一、RIP发展趋势非常明朗（论文文献综述）
刘敏跃[1]（2021）在《酵母硒对鸡蛋品质的影响及其对脂多糖诱导鸡脾组织损伤的保护作用研究》文中指出硒是抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶的活性成分,同时还参与合成体内多种含硒蛋白,在机体氧化应激、免疫调节、细胞凋亡与程序性坏死等多个过程中发挥重要作用。在蛋鸡饲养中,容易受到脂多糖、糖皮质激素、热应激和冷应激等因素刺激导致机体免疫功能和生产性能降低。不同硒源和硒水平对蛋鸡抗氧化能力、免疫能力及生产性能影响差异较大。酵母硒作为常用的有机硒源,具有安全性好、吸收率高的优点。为探讨酵母硒对鸡蛋品质及蛋鸡免疫功能的影响,本试验建立酵母硒拮抗LPS诱导蛋鸡脾脏损伤和淋巴细胞损伤免疫应激模型,以及酵母硒影响蛋鸡生产性能模型,检测蛋鸡脾组织病理学变化,检测脾组织及淋巴细胞氧化应激指标、炎症反应指标、程序性坏死相关基因、热休克蛋白m RNA和蛋白水平变化,以及鸡蛋品质等生产性能相关指标,旨在阐明酵母硒对鸡蛋品质及蛋鸡免疫功能的影响及其机制,为酵母硒在蛋鸡饲养及生产中的广泛应用提供理论依据。试验一选取38周龄健康海兰褐蛋鸡960羽,随机分成2组,每组6个重复,每个重复80羽。对照组饲喂基础饲粮添加亚硒酸钠0.35mg/kg（以硒计）;试验组在基础饲粮添加0.35mg/kg的酵母硒组（以硒计）;预饲期7天,试验期56d。55d时对试验鸡进行分组,即对照组、酵母硒组、酵母硒+LPS组、LPS组。酵母硒+LPS组和LPS组腹腔注射LPS,10h后采集各组试验动物血清和脾组织样品。应用生物化学方法检测脾组织和血清抗氧化指标（GPX、SOD、CAT、MDA、NO、iNOS）和细胞因子（INF-γ、TNF-α、IL-2、IL-1β）表达水平;应用HE染色法、TUNEL法、流式细胞术等技术观察蛋鸡脾组织病理形态学变化和淋巴细胞程序性坏死变化;应用RT-PCR、Western-bolt等技术检测蛋鸡脾组织和淋巴细胞22种硒蛋白相关基因（Dio1、Dio2、Dio3、GPX1、GPX2、GPX3、GPX4、SelH、SelI、Sel15、SelM、SelO、SelK、SelPb、Selpp、SelT、Sepx1、SelU、SelS、TrxR1、TrxR2、TrxR3）表达水平,热休克蛋白基因及蛋白（HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90）表达水平,炎症因子相关指标（iNOS、COX-2、NF-κB、PTGE、TNF-α、HO-1）表达水平,MAPK信号通路相关基因（ERK/p-ERK、JNK/p-JNK、P38/p-P38）表达水平及程序性坏死信号通路相关基因（MLKL、FADD、RIP1、RIP3、caspase-8）表达水平。结果表明:HE染色结果显示LPS可引起蛋鸡脾脏组织炎性细胞浸润、结构损伤,酵母硒可减轻上述表现。AO/EB双重荧光染色和流式细胞术结果显示,LPS可以诱导鸡脾淋巴细胞发生程序性坏死,添加酵母硒可以在一定程度上降低淋巴细胞的坏死率。酵母硒组脾组织和血清中抗氧化指标、细胞因子水平均没有显着变化,LPS组脾组织和血清中抗氧化指标和细胞因子水平均呈现显着变化;而酵母硒+LPS组脾组织和血清中抗氧化指标和细胞因子表达水平介于对照组与LPS组之间,统计学上均表现为显着差异,结果表明酵母硒可缓解LPS引起的氧化应激。酵母硒组脾组织中GPX4、SelH、SelI、SelM、SelO、Selpp、SelT、Sepx1、SelU的m RNA表达水平显着增加,LPS组处理可显着降低GPX2、GPX4、SelH、SelI、Sel15、SelM、SelO mRNA表达水平,而SelK、SelS、TrxR1、TrxR3 mRNA表达水平有所增加。此外,与LPS组比较,酵母硒+LPS组中除SelU外,其余21种硒蛋白mRNA水平均有显着变化。结果表明酵母硒可显着影响蛋鸡多种硒蛋白表达水平。LPS组脾组织HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90和淋巴细胞中HSP60、HSP70和HSP90表达水平显着升高;酵母硒+LPS组HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90表达水平显着升高;而与LPS组相比,酵母硒+LPS组中HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90表达水平显着降低,表明酵母硒可显着降低LPS引起的蛋鸡热休克蛋白表达增加。LPS组脾组织和淋巴细胞中iNOS、COX-2、NF-κB、PTGE、TNF-α的表达量与对照组、酵母硒组相比显着升高,HO-1表达量显着下降。酵母硒+LPS组中i NOS、COX-2、NF-κB、PTGE、TNF-α表达量与对照组、酵母硒组相比显着升高,与LPS组相比显着降低,HO-1表达显着升高。表明酵母硒可减轻LPS诱导的炎症反应。酵母硒组脾组织和淋巴细胞中MAPK信号通路ERK/p-ERK、JNK/p-JNK、p38/p-p38表达变化不明显,LPS组中ERK/p-ERK、JNK/p-JNK、p38/p-p38表达水平与对照组比较增加。酵母硒+LPS组中ERK/p-ERK、JNK/p-JNK、p38/p-p38表达水平与LPS组比较显着降低。表明酵母硒可抑制LPS诱导的MAPK信号通路活化。酵母硒组脾组织和淋巴细胞中程序性坏死信号通路相关指标表达变化不明显,LPS组中MLKL、FADD、RIP1、RIP3表达水平与对照组比较显着增加,而caspase-8表达水平降低。酵母硒+LPS组中MLKL、FADD、RIP1、RIP3表达水平与LPS组比较显着降低,而caspase-8表达水平增加。结果表明酵母硒可抑制LPS诱导的脾脏组织和淋巴细胞程序化坏死。试验二选取38周龄健康海兰褐蛋鸡1440羽,随机分成3组,每组5个重复,每个重复96羽。对照组蛋鸡饲喂基础饲粮添加0.35mg/kg亚硒酸钠组（以硒计）;试验组分别在基础饲粮中添加酵母硒,含硒分别为0.35mg/kg和0.5mg/kg（以硒计）;试验期为56d。检测各组蛋鸡产蛋性能（蛋鸡产蛋率、产蛋量、蛋重和料蛋比）、蛋品质（硒含量、叶黄素含量、鸡蛋质量、卵黄系数、气室高度和哈氏单位）和抗氧化指标（GSH-Px、SOD、MDA、T-AOC）的变化。结果表明:各组产蛋率、产蛋量、蛋重和料蛋比之间差异不显着;饲粮中添加酵母硒可显着提高鸡蛋中硒含量,随日粮中硒含量提高鸡蛋中硒含量也随之提高,同时酵母硒可显着提高鸡蛋中叶黄素含量,使卵黄颜色色度加深;酵母硒组鸡蛋质量损失率、气室高度有降低趋势,而卵黄系数和哈氏单位显着增加;酵母硒显着提高蛋中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量,显着增加鸡蛋中超氧化物歧化酶（SOD）含量,显着降低蛋中丙二醛（MDA）含量。结果表明,酵母硒可显着提升鸡蛋品质并延长货架期。综上所述,酵母硒可显着提高蛋中硒和叶黄素含量,改善蛋品质,增加蛋中抗氧化指标水平并延长鸡蛋货架期。酵母硒可能通过减轻氧化应激调控NF-κB和MAPK通路拮抗LPS引起的脾组织程序性坏死,缓解蛋鸡脾组织损伤,而HSP27、HSP40、HSP60、HSP70、HSP90等热休克蛋白和GPX4、SelH、SelI、SelM等硒蛋白可能参与了上述过程。蛋鸡日粮中添加酵母硒不仅可以显着提升蛋品质,还可改善蛋鸡免疫功能。
吕威[2]（2021）在《长链非编码RNA lncMGPF对肌肉生长发育的影响及其分子机制研究》文中提出骨骼肌是哺乳动物动物体内最大的组织,肌肉产量与品质性状是动物生产中重要的经济性状。骨骼肌的生长发育过程十分复杂,各种转录因子,转录辅助因子,表观修饰因子在其中发挥调控作用。因此研究阐明骨骼肌生长发育的机理对于畜牧业与人类医学都具有重大指导意义。Lnc RNA是一类转录本长度在200nt以上,没有蛋白编码能力的RNA。研究发现lnc RNA参与调控各种生物学活动,并且在肌肉组织中检测到大量lnc RNA的表达,但其中只有极少数lnc RNA的功能机制被研究。本研究筛选并验证了一个可以促进肌肉生长和再生的lnc RNA—lncMGPF（lnc RNA Muscle Growth Promoting Factor）,研究了lncMGPF促进肌肉发育的分子机制及其在猪、人和小鼠物种间的保守性,研究内容与结果如下:1.采用荧光定量PCR（q RT-PCR）技术检测小鼠成肌细胞分化过程中lncMGPF的表达变化趋势,结果发现lncMGPF的表达随着分化进行持续升高,以及不同组织中表达量的比较发现其在腿肌、背最长肌、心肌和舌肌等组织中特异性高表达。采用双荧光素酶报告系统对lncMGPF启动子活性进行分析发现在-345bp到+200bp区域可能存在Myo D结合靶位点,并利用染色质免疫沉淀技术（Chromatin immunoprecipitation,Ch IP）验证了Myo D与该区域的结合能力,实验结果证实lncMGPF表达受Myo D的调控。2.在C57BL野生小鼠中采用CRISPR-Cas9基因编辑技术在全基因组水平敲除lncMGPF,与野生型小鼠相比,lncMGPF基因敲除小鼠（lncMGPF KO）生长速度明显减慢,体重减小。lncMGPF KO小鼠肌肉重量和肌纤维横截面积显着性减小,同时骨骼肌卫星细胞分化能力显着减弱。利用肌肉注射Cardiotoxin（CTX）诱导骨骼肌急性损伤模型发现敲除lncMGPF显着性降低肌肉再生能力。肌肉超表达lncMGPF可以补救lncMGPF KO小鼠的肌肉表型,同时可以促进野生小鼠的正常肌肉生长。3.通过生物信息学预测以及双荧光素酶活性分析实验发现lncMGPF可以与5个成肌分化相关的mi RNA靶向结合;通过超表达和干涉lncMGPF实验发现lncMGPF只对mi R-135a-5p调控成肌分化的下游靶基因肌细胞增强因子2C（MEF2C）表达有显着性影响。在细胞中共转lncMGPF双荧光报告载体、mi R-135a-5p mimics和MEF2C-3’UTR双荧光报告载体,发现mi R-135a-5p可以显着性抑制lncMGPF双荧光报告载体活性;通过lncMGPF和mi R-135a-5p细胞共转染实验发现超表达mi R-135a-5p可以抑制MEF2C、Myo D、Myo G、和My HC表达,而超表达lncMGPF可以挽救mi R-135a-5p的抑制效果。4.RNA pull down联合蛋白质谱以及RNA结合蛋白免疫沉淀（RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RIP）等实验研究结果表明lncMGPF可以与Hu R蛋白特异性结合;通过构建lncMGPF基因缺失片段进行RNA pull down和超表达实验,发现lncMGPF 1630-1795bp区域是其结合Hu R蛋白和发挥功能所必需的。超表达lncMGPF后RIP实验结果发现lncMGPF可通过增强Hu R蛋白与肌分化相关基因Myo D与Myo G m RNA的结合能力。lncMGPF与Hu R细胞共转染实验发现,lncMGPF增强Myo D、Myo G m RNA稳定性依赖于Hu R。5.对lncMGPF进行物种间保守性分析,发现在猪H2AFZ和MTTP基因间存在lncMGPF的同源基因AK394747。首先采用RACE实验对其全长进行研究,确定了AK394747全长为1556bp。利用q RT-PCR技术对AK394747的核质分布进行检测发现AK394747在细胞增殖主要富集于细胞核内,而细胞进入分化期后主要富集在细胞质中。同时发现在细胞分化过程中AK394747持续上调。沉默AK394747的表达会导致细胞分化受到抑制,而过表达AK394747导致细胞分化进程加快。机制上,对AK394747序列保守性进行分析,发现其都存在与mi R-135a-5p结合位点以及与Hu R结合的核心区域。通过双荧光素酶活性分析与共转染实验验证了AK394747可以充当mi R-135a-5p分子海绵调控MEF2C的表达;相同地,RNA pull down与半衰期实验验证了AK394747与Hu R蛋白互作增强Myo D、Myo G m RNA稳定性。6.通过保守性分析发现在人H2AFZ和MTTP基因间存在一个与小鼠lncMGPF保守的lnc RNA-MT510647（命名为hlncMGPF）。利用RACE技术鉴定hlncMGPF转录本全长为1360bp。利用荧光定量PCR技术检测发现hlncMGPF在人骨骼肌成肌细胞分化过程中持续上调。超表达hlncMGPF导致人骨骼肌成肌细胞分化加快,与此同时,在小鼠肌肉中超表达hlncMGPF也可促进小鼠肌肉生长。对hlncMGPF序列保守性进行分析发现,与小鼠lncMGPF相似,都存在与mi R-135a-5p结合位点以及与Hu R结合的核心区域。综上所述,我们发现lncMGPF是一个在物种间保守的肌肉生长正向调节因子,lncMGPF在细胞分化过程中从细胞核转移到细胞质,主要通过转录后调节促进肌生成,一方面lncMGPF作为mi R-135a-5p的mi RNA海绵,减弱mi R-135a-5p对MEF2C的抑制作用,从而增加MEF2C基因的表达,另一方面lncMGPF通过募集Hu R结合到Myo D和Myo G m RNAs的3’UTR,增加了细胞质中Hu R的积累,增强了Myo D和Myo G m RNAs的稳定性。lncMGPF/mi R-135a-5p/MEF2C和lncMGPF/Hu R/Myo D/Myo G通路共同构成了一个新的生肌调节因子介导的肌生成调控网络。
张初琴[3]（2021）在《慢性间歇性低氧状态mTOR/NF-κB通路参与BDNF介导的大鼠海马原代神经元突触可塑性调控及机制》文中提出阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS）是指睡眠时由于上气道反复塌陷阻塞导致呼吸暂停或低通气,引起间歇性低氧血症、夜间觉醒、白天嗜睡以及认知功能障碍等症状和体征[1]。一项大规模的Mete分析显示,OSAHS在男女的发病率分别为4～29%和2～9%[2],其中重度OSAHS分别为49.7%和23.4%,且发病率与日俱增[3]。国内外很多文献报道,OSAHS可引起认知障碍,主要表现在注意力、记忆力和执行力下降等[4-6]。Friedman等研究发现,伴认知损害的OSAHS儿童在扁桃体腺样体术后可恢复正常,提示儿童的认知损害是可逆的[7];而成人,即使得到持续、正规的CPAP治疗或手术后仍不能完全逆转认知障碍[7,8]。因此,OSAHS相关认知功能障碍的机制研究是当下的研究热点。OSAHS的发病可能与慢性的间歇性缺氧（intermittenthypoxia,IH）有关,IH是一种反复的低氧/复氧模式,类似于大脑的缺血/再灌注（ischemia reperfusion,IR）,可导致海马、大脑皮层等处神经元的凋亡及大脑损害[9]。脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）是一种神经营养因子,在神经生长和分化过程中起关键作用,能够敏锐地调节突触传递和可塑性[10]。早先的研究发现在大脑和脊髓的IR状态下,BDNF表达升高,以保护神经元[11];小鼠经短时间缺氧处理后的其海马中BDNF水平显着降低[12];然而一项周期较长的IH研究中,海马BDNF的表达增强了[13];在另一项较不严重的每日间歇性缺氧范式也增加了 BDNF在脊髓中的表达[14]。这些结果表明,缺氧/再氧循环的数量和频率可能是影响BDNF表达的主要因素。那么,IH条件下,是什么信号通路来调节BDNF的表达和释放从而调控突触的可塑性?这些需要更为深入的探讨。既往研究表明哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路及其下游因子核转录因子（nuclearfactorkappa-B,NF-κB）对维持神经系统正常生理功能,尤其是对学习和认知功能起着至关重要的作用[15]。NF-κB作为一种重要的转录因子,可调节许多参与免疫及炎症反应的因子表达,包括:肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1 β,IL-1β）、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12、iNOS、环氧合酶 2（cyclooxygenase-2,COX-2）、趋化因子、粘附分子、集落刺激因子等。其调节的促炎症因子与BDNF的表达密切相关。有文献报告,IL-1β可减少BDNF的表达[16],也可导致BDNF信号传导受损[17]。在这项研究中,我们应用了循环的低氧三元气体（1.5%O2+5%CO2+93.5%N2）和正常氧三元气体（21%O2+5%CO2+74%N2）建立大鼠海马神经元（hippocampus neurons,HN）的IH细胞模型和动物模型,分别在细胞和动物水平上,以mTOR/NF-κB信号通路为切入点,检测IH环境下该通路关键信号分子NF-κB、NF-κB的抑制蛋白亚基α（inhibitor of NF-κB α,IκBα）、IκB的抑制蛋白亚基β（inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase β,IKKβ）及促炎症因子（TNF-α,IL-1β）、突触相关蛋白（突触后致密蛋白 95,postsynaptic density Protein 95,PSD-95;突触小泡蛋白,synaptophysin,SYN）的表达;然后采用mTOR抑制剂雷帕霉素（rapamycin,Rapa）和NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵（pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC）分别抑制 mTOR 和 NF-κB,观察以上信号分子的变化,阐明IH中mTOR/NF-κB信号通路参与突触可塑性的调控,为OSAHS导致认知障碍的发病机制研究提供一个新思路。研究目的（1）建立IH的细胞和动物模型,分别从细胞和动物水平阐明IH对HN的影响。（2）采用Rapa和PDTC分别抑制mTOR和NF-κB,阐明mTOR/NF-κB信号通路对BDNF介导的HN突触可塑性的调节作用,明确在慢性IH环境态下突触的可塑性损伤机制。（3）基于mTOR/NF-κB信号通路对BDNF表达的调控,阐明褪黑素改善慢性IH所致海马突触可塑性损伤的作用机制,为OSAHS的防治提供新的思路。研究方法第一部分细胞水平（1）采用免疫荧光染色鉴定原代HN,光镜及电镜观察不同状态下的突触超微结构的变化。（2）原代HN分别在IH和持续性低氧（congtinue hypoxia,CH）培养,光镜观察不同状态下的突触变化,用免疫印迹法（western blotting,WB）检测BDNF、SYN和PSD-95的蛋白水平。（3）经PDTC预处理后,原代HN在IH环境中培养18小时,采用实时定量 PCR（realtime PCR,RT-PCR）检测 NF-κB、IL-1β、TNF-α以及 BDNF、突触相关蛋白SYN和PSD-95的mRNA水平,用WB检测神经元细胞中NF-κB、IL-1β及TNF-α蛋白以及BDNF、SYN和PSD-95的表达情况。（4）经Rapa预处理后,HN原代HN在IH环境中继续培养18小时,用RT-PCR检测检测IKβ、IκBα和NF-κB的mRNA水平;用WB检测HN细胞中BDNF、IKKβ、IκBα和NF-κB蛋白的表达情况。第二部分动物水平（1）莫里斯（Morris）水迷宫实验评估Rapa和PDTC对大鼠学习和记忆能力的影响,并利用H&E染色检测Rapa和PDTC对海马的保护作用;（2）随机分组,药物组分别给予一定浓度的Rapa和PDTC,IH环境饲养8周,WB法检测大鼠海马组织中IKKβ、IκBα、BDNF和NF-κB等蛋白的表达情况;采用RT-PCR检测大鼠海马组织中IKKβ、IκBα、BDNF和NF-κB的mRNA水平。（3）给予一定浓度的褪黑素（melatonim,MT）,IH环境饲养8周,WB法检测大鼠海马组织中IKKβ、IκBα、BDNF和NF-κB等蛋白的表达情况;采用RT-PCR检测大鼠海马组织中IKKβ、IκBα、BDNF和NF-κB的mRNA水平。结果第一部分细胞水平（1）原代培养的HN经免疫荧光染色鉴定纯度达90%以上。（2）暴露在IH环境后,原代HN明显皱缩,胞核严重变形,预处理Rapa和PDTC可以改善这些现象。（3）CH和IH处理后BDNF、PSD-95和SYN蛋白水平的明显降低,这一影响在IH条件下比CH条件下更明显。（4）IH 组中 NF-κB、TNF-α、IL-1β蛋白表达水平升高,BDNF、PSD-95、SYN表达水平降低,而Rapa、PDTC预处理后可以对抗这种变化。（5）IH引起IκBα和IKKβ表达被抑制,PDTC预处理组无明显变化,而Rapa预处理组明显升高。第二部分动物水平（1）Morris水迷宫实验结果表明暴露在IH条件下,在训练的第2、3、4、5d,大鼠平台穿越的潜伏期和通路长度均增加,平台穿越时间降低,在Rapa或PDTC干预后,这种趋势被抑制。（2）IH暴露导致神经元萎缩、坏死,排列紊乱,而IH+Rapa组和IH+PDTC组较单纯IH组海马损伤明显减轻。（3）IH 组中 NF-κB、TNF-α、IL-1β蛋白表达水平升高,BDNF、PSD-95、SYN表达水平降低,而Rapa、PDTC预处理后可以对抗这种变化。（4）IH引起IκBα和IKKβ表达被抑制,PDTC预处理组无明显变化,而Rapa预处理组明显升高。（5）MT预处理后,IH状态下NF-κB蛋白和mRNA水平升高和BDNF、PSD-95和SYN下降的的趋势明显降低。结论1、IH较CH更易导致大鼠原代海马神经元的突触可塑性受损。2、IH导致海马组织受到损害而影响大鼠的学习与记忆。3、PDTC和Rapa预处理后可以改善IH诱导的海马神经元损伤,表明mTOR/NF-κB信号通路通过调控BDNF参与慢性IH状态下海马神经元突触可塑性的调节。4、PDTC、Rapa和MT可逆转IH诱导的海马神经元损伤,可为今后以mTOR、NF-κB、BDNF为作用靶点,设计、合成新型MT衍生物,为OSAHS的认知功能损害防治提供新的思路。意义1、在慢性IH环境下,通过分别抑制mTOR和抑制NF-κB,从细胞及动物水平阐明mTOR/NF-κB信号通路参与BDNF介导的突触可塑性下降,最终导致认知功能损伤的作用机制。2、基于mTOR调控的IKKβ/IκB/NF-κB信号通路对BDNF表达的调控,阐明MT改善慢性IH导致突触可塑性损伤的作用机制。
李志扬[4]（2021）在《hsa＿Circ＿0001785通过靶向吸附miR-942上调SOCS3在体内外抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭》文中进行了进一步梳理研究背景及目的:乳腺癌（Breast cancer,BC）是全球女性最常见的癌症,其发病率已经上升为全球第一位。乳腺癌的发病机理复杂,其分子特征和临床表现形式多样,患者的预后差异很大。因此,研究乳腺癌的分子机制,寻找乳腺癌早期诊断标志物和新的治疗靶点具有重要意义。环状RNA（CircRNA）是一类广泛表达的非编码RNA,近年研究发现其在肿瘤的发生发展中发挥着重要的调控作用。值得注意的是,先前研究发现乳腺癌患者外周血中的hsa＿Circ＿0001785显着降低,其表达水平与组织学肿瘤分级、肿瘤淋巴结转移（TNM）阶段和淋巴结转移高度相关,这些发现表明Circ＿0001785在乳腺癌中可能具有更好的诊断价值和更高的诊断准确性。目前,Circ＿0001785在乳腺癌中的详细作用和机制尚未明确。本研究的目的是在体内和体外水平研究hsa＿Circ＿0001785对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在的分子机制。研究方法及内容:1.通过 qRT-PCR 检测 hsa＿Circ＿0001785 在五种 BC 细胞系（T47D,MCF-7,MDA-MB-453,MDA-MB-231 和 BT-549）和一种正常乳腺细胞系（MCF-10A）中的表达情况。筛选表达差异最大的2种细胞系进行后续实验。经过RNaseR处理证实Circ＿0001785是环状RNA。构建了 Circ＿0001785的过表达质粒（pcDNA-Circ＿0001785）,并通过qRT-PCR验证其过表达效率。2.通过体外实验研究hsa＿Circ＿0001785在乳腺癌细胞中的生物学功能。通过CCK-8、克隆形成、划痕实验和Transwell实验、蛋白质印迹法（western blot）分析hsa＿Circ＿0001785对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。3.构建接种T47D细胞和MDA-MB-231细胞的裸鼠皮下肿瘤模型进行体内实验。每天监测小鼠体重和肿瘤体积,处理14d后,解剖荷瘤小鼠的肿瘤组织,观察hsa＿Circ＿0001785对肿瘤异种移植的裸鼠体内成瘤的影响。通过蛋白质印迹法（western blot）分析测定相关蛋白（KI67、PCNA、MMP7和MMP9、SOCS3）在肿瘤组织中的表达。4.检测Circ＿0001785的亚细胞定位。通过对CIRCinteractome数据库的分析,评分标准（参考背景+分数>90）,选取与circ＿0001785结合的前5个miRNA进行验证。通过荧光素酶报告基因技术及western blot分析筛选出目标miRNA。qRT-PCR及体内实验研究circ＿0001785和miR-942之间的表达关系。通过RNA免疫沉淀（RIP）和双荧光素酶报告基因检测法确定hsa＿Circ＿0001785在乳腺癌中起竞争性内源RNA（ceRNA）的作用。5.构建miR-942mimic,通过qRT-PCR测定miR-942过表达和抑制的转染效率。通过CCK-8、克隆形成分析、划痕实验、Transwell实验和westernblot检测了 miR-942在转染了 Circ＿0001785的BC细胞中的生物学功能。通过小鼠异种移植实验和westernblot研究了体内circ＿0001785对miR-942的影响。6.TargetScan数据库预测SOCS3是miR-942的靶基因,qRT-PCR及westernblot研究SOCS3的表达。通过双荧光素酶报告基因实验证实miR-942和SOCS3之间的结合关系。RIP实验探索circ＿0001785的ceRNA功能。Westernblot分析细胞及肿瘤组织中circ＿0001785和miR-942对SOCS3表达的影响。结果:1.Circ＿0001785在乳腺癌细胞中低表达,Circ＿0001785过表达抑制乳腺癌细胞及增殖、迁移和侵袭,同时抑制乳腺癌在体内的进展。2.Circ＿0001785主要存在于细胞质中,可通过竞争性地结合miR-942在乳腺癌中起ceRNA的作用。3.Circ＿0001785通过靶向miR-942调节乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭;抑制乳腺癌在体内的进展;4.Circ＿0001785通过抑制miR-942调节其靶基因SOCS3的表达。结论:环状RNA hsa＿Circ＿0001785通过调节miR-942/SOCS3信号轴抑制BC细胞的增殖、迁移和侵袭。
季伟[5]（2021）在《大规模MIMO-OFDM系统中基于角域的信道状态信息获取方法研究》文中指出大规模多输入多输出（multiple input multiple output,MIMO）技术通过在基站端配备成百上千根天线,可以有效提高系统的频谱效率和能量效率,满足未来无线网络的容量需求,从而成为未来移动通信网络的关键使能技术之一。大规模MIMO 技术结合正交频分复用（orthogonal frequency division multiplexing,OFDM）技术,即大规模MIMO-OFDM技术,凭借大规模MIMO的空间复用增益和OFDM对抗多径衰落的鲁棒性,已经成功写入5G新无线（new radio,NR）标准。基站端需要根据各子载波下行信道状态信息（channel state information,CSI）展开下行预编码、资源分配等信道自适应技术,以提升大规模MIMO-OFDM系统的频效、能效等性能。在频分双工（frequency division duplex,FDD）模式下,由于上下行链路不存在信道互易性,基站端获取下行CSI时的下行导频开销和上行反馈开销均与基站天线数成正比,基站端下行CSI的获取便成为制约FDD大规模MIMO技术走向实用的瓶颈问题。此外,由于当前的移动通信蜂窝网络大多工作在FDD模式,考虑到系统的平滑演进,FDD大规模MIMO-OFDM系统在未来极有可能会被广泛采用。所以,在FDD大规模MIMO-OFDM系统中设计低导频开销和反馈开销的下行信道估计方案非常重要。本文聚焦FDD宽带大规模MIMO-OFDM系统中的下行CSI获取。在大规模MIMO-OFDM系统中,信道角域的分辨力随着基站天线数的增大而线性增大,由于基站端的散射体有限,信号能量集中在较小的几个角域内,信道角域中存在信号能量的有效维度远小于初始维度,因此信道呈现出稀疏的特征。利用信道角域稀疏性,可以在保证下行信道估计性能的情况下降低下行导频开销以及上行反馈开销。此外,在上下行信道载波频率相差不大时,上下行信道存在物理路径（包括角域信息）互易性。利用上下行信道物理路径互易性,在保证下行信道估计性能的情况下,用于下行信道估计的导频开销可以进一步减少。通过挖掘大规模MIMO-OFDM系统中信道的角域性质,本文基于压缩感知（compressive sensing,CS）理论、贝叶斯理论,设计下行信道估计方案,以提升固定导频开销情况下的下行信道估计性能、减小闭环压缩CSI反馈与估计架构下的下行导频开销和上行反馈开销。本论文的主要贡献和研究成果总结如下:（1）针对无线传输场景下带宽内各子载波由于经过相同散射体而存在相同的角域稀疏结构以及信道角域存在角域扩展的情况,提出基于各子载波信道角域共同稀疏性和成簇性的下行信道估计方案,在相同导频开销的情况下,提升下行信道估计性能。因为在传输带宽内各子载波的传输路径经过相同的散射体,所以带宽内各子载波信道角域存在共同稀疏性,下行信道估计问题可以建模为一个多测量向量（multipe measurement vector,MMV）模型。由于传输信号的有效能量集中在几个较小的角域扩展范围内,此时下行信道角域的稀疏支撑集呈现出成簇的性质,角域信道可以建模为—个块稀疏向量。针对角域稀疏支撑集的成簇性,本文利用一个二进制变量刻画其稀疏性,然后引入局部贝塔过程刻画其成簇性。最后构建对应的贝叶斯架构图,并根据所构建的贝叶斯架构图,设计基于贝叶斯推论的贝叶斯信道估计算法。（2）在闭环压缩CSI反馈与估计架构下,利用闭环特征,设计自适应导频开销的下行信道估计方案,在减小下行导频开销的同时,也同步减小上行反馈开销。为了利用CS同时减小下行导频开销和上行反馈开销,学术界提出一种新的闭环压缩CSI反馈与估计架构。在这种模式下,下行导频开销和上行反馈开销有着相同的量,那么如果可以减小下行导频开销,上行反馈开销也同步减小。为了充分利用闭环模式的特征,本文考虑到由于信道估计在基站端进行,基站可以根据估计获得的信道信息设计下行专用导频序列,同时可以根据估计的信道质量控制导频的发送,实现自适应导频开销。鉴于此,本文设计基于相关向量机的贝叶斯信道估计方案,在获得估计信道的同时,获得估计信道的后验分布。基于估计信道的后验分布,采用最小化估计信道的微分熵,设计下行专用导频序列,相比于采用随机导频序列的情况,提升下行信道估计性能。基于估计信道的质量,控制下行导频发送,实现导频自适应开销,在保证一定信道估计性能的条件下,减小下行导频开销和上行反馈开销。（3）在波束倾斜影响下,首先设计低复杂度上行信道提取方案,然后利用上下行信道各路径到达角和时延的互易性,获得下行信道的路径数、各路径的到达角和时延,最后在闭环模式下设计下行信道各路径的增益估计方案,提高了下行信道估计性能。未来无线网络将采用更多的天线和更大的传输带宽,这必将带来波束倾斜影响。由于波束倾斜的影响,传统的信道模型不再适用于该类大规模阵列天线系统,进而现有的信道估计方案也不再适用。本文首先分析了在波束倾斜影响下的上行信道的空域-频域宽带特征,通过充分挖掘上行信道的空域-频域宽带特征,设计了一种改进的基于密度的聚类算法获得包含真实路径的潜在路径,然后考虑到潜在路径中大部分路径都非真实路径,设计非网格稀疏自适应匹配追踪算法获得上行信道的真实路径的路径数、各路径的到达角以及时延,完成上行信道的多径提取,实现上行信道重构。基于上下行信道物理路径的互易性,下行信道的路径数、各路径的到达角和时延信息也一并在基站端获得。最后,在闭环模式下设计下行信道各路径的增益估计方案,完成对下行信道的重构,提高了下行信道估计性能。
梁茜茜[6]（2021）在《《商务馆学汉语词典》与《牛津中阶英汉双解词典》（第5版）手部动作动词配例对比研究》文中进行了进一步梳理外向型学习词典是第二语言学习中重要的工具书,相较于国外,我国的辞书研究起步较晚,且长期受到内向型汉语词典的影响,因此我国的外向型学习词典编纂研究理论仍需要不断探索,而近些年汉语国际教育的蓬勃发展急需要一部完备的外向型汉语学习词典问世。目前我国已有多部外向型学习词典问世,由鲁健骥和吕文华编纂的《商务馆学汉语词典》近年来广受好评,是水平较高的一部外向型学习词典。但我们不得不承认的是这部词典并非尽善尽美,仍有许多可优化之处。本文以《商务馆学汉语词典》（以下简称为《商务馆》）与《牛津中阶英汉双解词典》（第5版）（以下简称为《牛津中阶》）中手部动作动词为研究对象,从配例的角度入手,探求外向型学习词典在配例设置方面的特点。本文首先确定了“手部动作动词”的范围和标准,从两部词典中筛选出符合标准的语料,在《商务馆》中筛选出符合标准的手部动作动词145个,在《牛津中阶》中与之相对应的手部动作动词208个,以此作为本文的研究对象。采用定量的方法对两部词典中配例的数量和类型做了数据分析。随后又结合配例的内容,对配例的语义功能、语法功能和语用功能进行了具体的分析。通过对两部词典中配例的分析,为外向型学习词典编纂提供一些优化建议。在数量方面,外向型学习词典承担着词语解码的重要作用,所以要保证一定的数量的配例,已达到编码的示范作用,并且配例的数量应向高频词倾斜,多层次多角度地展示词语的功能。在类型方面,本文只从配例的形式角度进行了分析,认为短语例在词典中没有发挥出相应的作用,外向型学习词典在编纂的过程中应当重视短语例的作用。配例的功能是本文研究的重点,从语义、语法和语用三个方面对其进行了分析,认为在配例数量有限的情况下,外向型学习词典中的配例应与释义相符,即配例应具有典型性、简洁性。
蒋忠新[7]（2020）在《去甲基化酶FTO调控的m6A修饰在卵巢衰老中的作用及机制研究》文中进行了进一步梳理随着经济发展和社会进程高速推进,我国人口结构也在向老龄化发展,女性生殖衰老是其中的一个重要话题。卵巢衰老（Ovarian aging）在临床上主要表现为卵巢储备功能减退（Diminished ovarian reserve,DOR）、早发性卵巢功能不全（Premature ovarian insufficiency,POI）及对促排卵药物的卵巢低反应（Poor ovarian response,POR）。其会导致女性卵泡对于促排卵药物的反应性下降,产生卵母细胞数量减少;卵母细胞发育潜能下降,导致不孕症的发生。卵泡是卵巢基本功能单位,其中颗粒细胞（Granolusa cells,GCs）是包绕在卵母细胞周围的一层或多层支持细胞,在卵泡发育的每一环节中都起着极为重要的作用。卵巢颗粒细胞与卵母细胞之间具有广泛的交流,通过多种自分泌和旁分泌途径,在不同时空具有不同的作用。其生长参与卵泡的募集,凋亡调控了卵泡的闭锁。在卵巢衰老进程中,颗粒细胞也是活性氧（Reactive oxygen species,ROS）和晚期糖基化终产物（Advanced glycation end products,AGEs）等衰老相关因素的攻击对象,在卵巢衰老导致的女性不孕中扮演重要角色。N6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine,m6A）是真核生物RNA中含量最为丰富的碱基修饰,广泛存在于m RNA和lnc RNA中。其在不同阶段、不同组织、不同的病理生理状态过程中的修饰具有动态可逆性。RNA m6A参与许多生命进程,其在调控基因表达与翻译、RNA胞浆转运、RNA编辑与可变剪接、RNA稳定性和降解等方面扮演重要角色,具有重要的研究意义。许多研究表明,m6A与配子发生过程密切相关。但其在卵巢衰老的发展进程中扮演的角色尚不明朗。在本研究的第一部分,首先通过比色法检测了来自于衰老卵巢的颗粒细胞及对照组样本中的m6A修饰丰度,发现卵巢衰老病人的颗粒细胞中m6A修饰相对对照组异常增多。通过实时定量PCR、蛋白免疫印迹（western blot）等实验检测样本中影响m6A修饰丰度酶的表达情况发现去甲基化酶FTO呈现下调表达,而ALKBH5、METTL3、METTL4、METTL14、KIAA1429表达无明显变化。同时,通过免疫组织化学、细胞免疫荧光等手段验证了FTO在卵巢颗粒细胞中的特异性表达。为了探究衰老卵巢中颗粒细胞FTO下调的原因,使用过氧化氢作为活性氧来源对细胞进行处理,证实了氧化应激这一衰老因素可以下调卵巢颗粒细胞中的FTO表达,并导致细胞中m6A修饰增多。同时,使用COV434和KGN两种细胞系建立了FTO敲低的卵巢颗粒细胞模型,并探究FTO下调导致的m6A增多对颗粒细胞衰老的影响。点杂交实验（dot-blot）显示,敲低去甲基化酶FTO后细胞m6A修饰增多;β半乳糖苷酶染色及γHA.X染色显示敲低FTO的COV434和KGN细胞易于被过氧化氢诱导产生衰老表型。这一部分初步证实了m6A在衰老卵巢的颗粒细胞中具有异常表达,这一异常可能由衰老进程中活性氧导致的去甲基化酶FTO下调所引起,且该过程对于卵巢衰老相关的颗粒细胞功能有一定影响。本研究的第二部分探究了m6A修饰对于卵巢颗粒细胞的影响机制。为了探究其在卵巢颗粒细胞中的修饰靶点,首先对去甲基化酶FTO敲低的卵巢颗粒细胞及其对照组进行RNA甲基化测序（Methylated RNA immunoprecipitation sequening,Me RIP-seq）和转录组测序（m RNA sequening,m RNA-seq）,筛选其中的靶点分子,发现m6A修饰增加且表达丰度发生显着改变的分子11个。通过Me RIP-q PCR、实时定量PCR等对细胞系样本进行再次验证;同时,通过慢病毒过表达FTO以验证两者之间的量化关系。初步确定了FOS是去甲基化酶FTO引起卵巢颗粒细胞功能变化关键的m6A修饰消减重要靶点。进一步通过实时定量PCR对15组分别来自衰老卵巢及对照组的颗粒细胞样本进行验证,证实了FTO与FOS间具有相关性,且FOS在卵巢衰老病人的颗粒细胞样本中显着上调。为了探究去甲基化酶FTO使FOS m RNA丰度升高的机制,使用放线菌素D对敲低FTO的颗粒细胞及其对照组进行了RNA转录抑制实验,并通过实时定量PCR对FOS-m RNA的丰度进行检测,发现FTO敲低的细胞相较对照组,FOS m RNA的半衰期延长,稳定性增加;同时,构建了FOS-3’UTR序列中m6A甲基化位点突变的双荧光素酶质粒及其野生型对照,对颗粒细胞系进行转染,检测突变型和野生型质粒的荧光变化,证明了FTO通过消减FOS m RNA-3’UTR的m6A修饰增强其稳定性这一过程。进一步通过加减法实验在细胞系中对FOS在卵巢颗粒细胞中的功能进行验证。发现使用小干扰RNA（si RNA）干扰FOS表达后,前期由于敲低FTO导致的衰老表型得到部分恢复。综上所述,卵巢衰老进程与m6A密切相关。这一进程可能由卵巢颗粒细胞中活性氧积蓄导致的去甲基化酶FTO的下调表达引起,其使FOS-m RNA-3’UTR的m6A修饰增多,进而使FOS丰度增加,最终导致卵巢颗粒细胞衰老加速,影响卵巢衰老进程。
张群霞[8]（2020）在《叶绿体RNA编辑体核心复合物的结构与功能研究》文中研究指明RNA编辑是一类转录后修饰,主要通过碱基的插入、删除或替换,产生RNA转录本不同于原始DNA的编码序列,改变成熟RNA上的遗传信息,引起下游编码氨基酸序列的改变。在开花植物的叶绿体和线粒体中,RNA编辑将胞嘧啶C转变为尿嘧啶U。目前,已有一系列RNA编辑因子被鉴定,包括PPR（pentatricopeptide repeat）蛋白家族、MORF（multiple organellar RNA-editing factors）蛋白家族（又称RIP,RNA-editing factor interacting protein）。PPR是一类超大蛋白家族,分为P-type和PLS-type。研究表明,PLS-type PPR蛋白作为反式作用因子,特异性识别靶标RNA的顺式作用元件。MORF是一类新鉴定的参与细胞器RNA编辑的蛋白家族。PLS-type PPR和MORF被认为是植物细胞器RNA编辑体的核心成员。然而,参与RNA编辑的MORF蛋白的实际功能仍不清楚,MORF与PLS-type PPR的结构及二者在RNA编辑体中的协作机制依然未知。针对该科学问题,本文首先利用酵母双杂交技术筛选了叶绿体MORF与PPR的互作关系,体外表达纯化了MORF/PPR蛋白复合物,生化实验表明MORF9可增强天然PPR蛋白LPA66的RNA结合能力。在此基础上,我们利用X射线晶体学手段解析了拟南芥叶绿体的MORF9、MORF2的三维结构。为进一步探究MORF蛋白的作用机理,我们尝试解析MORF-PPR复合物的晶体结构。但由于天然PPR蛋白的性质较差,我们做了大量的结晶尝试和优化,仍然没有解析MORF/PPR蛋白复合物的结构。为克服该困难,我们基于天然PPR蛋白的保守序列,人工设计了一个（PLS）3PPR蛋白,该蛋白与MORF9互作,且MORF9可显着地增强（PLS）3PPR的RNA结合能力,表明人工设计的（PLS）3PPR与天然的PPR功能相似。鉴于此,我们解析了MORF9/（PLS）3PPR复合物的晶体结构,发现MORF9通过诱导（PLS）3PPR的结构变化,从而增强（PLS）3PPR的RNA结合能力,阐明了MORF9调控PPR/RNA互作的分子机制。我们的研究不仅首次鉴定了MORF蛋白在叶绿体RNA编辑中发挥作用的分子机制,而且解析了RNA编辑体核心复合物组装和发挥作用的功能模型。
李泽[9]（2020）在《基于深度神经网络的逆合成孔径雷达成像方法研究》文中提出传统的逆合成孔径雷达（Inverse Synthetic Aperture Radar,简称ISAR）成像采用距离-多普勒（Range-Doppler,简称RD）类方法。压缩感知（Compressive Sensing,简称CS）类ISAR成像方法能够利用非常少的数据重建出图像对比度高,旁瓣干扰少的高质量目标图像。但CS ISAR成像方法性能和效率分别受到待成像场景稀疏表示不准确和重建算法效率低的限制。深度神经网络（Deep Neural Network,简称DNN）以其特有的多层非线性映射网络,可充分地挖掘并推演出输入数据中的抽象特征表示。为了获得更准确的ISAR目标场景的抽象稀疏表示,提高ISAR成像质量和效率,本文聚焦DNN,分别研究基于卷积神经网络（Convolutional Neural Network,简称CNN）,生成对抗网络（Generative Adversarial Network,简称GAN）和深度交替乘子法（Alternating Direction Method of Multipliers,简称ADMM）网络的ISAR成像方法,验证DNN在ISAR成像中的可行性。首先简要阐述ISAR成像原理和评述ISAR成像技术发展现状。介绍DNN的基本框架和主要应用,详细评述DNN在成像问题中的研究进展,并给出本文的研究背景和主要研究内容。鉴于CNN在挖掘抽象稀疏表示方面的优势,提出可行的成像CNN的架构,构建并增强ISAR训练数据集,用于充分训练CNN。设计CNN损失函数,明确训练策略,用于获得参数最优的CNN。提出一种基于CNN的ISAR成像方法。将CNN的ISAR成像结果与最优的CS ISAR成像方法对比分析,总结基于CNN的ISAR成像方法的特点和优势。接着提出可行的成像GAN的架构,所提GAN由生成器网络和判别器网络构成。构建并增强GAN训练数据集,确定GAN损失函数和训练策略,用于获得网络参数最优的GAN。训练好的生成器网络用于ISAR成像。将成像结果与CS ISAR成像方法,基于CNN的ISAR成像方法成像结果比较,得出GAN在ISAR成像应用中的特点和优势。鉴于DNN的训练是以“黑盒子”形式完成,其内部的训练过程和参数变化并不明朗,根据ADMM算法设计深度ADMM网络,确定相应的损失函数形式和训练策略,获得参数最优的深度ADMM网络。提出基于深度ADMM网络的ISAR成像方法。深度ADMM网络的输入为二维频域随机降采样的测量数据,输出为最终的成像结果。给出深度ADMM网络成像结果与CS ISAR成像方法的成像结果的对比分析,分析深度ADMM网络对同类型目标先验信息的依赖性,总结基于深度ADMM网络的ISAR成像方法的特点和优势。最后总结三种成像方法各自的特点,应用条件和使用方法。展望未来可继续探索的研究方向。
伍玉海[10]（2020）在《肝素酶在半胱氨酸蛋白酶8抑制下诱导肝癌微血管内皮细胞坏死性凋亡》文中研究指明目的:验证肝癌细胞肝素酶（HPSE）诱导微血管内皮细胞坏死性凋亡;并探究肝素酶（HPSE）和半胱氨酸蛋白酶8（caspase-8）在其中的作用及机制。方法:使用HPSE RNAi慢病毒转染HCCLM3细胞株来敲减HPSE,利用qPCR和Western-Blot实验来验证转染效率。用transwell实验检测肝癌细胞迁移能力。将HCCLM3肝癌细胞与脐静脉内皮细胞HUVEC共培养,利用流式凋亡实验检测内皮细胞死亡率,电镜观察死亡方式。总共分成四组,非共培养组（HUVEC单纯培养组,Blank组）、HPSE mock组、HPSE RNAi组和NEC-1组,用ELISA实验检测上清液HPSE、TNF-ɑ和caspase-8的含量,用Western-Blot实验检测RIP1、RIP3、MLKL和caspase-8的表达。通过裸鼠腹腔转移模型的HE染色实验和蛋白荧光双标实验验证肝癌细胞的微血管侵犯。结果:1、HPSE RNAi慢病毒转染HCCLM3细胞后HPSE基因转录和蛋白表达水平均显着低于mock组（P<0.05）。2、transwell实验显示降低HPSE表达可抑制肝癌细胞迁移能力（P<0.05 vs mock）。3、流式凋亡实验结果显示HUVEC细胞与HCCLM3细胞共培养48h后细胞死亡增加（P<0.05）,电镜结果显示共培养死亡细胞有坏死性凋亡特征。4、ELISA实验结果显示非共培养组和HPSE RNAi组上清液TNF-ɑ和HPSE水平比共培养组降低（P<0.05 co-culture vs Blank、P<0.05 HPSE RNAi vs co-culture）,Western-Blot实验结果显示非共培养组、HPSE RNAi组和NEC-1组RIP1、RIP3、MLKL和caspase-8蛋白的表达比共培养组降低（P<0.05 co-culture vs Blank、P<0.05 HPSE-RNAi vs co-culture、P<0.05 NEC-1 vs co-culture）。5、裸鼠腹腔转移模型中HE染色未能发现明显的肝脏内微血管侵犯,荧光双标实验结果显示HPSE RNAi组和NEC-1组p-MLKL表达比HCC组降低（P<0.05 HPSE-RNAi vs HCC、P<0.05 NEC-1 vs HCC）。结论:降低HPSE表达能抑制肝癌细胞迁移能力。HUVEC细胞与HCCLM3肝癌细胞共培养后发生了坏死性凋亡,HPSE诱导了坏死性凋亡,并需要caspase-8的抑制。下调HPSE通过调节TNF-ɑ能抑制这种坏死性凋亡。
二、RIP发展趋势非常明朗（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、RIP发展趋势非常明朗（论文提纲范文）
（1）酵母硒对鸡蛋品质的影响及其对脂多糖诱导鸡脾组织损伤的保护作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 硒的吸收与代谢机制 |
| 1.1.1 硒的吸收 |
| 1.1.2 硒的代谢 |
| 1.1.3 硒在体内的存在形式 |
| 1.2 硒对家禽生产性能的影响 |
| 1.3 硒对禽蛋品质的影响 |
| 1.4 硒对家禽抗氧化功能的影响 |
| 1.5 家禽免疫应激的产生及硒对家禽免疫功能的影响 |
| 1.5.1 家禽免疫应激的产生 |
| 1.5.2 硒与家禽免疫器官发育 |
| 1.5.3 硒对家禽体液免疫的影响 |
| 1.5.4 硒对家禽细胞免疫的影响 |
| 1.6 硒与程序性坏死关系的研究进展 |
| 1.6.1 程序性坏死的调控机理 |
| 1.6.2 程序性坏死与免疫功能的研究进展 |
| 1.6.3 硒调控程序性坏死的研究进展 |
| 1.7 有机硒在家禽业应用的研究进展 |
| 1.7.1 有机硒对家禽繁殖性能的影响 |
| 1.7.2 有机硒对家禽养殖的积极调节作用 |
| 1.7.3 有机硒对家禽养殖的长期效应 |
| 1.8 研究的目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 主要仪器及设备 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要试验动物及饲料 |
| 2.1.4 基础饲粮组成及营养成分 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 试验分组与采样 |
| 2.2.2 检测方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 蛋鸡脾脏组织显微结构结果 |
| 3.2 蛋鸡淋巴细胞程序性坏死检测结果 |
| 3.2.1 AO/EB荧光染色结果 |
| 3.2.2 流式细胞术检测结果 |
| 3.3 蛋鸡氧化应激相关指标检测结果 |
| 3.3.1 蛋鸡脾组织氧化应激相关指标检测结果 |
| 3.3.2 蛋鸡血清氧化应激相关指标检测结果 |
| 3.4 蛋鸡血清和脾组织中细胞因子水平检测结果 |
| 3.4.1 血清中细胞因子含量的检测结果 |
| 3.4.2 脾组织细胞因子mRNA表达水平的检测结果 |
| 3.5 蛋鸡硒蛋白相关基因mRNA表达水平 |
| 3.5.1 脾组织硒蛋白相关基因表达水平 |
| 3.5.2 淋巴细胞硒蛋白相关基因mRNA表达水平 |
| 3.6 蛋鸡热休克蛋白相关指标检测结果 |
| 3.6.1 脾组织热休克蛋白mRNA和蛋白表达水平的检测结果 |
| 3.6.2 淋巴细胞热休克蛋白表达水平的检测结果 |
| 3.7 蛋鸡NF-κB通路相关因子检测结果 |
| 3.7.1 脾组织炎症因子相关指标mRNA和蛋白表达水平的检测结果 |
| 3.7.2 淋巴细胞炎症因子相关指标蛋白表达水平的检测结果 |
| 3.8 蛋鸡MAPK通路相关因子检测结果 |
| 3.8.1 脾组织MAPK通路相关指标mRNA和蛋白表达水平的检测结果 |
| 3.8.2 淋巴细胞MAPK通路相关指标蛋白表达水平的检测结果 |
| 3.9 蛋鸡RIP3依赖性程序性坏死相关因子检测结果 |
| 3.9.1 脾组织RIP3依赖性程序性坏死相关基因mRNA和蛋白表达水平的检测结果 |
| 3.9.2 淋巴细胞RIP3依赖性程序性坏死相关基因蛋白表达水平结果 |
| 3.10 饲料中添加酵母硒对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响 |
| 3.10.1 蛋鸡生产性能的检测结果 |
| 3.10.2 鸡蛋品质的检测结果 |
| 3.10.3 鸡蛋硒和叶黄素水平的检测结果 |
| 3.10.4 鸡蛋货架期的检测结果 |
| 3.10.5 鸡蛋中抗氧化指标的检测结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 酵母硒对蛋鸡血清抗氧化能力的影响 |
| 4.2 酵母硒对蛋鸡细胞因子的影响 |
| 4.3 酵母硒对蛋鸡脾组织和淋巴细胞硒蛋白的影响 |
| 4.4 酵母硒对蛋鸡脾组织和淋巴细胞热休克蛋白的影响 |
| 4.5 酵母硒对蛋鸡脾组织和淋巴细胞NF-κB信号通路的影响 |
| 4.6 酵母硒对蛋鸡脾组织和淋巴细胞MAPK信号通路的影响 |
| 4.7 酵母硒对蛋鸡脾组织和淋巴细胞RIP3依赖性程序性坏死影响 |
| 4.8 酵母硒对蛋鸡生产性能、鸡蛋硒的富集和蛋品质的影响 |
| 4.8.1 酵母硒对蛋鸡生产性能的影响 |
| 4.8.2 酵母硒对鸡蛋中硒水平的富集的影响 |
| 4.8.3 酵母硒对鸡蛋品质的影响 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
（2）长链非编码RNA lncMGPF对肌肉生长发育的影响及其分子机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 骨骼肌的生长发育及调控 |
| 1.1 骨骼肌的生长发育 |
| 1.2 骨骼肌生长发育的主要调控因子 |
| 1.2.1 SIX家族 |
| 1.2.2 Pax家族 |
| 1.2.3 MRFs家族 |
| 1.2.4 MEF2家族 |
| 1.3 HuR蛋白研究进展 |
| 2 长非编码RNA研究进展 |
| 2.1 长非编码RNA的概述 |
| 2.2 长非编码RNA与肌肉的生长发育 |
| 2.2.1 细胞核富集的长非编码RNA调节成肌分化 |
| 2.2.2 细胞质富集的长非编码RNA调节成肌分化 |
| 2.3 长非编码RNA在畜禽肉生长发育中的研究进展 |
| 3 本研究的目的和意义 |
| 第二章 材料和方法 |
| 1 试验材料 |
| 1.1 细胞与实验动物 |
| 1.2 主要试剂和试剂盒 |
| 1.3 常用试剂及配制 |
| 1.4 主要仪器和设备 |
| 1.5 应用的分析软件和生物信息学网站 |
| 1.6 技术路线 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.1.1 细胞复苏 |
| 2.1.2 细胞冻存 |
| 2.1.3 细胞的培养 |
| 2.2 lncMGPF、MEF2C以及HuR真核表达载体构建 |
| 2.2.1 C2C12 细胞基因组DNA提取 |
| 2.2.2 lncMGPF、MEF2C以及HuR基因片段克隆 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳及成像 |
| 2.2.4 PCR产物的胶回收和克隆测序 |
| 2.3 lncMGPF基因启动子双荧光载体构建 |
| 2.3.1 lncMGPF基因启动子片段克隆 |
| 2.4 MyoD超表达载体质粒提取 |
| 2.5 脂质体介导的启动子双荧光载体细胞转染及活性测定 |
| 2.6 lncMGPF核心启动子片段的确定和调控分析 |
| 2.7 染色质免疫沉淀ChIP实验 |
| 2.7.1 ChIP实验步骤 |
| 2.7.2 ChIP产物检测 |
| 2.8 MyoD以及其他干扰片段设计合成 |
| 2.9 细胞转染 |
| 2.10 RNA提取和cDNA制备 |
| 2.10.1 细胞RNA提取 |
| 2.10.2 组织RNA提取 |
| 2.10.3 反转录 |
| 2.11 荧光定量PCR分析 |
| 2.11.1 荧光定量PCR体系 |
| 2.11.2 定量数据分析 |
| 2.11.3 荧光定量PCR引物 |
| 2.12 细胞和组织蛋白提取及浓度测定 |
| 2.13 Western Blot实验 |
| 2.13.1 SDS-PAGE凝胶制备 |
| 2.13.2 SDS-PAGE凝胶电泳 |
| 2.13.3 转膜 |
| 2.13.4 抗原抗体免疫反应 |
| 2.13.5 ECL化学发光检测 |
| 2.14 敲除小鼠制备、基因型鉴定及体重分析 |
| 2.14.1 lncMGPF基因敲除小鼠设计 |
| 2.14.2 lncMGPF基因敲除小鼠体重分析和生长曲线测定 |
| 2.14.3 lncMGPF基因敲除小鼠腿肌重量分析 |
| 2.15 小鼠肌肉的形态学检测 |
| 2.15.1 基因敲除小鼠组织样品的采取 |
| 2.15.2 石蜡切片的制作 |
| 2.15.3 HE染色 |
| 2.15.4 石蜡切片免疫荧光 |
| 2.16 骨骼肌卫星细胞与单根肌纤维的分离和培养 |
| 2.16.1 骨骼肌卫星细胞的分离 |
| 2.16.2 骨骼肌卫星细胞的培养 |
| 2.16.2 单根肌纤维的分离与培养 |
| 2.17 RTCA xCELLigence细胞增殖检测 |
| 2.17.1 细胞悬液准备 |
| 2.17.2 E-Plate16准备 |
| 2.17.3 RTCA程序设置 |
| 2.17.3 结果分析 |
| 2.18 EdU染色 |
| 2.19 CCK-8细胞增殖 |
| 2.20 免疫荧光分析 |
| 2.21 RNA免疫沉淀(RIP) |
| 2.21.1 裂解产物的准备 |
| 2.21.2 磁珠的准备 |
| 2.21.3 RNA沉淀反应 |
| 2.21.4 RNA的纯化 |
| 2.21.5 cDNA的合成 |
| 2.22 miRNA抑制剂和模拟物的设计合成 |
| 2.23 鼠和猪lncMGPF双荧光素酶活性分析 |
| 2.23.1 鼠和猪lncMGPF cDNA的克隆 |
| 2.23.2 pmirGLO-lncMGPF突变载体的构建 |
| 2.23.3 脂质体介导的miRNA和超表达质粒的转染 |
| 2.23.2 脂质体介导的lncMGPF双荧光载体细胞转染及双荧光测定 |
| 2.24 RNA pull down |
| 2.24.1 鼠和猪lncMGPF基因体外转录载体构建 |
| 2.24.2 lncMGPF基因体外转录 |
| 2.25 RNA荧光原位杂交(RNA FISH) |
| 2.26 RACE扩增及序列检测 |
| 2.27 细胞核和细胞质的RNA分离 |
| 2.28 细胞核和细胞质的蛋白分离 |
| 2.29 MyoD与 MyoG mRNA稳定性检测 |
| 2.30 鼠、猪、人lncMGPF慢病毒表达载体构建 |
| 2.30.1 lncMGPF扩增引物以及干涉片段设计 |
| 2.30.2 慢病毒转染293T细胞和纯化 |
| 2.31 慢病毒感染肌卫星细胞 |
| 2.32 数据统计与分析 |
| 2.34 数据资源 |
| 第三章 结果与分析 |
| 1 lnc RNA与MyoD表达相关性分析 |
| 2.lncMGPF时空表达模式研究 |
| 2.1 C2C12细胞分化不同阶段lncMGPF的表达分析 |
| 2.2 lncMGPF在不同组织中表达研究 |
| 2.3 lncMGPF基因在小鼠肌肉发育不同时期表达水平 |
| 2.4 lncMGPF基因编码能力检测 |
| 3 lncMGPF基因的表达受MyoD调控 |
| 3.1 lncMGPF基因启动子区域缺失片段转录活性分析 |
| 3.2 MyoD直接调控lncMGPF表达 |
| 4 lncMGPF基因敲除小鼠肌肉表型研究 |
| 4.1 lncMGPF敲除小鼠模型验证 |
| 4.2 lncMGPF敲除小鼠肌肉质量分析 |
| 4.3 lncMGPF敲除小鼠成肌分化相关分子指标检测 |
| 4.4 lncMGPF基因敲除对小鼠肌肉重量的影响 |
| 4.5 lncMGPF敲除小鼠肌纤维横截面积研究 |
| 4.6 敲除lncMGPF不影响小鼠骨骼肌卫星细胞增殖 |
| 4.7 lncMGPF敲除抑制小鼠肌卫星细胞分化与融合 |
| 4.8 敲除lncMGPF基因对小鼠肌肉运动能力的影响 |
| 4.9 敲除lncMGPF基因对小鼠肌肉再生的影响 |
| 4.10 在小鼠活体上超表达lncMGPF促进肌肉生长 |
| 5 lncMGPF基因结合蛋白质谱分析 |
| 6 lncMGPF基因作为miR-135a-5p分子海绵促进肌肉生长和再生 |
| 6.1 lncMGPF基因与Ago2 蛋白结合 |
| 6.2 lncMGPF基因与miR-135a-5p靶向结合 |
| 6.3 lncMGPF基因作为miR-135a-5p分子海绵调控成肌分化 |
| 7 lncMGPF基因与HuR蛋白结合调控小鼠肌肉发育与再生 |
| 7.1 lncMGPF基因与HuR蛋白结合但不影响表达 |
| 7.2 lncMGPF基因与HuR蛋白结合增加MyoD和 MyoG mRNA稳定性 |
| 7.3 lncMGPF基因通过3个motifs与HuR蛋白结合调控mRNA稳定性 |
| 7.4 lncMGPF基因增加HuR蛋白在细胞质中的分布 |
| 8 猪长非编码RNA AK394747与小鼠lncMGPF属同源基因并且功能与机制上具有保守性 |
| 8.1 猪lncRNA AK394747特征研究 |
| 8.2 AK394747不影响猪肌卫星细胞的增殖 |
| 8.3 AK394747促进猪肌卫星细胞分化与融合 |
| 8.4 AK394747对猪肌肉发育的影响 |
| 8.5 猪AK394747与小鼠lncMGPF在不同物种间功能保守性研究 |
| 8.6 猪AK394747促进小鼠肌肉发育 |
| 8.7 猪AK394747促进小鼠肌肉发育的分子机制 |
| 9 人长非编码RNA hlncMGPF与小鼠lncMGPF属同源基因并且功能与机制上具有保守性 |
| 9.1 小鼠lncMGPF与人lncMGPF之间保守性分析 |
| 9.2 人lncMGPF基因功能研究 |
| 第四章 讨论 |
| 1 lncMGPF表达受MyoD转录调控 |
| 2 lncMGPF在细胞进入分化期时出核机制 |
| 3 lncMGPF对肌肉生长发育的影响 |
| 4 lncMGPF基因作为miR-135a-5p分子海绵调控肌肉生长发育的分子机制 |
| 5 lncMGPF基因通过HuR蛋白增加MyoD与MyoG的mRNA稳定性调控肌肉生长发育的分子机制 |
| 6 lncMGPF基因位置和功能保守型分析 |
| 7 lncMGPF调控肌生成的分子机制模型 |
| 第五章 总结 |
| 5.1 主要研究结果 |
| 5.2 主要创新点 |
| 5.3 不足之处 |
| 5.4 下一步计划 |
| 博士期间发表论文 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 菌株和载体 |
| 致谢 |
（3）慢性间歇性低氧状态mTOR/NF-κB通路参与BDNF介导的大鼠海马原代神经元突触可塑性调控及机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 分析与讨论 |
| 结论 |
| 附图表 |
| 参考文献 |
| 综述 mTOR通路在睡眠呼吸暂停低通气综合征认知研究中的进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 发表的学术论文目录 |
| 英文论文Ⅰ |
| 英文论文Ⅱ |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
（4）hsa＿Circ＿0001785通过靶向吸附miR-942上调SOCS3在体内外抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 乳腺癌 |
| 1.2 环状RNA及其在肿瘤中的生物学功能 |
| 1.3 生物信息学工具在预测CircRNA-疾病的相关性的作用 |
| 1.4 Circ RNA与乳腺癌 |
| 1.5 本研究的目的和意义 |
| 第二章 Circ＿0001785在不同乳腺癌细胞系中的表达特征及其生物学特性 |
| 2.1 实验材料和方法 |
| 2.2 统计方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 Circ＿0001785在体内中的表达特征及生物学功能 |
| 3.1 实验材料和方法 |
| 3.2 统计方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 Circ＿0001785/miR-942/SOCS3构成ceRNA抑制乳腺癌细胞的增殖,迁移和侵袭的分子机制 |
| 4.1 实验材料和方法 |
| 4.2 统计方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（5）大规模MIMO-OFDM系统中基于角域的信道状态信息获取方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语说明 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 B5G通信技术发展 |
| 1.1.2 B5G的关键技术 |
| 1.1.3 大规模MIMO技术 |
| 1.1.4 大规模MIMO信道估计和反馈研究现状 |
| 1.2 论文主要贡献 |
| 1.3 论文组织结构 |
| 第2章 大规模MIMO角域信道估计建模和相关信道估计算法研究 |
| 2.1 大规模MIMO稀疏信道估计 |
| 2.1.1 大规模MIMO信道估计系统模型 |
| 2.1.2 大规模MIMO信道估计导频设计要求 |
| 2.2 基于压缩感知理论的稀疏信道估计算法 |
| 2.2.1 贪婪算法 |
| 2.2.2 凸优化算法 |
| 2.2.3 贝叶斯压缩感知 |
| 2.2.4 基于非网格的下行信道估计方案 |
| 2.2.5 基于凸优化的迭代重加权方案 |
| 2.2.6 基于字典参数估计的稀疏贝叶斯学习方案 |
| 2.3 小结 |
| 第3章 基于信道角域共同稀疏性和成簇性的下行信道估计 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 系统模型 |
| 3.2.1 大规模MIMO下行链路信号传输 |
| 3.2.2 大规模MMO角域稀疏信道 |
| 3.3 多载波下行信道估计问题形成 |
| 3.4 基于共同稀疏簇结构的多载波贝叶斯压缩感知 |
| 3.4.1 先验假设 |
| 3.4.2 稀疏贝叶斯信道估计 |
| 3.5 仿真结果与分析 |
| 3.6 小结 |
| 第4章 基于闭环自适应导频开销的下行信道估计 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 系统模型 |
| 4.2.1 大规模MIMO-OFDM下行信道传输 |
| 4.2.2 多载波下行信道估计问题形成 |
| 4.2.3 闭环自适应压缩信道反馈与估计 |
| 4.3 基于相关向量机的贝叶斯稀疏信道估计 |
| 4.3.1 信道估计算法设计 |
| 4.3.2 导频设计 |
| 4.4 仿真结果分析 |
| 4.5 小结 |
| 第5章 基于多径提取的上下行信道估计 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 系统模型 |
| 5.2.1 宽带大规模MIMO上行信道模型 |
| 5.2.2 上行信道提取问题形成 |
| 5.2.3 获取潜在路径 |
| 5.3 上行信道估计 |
| 5.3.1 上行信道路径提取 |
| 5.3.2 复杂度分析 |
| 5.4 下行信道重构 |
| 5.5 仿真结果分析 |
| 5.6 小结 |
| 第6章 总结 |
| 6.1 文章工作总结 |
| 6.2 未来工作展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间的研究成果和参加的项目 |
（6）《商务馆学汉语词典》与《牛津中阶英汉双解词典》（第5版）手部动作动词配例对比研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 绪论 |
| 第一节 选题缘由 |
| 第二节 相关研究综述 |
| 第三节 研究内容 |
| 第四节 研究方法 |
| 第五节 研究重点、难点与创新点 |
| 第六节 研究价值 |
| 第一章 单音节手部动作动词的界定与分类 |
| 第一节 单音节手部动作动词的定义 |
| 第二节 单音节手部动作动词的界定标准 |
| 第三节 单音节手部动作动词的分类 |
| 第二章 《商务馆学汉语词典》中手部动作动词配例情况分析 |
| 第一节 配例数量分析 |
| 第二节 配例类型分析 |
| 第三节 配例功能分析 |
| 第三章 《牛津中阶英汉双解词典》中手部动作动词配例分析 |
| 第一节 目标词筛选 |
| 第二节 配例数量分析 |
| 第三节 配例类型分析 |
| 第四节 配例功能分析 |
| 第四章 《商务馆》和《牛津中阶》手部动作动词配例对比分析 |
| 第一节 配例数量对比 |
| 第二节 配例类型对比 |
| 第三节 配例功能对比 |
| 第五章 外向型学习词典配例设置的优化建议 |
| 第一节 《商务馆》配例设置优化建议 |
| 第二节 《牛津中阶》配例设置优化建议 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（7）去甲基化酶FTO调控的m6A修饰在卵巢衰老中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 第一部分 衰老卵巢的颗粒细胞中FTO导致的m6A修饰异常作用研究 |
| 一、前言 |
| 二、材料和方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 六、参考文献 |
| 第二部分 FTO在卵巢颗粒细胞中通过m6A途径调控FOS的作用机制研究 |
| 一、前言 |
| 二、材料和方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 六、参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 N6-甲基腺嘌呤在配子发生及胚胎发育中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表论文和参加科研工作情况说明 |
| 致谢 |
（8）叶绿体RNA编辑体核心复合物的结构与功能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第1章 前言 |
| 1.1 科学问题 |
| 1.2 RNA编辑的研究进展 |
| 1.2.1 RNA编辑的类型及功能 |
| 1.2.2 RNA编辑酶的结构生物学研究进展 |
| 1.3 植物细胞器RNA编辑的研究进展 |
| 1.3.1 植物细胞器RNA编辑的类别 |
| 1.3.2 植物细胞器RNA编辑的功能及意义 |
| 1.4 植物细胞器RNA编辑体组成 |
| 1.4.1 PPR蛋白家族 |
| 1.4.2 MORF/RIP蛋白家族 |
| 1.4.3 其它附加成员 |
| 1.5 叶绿体发育与RNA编辑的关系 |
| 1.6 研究目的与意义 |
| 第2章 实验材料与方法 |
| 2.1 实验仪器 |
| 2.2 实验试剂及耗材 |
| 2.3 实验常用溶液及试剂配方 |
| 2.3.1 分子克隆的试剂配方 |
| 2.3.2 蛋白表达及纯化的试剂配方 |
| 2.3.3 蛋白检测的试剂配方 |
| 2.3.4 感受态的制备(Inoue法) |
| 2.3.5 DNA聚合酶的储存配方 |
| 2.3.6 几种蛋白酶的纯化步骤 |
| 2.4 载体及实验菌株 |
| 2.5 实验方法 |
| 2.5.1 重组质粒的构建 |
| 2.5.2 重叠PCR构建定点突变的质粒 |
| 2.5.3 重组蛋白的表达纯化 |
| 2.5.4 重组蛋白的晶体生长及优化 |
| 2.5.5 晶体数据的收集、相位获得及结构解析 |
| 2.5.6 限制性蛋白酶水解实验 |
| 2.5.7 酵母双杂交实验 |
| 2.5.8 Pull down实验 |
| 2.5.9 等温滴定量热(ITC)实验 |
| 2.5.10 分子筛层析实验 |
| 2.5.11 分析型超速离心(AUC)实验 |
| 2.5.12 凝胶迁移率实验(EMSA)实验 |
| 2.6 本文的实验路线 |
| 第3章 叶绿体RNA编辑体核心复合物的功能与结构 |
| 3.1 叶绿体MORF与 PLS-type PPR蛋白的功能关系 |
| 3.1.1 叶绿体MORF因子与PLS-type PPR蛋白的酵母双杂交筛选 |
| 3.1.2 MORF2与CRR28 蛋白的互作验证 |
| 3.1.3 MORF9与LPA66 蛋白的体外互作验证 |
| 3.1.4 MORF9 增强LPA66 蛋白的RNA结合活性 |
| 3.2 叶绿体MORF9/MORF2 的晶体结构 |
| 3.2.1 MORF9的纯化结晶及结构解析 |
| 3.2.2 MORF2的纯化结晶及结构解析 |
| 3.3 MORF2与CRR28 复合物的纯化结晶筛选 |
| 3.4 MORF与人工设计PLS-type PPR的功能及结构 |
| 3.4.1 PLS-type PPR蛋白的人工设计原则 |
| 3.4.2 MORF9 与人工设计(PLS)_3PPR蛋白的互作鉴定 |
| 3.4.3 MORF9 增强(PLS)_3PPR蛋白的RNA结合活性 |
| 3.4.4 MORF与人工设计PLS-type PPR复合物的纯化结晶 |
| 3.4.5 MORF9 与(PLS)_3PPR复合物的三维结构 |
| 3.5 叶绿体RNA编辑体核心复合物的作用机制 |
| 3.5.1 MORF9与PLS-type PPR蛋白的互作机制 |
| 3.5.2 MORF9 诱导(PLS)_3PPR蛋白的结构构象改变 |
| 3.5.3 MORF9 在叶绿体RNA编辑中的功能模型 |
| 3.6 本章小结 |
| 第4章 讨论与展望 |
| 4.1 本研究的创新点 |
| 4.2 植物细胞器RNA编辑体的展望 |
| 4.2.1 胞嘧啶脱氨酶 |
| 4.2.2 MORF蛋白的调控作用 |
| 4.2.3 其它附加因子的功能角色 |
| 4.2.4 细胞器RNA编辑体组成 |
| 参考文献 |
| 附录 A |
| 附录 B |
| 附录 C |
| 附录 D |
| 附录 E |
| 附录 F个人简历及研究成果 |
| 致谢 |
（9）基于深度神经网络的逆合成孔径雷达成像方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 注释表 |
| 缩略词 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 ISAR成像概述 |
| 1.1.1 ISAR成像原理 |
| 1.1.2 ISAR成像研究现状 |
| 1.2 深度神经网络概述 |
| 1.2.1 深度神经网络基本框架 |
| 1.2.2 深度神经网络的研究现状 |
| 1.2.3 基于深度神经网络的成像技术研究 |
| 1.3 论文研究背景与主要研究内容 |
| 1.3.1 本文研究背景 |
| 1.3.2 主要研究内容 |
| 第二章 基于卷积神经网络的ISAR成像方法 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 卷积神经网络 |
| 2.3 基于卷积神经网络的ISAR成像方法 |
| 2.3.1 成像卷积神经网络架构 |
| 2.3.2 成像网络训练数据集的构建和扩充 |
| 2.3.2.1 训练数据集构建和扩充策略 |
| 2.3.2.2 成像网络训练数据集 |
| 2.3.3 成像网络训练策略 |
| 2.4 成像网络性能验证与分析 |
| 2.4.1 成像结果定量评价指标 |
| 2.4.2 成像数据描述 |
| 2.4.3 成像结果与分析 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 基于生成对抗网络的ISAR成像方法 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 生成对抗网络 |
| 3.3 残差网络 |
| 3.4 基于生成对抗网络的ISAR成像方法 |
| 3.4.1 成像生成对抗网络架构 |
| 3.4.2 成像网络训练数据集 |
| 3.4.3 成像网络训练策略 |
| 3.5 成像网络性能验证与分析 |
| 3.5.1 成像数据描述 |
| 3.5.2 成像结果与分析 |
| 3.6 本章小结 |
| 第四章 融合DNN和凸优化迭代求解策略的ISAR成像方法 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 基于ADMM的 ISAR图像重建 |
| 4.3 基于ADMMN的 ISAR成像方法 |
| 4.3.1 成像ADMMN架构 |
| 4.3.2 ADMMN训练数据构建 |
| 4.3.3 ADMMN训练策略 |
| 4.4 成像网络性能验证与分析 |
| 4.4.1 成像数据描述 |
| 4.4.2 成像结果与分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 5.1 工作总结 |
| 5.2 工作展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间的研究成果及发表的学术论文 |
（10）肝素酶在半胱氨酸蛋白酶8抑制下诱导肝癌微血管内皮细胞坏死性凋亡（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料(资料、内容)与方法 |
| 1. 主要仪器 |
| 2. 主要试剂和配剂 |
| 2.1 细胞来源 |
| 2.2 老鼠来源 |
| 2.3 慢病毒 |
| 2.4 抗体 |
| 2.5 主要试剂 |
| 2.6 主要溶剂的配置 |
| 3. 实验方法 |
| 3.1 细胞培养 |
| 3.2 荧光定量PCR( qPCR)检测基因表达 |
| 3.3 Western-Blot检测蛋白表达 |
| 3.4 细胞迁移和侵袭实验 |
| 3.5 HCCLM3和HUVEC细胞共培养实验 |
| 3.6 细胞凋亡流式实验 |
| 3.7 细胞ELISA实验 |
| 3.8 细胞电镜实验 |
| 3.9 裸鼠腹腔转移模型实验 |
| 3.10 小鼠双重免疫荧光实验 |
| 4. 统计学处理 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 |
| 致谢 |
四、RIP发展趋势非常明朗（论文参考文献）
- [1]酵母硒对鸡蛋品质的影响及其对脂多糖诱导鸡脾组织损伤的保护作用研究[D]. 刘敏跃. 东北农业大学, 2021
- [2]长链非编码RNA lncMGPF对肌肉生长发育的影响及其分子机制研究[D]. 吕威. 华中农业大学, 2021
- [3]慢性间歇性低氧状态mTOR/NF-κB通路参与BDNF介导的大鼠海马原代神经元突触可塑性调控及机制[D]. 张初琴. 山东大学, 2021(12)
- [4]hsa＿Circ＿0001785通过靶向吸附miR-942上调SOCS3在体内外抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭[D]. 李志扬. 南方医科大学, 2021(02)
- [5]大规模MIMO-OFDM系统中基于角域的信道状态信息获取方法研究[D]. 季伟. 中国科学技术大学, 2021(09)
- [6]《商务馆学汉语词典》与《牛津中阶英汉双解词典》（第5版）手部动作动词配例对比研究[D]. 梁茜茜. 河北师范大学, 2021(02)
- [7]去甲基化酶FTO调控的m6A修饰在卵巢衰老中的作用及机制研究[D]. 蒋忠新. 中国人民解放军海军军医大学, 2020(02)
- [8]叶绿体RNA编辑体核心复合物的结构与功能研究[D]. 张群霞. 华中农业大学, 2020
- [9]基于深度神经网络的逆合成孔径雷达成像方法研究[D]. 李泽. 南京航空航天大学, 2020(07)
- [10]肝素酶在半胱氨酸蛋白酶8抑制下诱导肝癌微血管内皮细胞坏死性凋亡[D]. 伍玉海. 皖南医学院, 2020(01)