼠肾I/R后SOD升高,MDA水平降低;脂氧素A4预处理降低SOD和升高MDA水平;Boc-2逆转脂氧素A4的作用。3.大鼠肾I/R后cleaved caspase-3表达升高,Bcl-2表达降低;脂氧素A4预处理降低cleaved caspase-3表达和升高Bcl-2表达;Boc-2逆转脂氧素A4的作用。4.大鼠肾I/R后cytochrome C表达升高,Mfn2和VDAC1表达降低;脂氧素A4预处理降低cytochrome C表达和升高Mfn2和VDAC1表达;Boc-2逆转脂氧素A4的作用。5.大鼠肾I/R后TNF-α、IL-1β和IL-6水平增高;脂氧素A4预处理降低TNF-α、IL-1β和IL-6的产生。6.脂氧素A4与大鼠肾缺血再灌注诱发肾损伤时内源性保护机制相关,并通过脂氧素A4受体抑制肾小管细胞凋亡、缓解线粒体损伤而降低大鼠肾缺血再灌注诱导的急性肾损伤。
二、一氧化氮对大鼠移植胰腺再灌注损伤的保护作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、一氧化氮对大鼠移植胰腺再灌注损伤的保护作用（论文提纲范文）
（1）基于优化算法的痰瘀同治方抗心肌缺血再灌注损伤分子网络机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 中医药抗心肌缺血再灌注损伤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 中药复方的网络药理学研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述三 网络药理学算法在中医药领域的应用现状 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 临床研究 |
| 1 痰瘀同治方抗MI/RI的分子网络机制 |
| 1.1 MI/RI靶点的收集与整理 |
| 1.2 痰瘀同治方中药活性成分及其靶点的收集与整理 |
| 1.3 痰瘀同治方中药活性成分抗MI/RI的核心靶点的筛选 |
| 1.4 构建痰瘀同治方“中药活性成分-靶点-MI/RI”分子网络并计算中药活性成分的网络效力值 |
| 1.5 痰瘀同治方抗MI/RI核心靶点的富集分析 |
| 1.6 小结 |
| 2 基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法 |
| 2.1 基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法的基本原理与优势 |
| 2.2 基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法的公式 |
| 2.3 小结 |
| 3 基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法的痰瘀同治方抗MI/RI的分子网络机制 |
| 3.1 基于优化算法构建痰瘀同治方“中药活性成分-靶点-MI/RI”的核心网络 |
| 3.2 基于优化算法构建痰瘀同治方“中药活性成分-靶点-MI/RI”的核心网络靶点的富集分析 |
| 3.3 小结 |
| 4 对平均最短路径偏向的重启随机游走算法的验证 |
| 4.1 痰瘀同治方核心中药活性成分与MI/RI关键靶点的分子对接 |
| 4.2 应用优化算法前后痰瘀同治方抗MI/RI靶点数量及富集分析路径的对比 |
| 4.3 基于优化算法的痰瘀同治方抗MI/RI靶点富集分析结果与课题组前期研究结果的对比 |
| 4.4 小结 |
| 5 痰瘀同治方祛痰中药组/化瘀中药组抗MI/RI的分子网络机制 |
| 5.1 痰瘀同治方祛痰中药组抗MI/RI的分子网络机制 |
| 5.2 痰瘀同治方化瘀中药组抗MI/RI的分子网络机制 |
| 讨论 |
| 1 基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法 |
| 1.1 有偏向的重启随机游走算法中对偏向概率参数的筛选 |
| 1.2 基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法与其它算法的对比与分析 |
| 1.3 基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法与随机游走算法的对比与分析 |
| 1.4 基于平均最短路径偏向的重启随机游走算法的适用性及其不足 |
| 2 痰瘀同治方抗MI/RI的核心中药活性成分及其核心中药 |
| 3 痰瘀同治方、本方祛痰中药组和本方化瘀中药组抗MI/RI的分子网络机制的对比与分析 |
| 3.1 痰瘀同治方与本方祛痰中药组共同抗MI/RI的分子网络机制 |
| 3.2 痰瘀同治方与本方化瘀中药组共同抗MI/RI的分子网络机制 |
| 3.3 痰瘀同治方、本方祛痰中药组和本方化瘀中药组抗MI/RI的分子网络机制的对比研究 |
| 4 痰瘀同治方抗MI/RI的分子网络机制 |
| 4.1 痰瘀同治方抗MI/RI的分子网络机制 |
| 4.2 痰瘀同治方祛痰中药组抗MI/RI的分子网络机制 |
| 4.3 痰瘀同治方化瘀中药组抗MI/RI的分子网络机制 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附录 |
（2）缺血后处理对大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 正文 |
| 研究一 缺血后处理对大鼠移植胰缺血再灌注损伤和细胞凋亡的保护作用及其机制 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 研究二 IPO, IPC, IPC-IPO 对胰腺冷缺血再灌注损伤和细胞凋亡保护作用的对比研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 研究三 非创伤性双下肢缺血后处理对大鼠移植胰缺血再灌注损伤的保护作用 |
| 1 试验材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 研究四 缺血后处理对大鼠胰腺移植受体小肠肠粘膜屏障的影响 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（3）氨基胍对大鼠胰腺移植保护作用的实验研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 手术方法及标本采集 |
| 1.3 检测指标及方法 |
| 1.3.1 血清NO水平检测 |
| 1.3.2 血糖检测 |
| 1.3.3 血清淀粉酶活力测定 |
| 1.3.4 胰腺组织NOS活性测定 |
| 1.3.5 免疫组织化学检测 |
| 1.3.6 病理学观察 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 结 果 |
| 2.1 血清NO水平 |
| 2.2 血清淀粉酶活性 |
| 2.3 血糖水平 |
| 2.4 胰腺组织中NOS各种亚型的活性 |
| 2.5 胰腺组织中iNOS的表达 |
| 2.6 胰腺病理改变 |
| 3 讨 论 |
（5）安胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠NF-κBp65、INOS、COX-2、TNF-α、IL-1β表达影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 现代医学文献研究 |
| 1.1 SAP概述 |
| 1.2 SAP病因 |
| 1.3 SAP发病机制 |
| 1.4 SAP诊断 |
| 1.5 SAP非手术治疗进展 |
| 2 传统医学文献研究 |
| 2.1 中医对AP的大体认识 |
| 2.2 SAP中医辨证论治 |
| 2.3 中医对SAP的治疗 |
| 第二部分 动物实验 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 造模前处理 |
| 2.3 造模 |
| 2.4 标本采集 |
| 2.5 HE染色及病理切片制作 |
| 2.6 指标检测 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 实验大鼠胰腺大体观察结果 |
| 3.2 胰腺组织病理结果 |
| 3.3 各组大鼠血清TNF-α、IL-1β检测结果 |
| 3.4 各组大鼠胰腺组织NF-κBp65mRNA检测结果 |
| 3.5 各组大鼠胰腺组织NF-κBp65、iNOS、COX-2表达结果 |
| 3.6 相关性分析 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 白介素10与SAP |
| 2 NF-κB/TNF-α-IL-1β信号通路与SAP |
| 2.1 NF-κB与SAP |
| 2.2 TNF-α、IL-1β与SAP |
| 2.3 NF-κB、TNF-α、IL-1β与SAP |
| 3 NF-κB/iNOS-COX-2信号通路与SAP |
| 4 SAP炎症通路与微循环通路的关系 |
| 4.1 TNF-α、IL-1β均可诱导iNOS的表达 |
| 4.2 TNF-α、IL-1β均可诱导C0X-2 的表达 |
| 4.3 NF-κB、TNF-α、IL-1β、iNOS、COX-2与SAP |
| 4.4 实验小结 |
| 第四部分 结语 |
| 1 结论 |
| 2 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 重症急性胰腺炎微循环障碍中西医发病机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（6）西地那非对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 背景回顾 |
| 1.1 肾缺血再灌注损伤 |
| 1.2 缺血再灌注损伤机制 |
| 1.2.1 线粒体功能障碍 |
| 1.2.2 超氧化物和ROS |
| 1.2.3 钙超载 |
| 1.2.4 内质网应激 |
| 1.3 五磷酸二酯酶抑制剂 |
| 1.3.1 西地那非概述 |
| 1.3.2 NO/cGMP信号通路 |
| 1.3.3 肾脏与NO/ cGMP通路 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验药品 |
| 2.1.3 实验试剂 |
| 2.1.4 实验仪器 |
| 2.1.5 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 实验动物分组 |
| 2.2.2 给药剂量与方法 |
| 2.2.3 给药剂量与方法 |
| 2.2.4 实验标本的采集和处理 |
| 2.2.5 测定血清Cr和BUN浓度 |
| 2.2.6 测定肾组织中SOD含量 |
| 2.2.7 测定肾组织中Bcl2、Bax、Caspase3 基因表达水平 |
| 2.2.8 测定肾组织中Caspase3 蛋白含量 |
| 2.2.9 肾组织H-E染色 |
| 2.3 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 血清Cr和BUN浓度 |
| 3.2 肾组织中SOD含量 |
| 3.3 测定肾组织中Bcl2、Bax、Caspase3 基因表达水平 |
| 3.4 测定肾组织中Caspase3 蛋白含量 |
| 3.5 肾组织H-E染色结果 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 研究展望 |
| 参考文献 |
| 第六章 综述 |
| 参考文献 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
| 缩略词表 |
（7）缺血预处理改善肝脏缺血再灌注损伤早期LTC4异常增加的分子机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩写一览表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验主要试剂及相关药物 |
| 2.1.3 主要实验仪器 |
| 2.1.4 实验溶液配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 动物模型、IP处理及分组 |
| 2.2.2 血清ALT、AST活性，以及肝脏组织SOD活性、MDA和GSH含量检测 |
| 2.2.3 RP-HPLC测定肝组织LTC4含量 |
| 2.2.4 RP-HPLC测定肝微粒体LTC4合成酶活性 |
| 2.2.5 RT-PCR检测肝组织LTC4S基因表达情况 |
| 2.2.6 Western blot检测肝组织蛋白表达情况 |
| 2.2.7 组织学 |
| 2.2.8 统计分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 IP对大鼠肝I/R损伤期间血清ALT和AST活性的影响 |
| 3.2 病理检查结果 |
| 3.3 IP对大鼠肝组织SOD活性,MDA和GSH含量的影响 |
| 3.4 IP对肝脏I/R期间LTC4含量的影响 |
| 3.5 IP对肝脏I/R期间LTC4含量和肝微粒LTC4合成酶活性的影响 |
| 3.6 RT-PCR检测大鼠肝脏LTC4S m RNA的表达 |
| 3.7 IP对大鼠肝脏I/R期间LTC4S蛋白表达的影响 |
| 3.8 免疫组化染色检查IP对大鼠肝组织LTC4S表达定位分布的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 论文综述 |
| 参考文献 |
（8）羟苯磺酸钙调控内质网应激GRP78/CHOP通路诱导肾缺血再灌注损伤保护的分子机制（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 建立和评估SD大鼠肾缺血再灌注损伤模型 |
| 引言 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 羟苯磺酸钙预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制 |
| 引言 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 羟苯磺酸钙调控内质网应激GRP78/CHOP通路减轻HK-2细胞缺血再灌注损伤的分子机制 |
| 引言 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（9）扶芳藤含药血清对大鼠胰岛细胞的保护机制（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验动物及分组 |
| 1.1.2 实验仪器及试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 扶芳藤提取物制备 |
| 1.2.2 扶芳藤含药血清制备 |
| 1.2.3 大鼠胰岛细胞的分离与培养 |
| 1.2.4 胰岛细胞计数及存活率测定 |
| 1.2.5 胰岛细胞功能测定 |
| 1.2.6 GSH和NO含量测定 |
| 1.2.7 RT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶m RNA的表达 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组胰岛细胞分离培养后的情况 |
| 2.2 各组胰岛细胞分离培养后细胞存活率的比较 |
| 2.3 各组胰岛细胞功能的比较 |
| 2.4 各组胰岛细胞GSH和NO含量的比较 |
| 2.5 各组胰岛细胞i NOS m RNA表达水平的比较 |
| 3 讨论 |
（10）脂氧素A4在大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及其机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型及实验分组 |
| 2.2.2 标本的收集 |
| 2.2.3 大鼠肾缺血再灌注后血清BUN、Scr水平检测 |
| 2.2.4 大鼠肾缺血再灌注后肾皮质MDA、SOD水平检测 |
| 2.2.5 Western blot法肾小管细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3、Bcl-2、VDAC、CytoC、Mfn-2的表达检测 |
| 2.2.6 ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平 |
| 2.3 统计学方法 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 各组大鼠缺血再灌注后血清BUN和Scr的比较 |
| 3.2 大鼠缺血再灌注后肾皮质MDA含量及SOD活力的比较 |
| 3.3 大鼠缺血再灌注后肾脏Caspase-3表达的变化 |
| 3.4 大鼠缺血再灌注后肾脏Cleaved caspase-3表达的变化 |
| 3.5 大鼠缺血再灌注后肾脏Bcl-2表达的变化 |
| 3.6 大鼠缺血再灌注后肾脏VDAC1表达的变化 |
| 3.7 大鼠缺血再灌注后肾脏Mfn-2表达的变化 |
| 3.8 大鼠缺血再灌注后肾脏CytoC表达的变化 |
| 3.9 大鼠缺血再灌注后血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 脂氧素A4预处理降低急性肾缺血再灌注损伤 |
| 4.2 肾移植与急性肾缺损伤 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间发表的学术论文 |
四、一氧化氮对大鼠移植胰腺再灌注损伤的保护作用（论文参考文献）
- [1]基于优化算法的痰瘀同治方抗心肌缺血再灌注损伤分子网络机制研究[D]. 高宏杰. 中国中医科学院, 2021(02)
- [2]缺血后处理对大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究[D]. 张召辉. 第四军医大学, 2009(12)
- [3]氨基胍对大鼠胰腺移植保护作用的实验研究[J]. 李柏峰,张克忠,刘永锋,程颖,成东华,李铁民. 中国普通外科杂志, 2008(03)
- [4]《第三军医大学学报》2002年第24卷主题词索引[J]. 冷怀明. 第三军医大学学报, 2002(12)
- [5]安胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠NF-κBp65、INOS、COX-2、TNF-α、IL-1β表达影响的实验研究[D]. 文玲. 广西中医药大学, 2020(02)
- [6]西地那非对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及机制研究[D]. 常威. 兰州大学, 2020(01)
- [7]缺血预处理改善肝脏缺血再灌注损伤早期LTC4异常增加的分子机制[D]. 洪芬芳. 南昌大学, 2019(01)
- [8]羟苯磺酸钙调控内质网应激GRP78/CHOP通路诱导肾缺血再灌注损伤保护的分子机制[D]. 王锁刚. 中国人民解放军空军军医大学, 2019(06)
- [9]扶芳藤含药血清对大鼠胰岛细胞的保护机制[J]. 蒋鹏,高宏君,尤剑鹏,梁泰生,顾新伟,张建强,梁方芳,黄福,武桢. 器官移植, 2018(04)
- [10]脂氧素A4在大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及其机制的研究[D]. 金波. 江苏大学, 2017(05)