一、新疆棉花枯萎病菌生理小种的初步研究（论文文献综述）
纪晓彬[1]（2020）在《新疆兵团垦区棉花大丽轮枝菌群体遗传多样性初步分析》文中认为大丽轮枝菌（Verticillium dahliae Kleb.）属于典型的土传维管束病原真菌,其引起的黄萎病是威胁我国棉花生产的头号病害。近年来,随着棉花种植结构调整,新疆已成为我国第一大主产棉区,2019年,新疆种植面积占全国76.1%。其中,新疆生产建设兵团（以下简称新疆兵团）的植棉面积为87.94万公顷,占新疆棉花总面积的34.62%,产量占42.33%。然而,新疆棉区尤其是兵团植棉垦区机械化、常年连作、秸秆还田等特有的栽培模式,加上种子调运频繁,导致土壤病原物、特别是大丽轮枝菌大量积累,各种菌系叠加混合,为大丽轮枝菌优势种群传播和种群变异提供了条件,造成近年来新疆兵团棉花黄萎病频繁爆发且为害日趋严重。因此,为明确新疆兵团棉花大丽轮枝菌的种群遗传结构及分布特征,本论文于2016-2017年围绕新疆兵团主要棉花种植团场采集了棉花黄萎病病样并进行大丽轮枝菌分离,通过基因型鉴定及群体遗传结构分析,取得以下主要研究结论:1.2016–2017年从9个师共40个团分离大丽轮枝菌1877株,其中2017年1345株（占分离菌株总数71.66%）,北疆1158株（占分离菌株总数61.69%）;培养表型鉴定发现分离的菌株中菌核型（易沉积黑色素）最多,共1131株（占60.25%）,其次是菌丝型,共570株（占30.37%）,其余176株为中间型;结合分离菌株年际和地理分布信息比较分析发现,年度间及南北疆菌株的培养表型无显着差异。上述结果表明新疆棉花大丽轮枝菌以菌核型为主。2.基于落叶/非落叶型、生理型（小种）和配子型基因标记,系统开展了分离菌株的基因型鉴定。检测发现,分离的菌株含有落叶型标记菌株1094株（占58.28%）,非落叶型标记703株（占37.45%）,其余80株（占4.26%）既不含有落叶型也不含有非落叶型标记;比较2016-2017年度南北疆落叶型群体比例发现,北疆落叶型菌株比率分别为81.94%和75.03%、南疆落叶型菌株比率分别为31.76%和28.40%,表明北疆的落叶型菌株比例均显着高于南疆;进一步分析发现,年际间相同/近似采样点落叶型菌株比例呈上升趋势,2017年分离自三、六和八师的落叶型大丽轮枝菌较2016年均增加（>5%）。生理型（小种）检测发现新疆棉区大丽轮枝菌均为2号生理型（小种）;配子型分析表明分离的菌株均为MAT1-2,表明其不具有发生有性世代的种群结构基础。综上研究结果表明,落叶型大丽轮枝菌已成为新疆棉区、特别是北疆地区的优势种群并快速传播。3.针对分离的病原开展了全基因组重测序工作,鉴定出231,994个遗传变异,包括201,986个SNPs和30,008个Indels,其中35,433个为非同义突变SNPs,为构建大丽轮枝菌种群遗传变异图谱及基因正选择分析提供了重要的数据支撑。基于群体全基因组遗传变异首次构建了新疆兵团棉区大丽轮枝菌种群的系统发育树,发现新疆棉花大丽轮枝菌分化成截然不同的2个进化分支,2个极性群体且与落叶型和非落叶型直接关联且无明显的遗传变异交换,表明新疆兵团棉花大丽轮枝菌仍然以2个典型的无性系（落叶型和非落叶型）传播。遗传变异及其系统发育树分析还发现少部分菌株独立于2个进化分支之外,表明新疆兵团棉花大丽轮枝菌还存在新的无性系或者变异类型。综上所述,本论文通过新疆兵团垦区棉花黄萎病为害调查及病原大丽轮枝菌分离与鉴定,为黄萎病病原学研究提供了重要的数据与菌种资源;通过基因型鉴定及全基因组遗传变异分析发现,新疆兵团棉区目前仍以2个截然不同的无性系—落叶型和非落叶型群体流行传播,且落叶型大丽轮枝菌已成为优势种群并快速传播,这为新疆兵团棉花大丽轮枝菌种群结构变异与演化及黄萎病防控提供了重要的理论与数据支撑。
张园园[2]（2019）在《向日葵黄萎病菌的侵染过程、种子带菌及不同寄主间交互侵染的研究》文中研究说明向日葵黄萎病是由大丽轮枝孢菌（Verticillium dahliae Kleb.）引成的极具破坏性的土传性维管束病害,其发生严重地影响了向日葵的产量和质量。在本研究中,我们利用绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein,GFP）标记的大丽轮枝抱菌对向日葵黄萎病的侵染过程进行了系统地观察,证明了种皮是种子携带大丽轮枝孢菌的主要部位;建立了基于MNP-10培养基快速检测向日葵种子携带黄萎病菌的体系;并研究了向日葵种子携带的大丽轮枝孢菌的遗传变异;最后还对不同寄主来源的轮枝孢菌的交互致病性和遗传变异进行了研究。具体的研究结果如下:（1）利用农杆菌介导的遗传转化体系,获得120株带有GFP标记的大丽轮枝孢菌的阳性转化子。通过对阳性转化子的生长速率、产孢量、粗毒素分泌量和致病力与野生型菌株进行比较,筛选到阳性转化子VdBM9-6在生物学特性和致病力上与野生型菌株VdBM9均没有显着性差异。该转化子将作为后续研究向日葵黄萎病菌侵染过程的接种菌株。（2）利用带有GFP标记的大丽轮枝菌菌株VdBM9-6系统地研究了大丽轮枝孢菌对向日葵的侵染过程,结果表明,人工接种后分生孢子能够附着在须根的根冠,成熟区和伸长区,并萌发形成菌丝体;菌丝体能够沿着根的细胞间隙横向和纵向扩展或侵入相邻的表皮细胞,最终定殖在木质部导管中。随着时间的推移,在向日葵的地上部分如茎秆、叶柄、叶脉、花盘的苞叶、花萼、种子的种壳和种皮上均检测到了大丽轮枝孢菌的定殖。（3）利用人工接种收获的花盘以及大田自然发病植株上采集的花盘的种子为实验材料,确定了利用选择性培养基MNP-10能够快速而准确地鉴定向日葵是否携带大丽轮枝孢菌以及种子的带菌率。（4）利用MNP-10培养基对实验室留存的105份不同向日葵品种的种子带菌率进行了检测,结果表明,19份油葵品种中只有’KY2’和’KY3’两份材料携带有大丽轮枝孢菌,带菌率均为1%;其余17份油葵品种均不携带大丽轮枝孢菌。86份食葵品种中有43份材料携带大丽轮枝孢菌,带菌率介于1～5%。其中,’甘葵2号’种子的带菌率最高,为5%;’H16-22’和’H16-24’等17份材料种子的带菌率为1%,其余43份食葵材料的种子上没有检测到大丽轮枝孢菌。（5）对来源于向日葵种子的89株大丽轮枝孢菌的生理小种和交配型的鉴定结果表明,所有种子来源的大丽轮枝孢菌均为单一的生理小种类型,即2号小种,但是却存在两种交配型即MAT1-1-1和MAT1-2-1,是优势交配型,占供试菌株的69.66%。（6）对来源于向日葵、棉花、茄子、生菜和马铃薯5种不同寄主植物上的10株轮枝孢菌的生物学特性进行了比较研究,结果表明不同寄主来源的轮枝孢菌在菌落形态和生长速度上存在显着差异;生理小种和交配型的鉴定结果表明,除了来自生菜的大丽轮枝孢菌Ls16-1为1号生理小种外,其余8株不同寄主来源的大丽轮枝孢菌均为2号生理小种;所有供试的不同寄主来源的大丽轮枝孢菌的交配型均为单一交配型,MAT1-2-1型。交互侵染的结果表明不同寄主来源的轮枝孢菌对不同的寄主具有一定的交互致病性,但以在其分离寄主上表现出的致病力最强。
郭康迪[3]（2019）在《苦瓜枯萎病菌的分离鉴定、遗传多样性分析及其拮抗细菌的筛选》文中研究说明苦瓜枯萎病是苦瓜生产上的毁灭性病害,在我国大部分苦瓜种植区均有发生,严重阻碍了我国苦瓜产业的发展。本研究于2016～2018年从山东、河南、湖北、湖南、江西、广东、广西、福建和海南等9个省份采集苦瓜枯萎病样品,采用组织分离方法,分离纯化获得病原菌分离物,并进行了系统分类学鉴定、致病性测定、寄主专化性测定和品种抗性测定;在利用rDNA-ITS、EF-1α和β-tubulin三个基因序列进行多基因联合系统学分类研究的基础上,建立了基于URP-PCR多态性片段的苦瓜枯萎病菌特异性检测技术;运用ISSR-PCR技术对我国9个省的苦瓜枯萎病菌进行了遗传多样性分析:以苦瓜枯萎病菌为靶标筛选出对苦瓜枯萎病菌具有拮抗活性的生防细菌,并对其拮抗谱和室内防治效果进行了测定,采用形态学和分子生物学方法对目的菌株进行了分类鉴定。结果如下:1、从9个省份的苦瓜枯萎病样本中分离获得苦瓜枯萎病菌173株,包括山东分离物19株、河南分离物22株、湖北分离物20株、湖南分离物17株、江西分离物22株、广东分离物21株、广西分离物20株、福建分离物20株和海南分离物12株。不同来源的菌株间无致病力强弱的分化,菌株形态特征复杂多样,且与地理分布无相关性;苦瓜枯萎病菌强侵染苦瓜,弱侵染丝瓜和瓠瓜,不侵染甜瓜、西瓜和黄瓜。2、建立了苦瓜枯萎病菌的特异性检测技术。检测体系包括:特异性引物为FOMM-SPF/FOMM-5SR;PCR反应体系为25 μL,即2× Green Taq Master Mix 12.5 μL,10 μmol/L的上下游引物各1 μL,模板DNA 1 μL,灭菌去离子水补足至25 μL;特异性扩增片段大小294 bp。该检测技术对苦瓜枯萎病菌的检测特异性好、灵敏度高,可以从土壤和植物样品中快速、准确地检测出苦瓜枯萎病菌,无需病原菌的分离培养和致病性测定,对苦瓜枯萎病的早期诊断和预警及有效防控具有重要的指导意义。3、苦瓜枯萎病菌的遗传多样性分析结果表明,山东、河南、湖北、湖南、江西、广东、广西、福建和海南等9个省的苦瓜枯萎病菌遗传分化不明显。种群内各分离株的遗传变异占总变异量的73.45%,是我国苦瓜枯萎病菌遗传变异的主要来源。UPGMA聚类结果表明,在遗传相似系数为0.9620时,9个省的菌株可分为类群Ⅰ和类群Ⅱ,类群Ⅰ包括山东和河南两个种群,类群Ⅱ包括广东、海南、福建、江西、海南、广西和湖北等7个种群,从地理群体分布上看表现为明显的南北分布特点:在遗传相似系数为0.9676时,类群Ⅱ被分为3个亚类,其中,广东、海南、福建、江西和湖北为同一亚类,湖南和广西分别为单独的亚类,表明我国苦瓜枯萎病菌各自然种群间的亲缘关系与其地理来源存在一定的相关性。4、筛选到一株对苦瓜枯萎病效果明显的拮抗细菌LWC6,形态学和16S rRNA基因序列分析结果鉴定为绿针假单孢菌（Pseudomonas chlororaphis）。
蔡梦杭[4]（2019）在《新疆主要棉区棉花黄萎病菌培养特性及致病力分化研究》文中研究指明新疆是我国最大的植棉区,近5年棉花黄萎病发展更为迅速,出现了爆发式的发展态势,严重威胁到新疆棉花产业的发展,亟需明确黄萎病菌（Verticillium dahliae）落叶型和非落叶型菌系在棉田的发生与分布、病原物的培养性状及致病力分化,因此本研究在新疆不同棉区采集棉花黄萎病病菌,进行了落叶型、非落叶型以及交配型、生理小种的鉴定,分析了不同致病类型的分布情况、选取代表菌株对其培养性状及对棉花的致病力进行了比较,主要结果如下:1.从新疆不同植棉区采集棉花黄萎病病株852株,利用大丽轮枝菌特异引物VDS-F/VDS-R进行PCR鉴定,结果表明852个病株中分离的菌株都是大丽轮枝菌。利用落叶型菌系特异性引物D1/D2、非落叶型菌系特异性引物ND1/ND2对所有分离的菌株进行致病型鉴定,结果表明65.3%的菌株为落叶型菌系,27.7%为非落叶型菌系,7.0%菌株不能归类,表明供试菌株的致病类型存在分化,其中以落叶型菌系为主要致病类型。根据落叶型和非落叶型菌株在单个条田中所占的比例对田间地块进行分析,结果表明单一落叶型菌株发生的地块最多,其次是落叶型和非落叶型菌株混合发生地块,田间以落叶型菌株为优势菌株的地块占67.9%,表明落叶型菌系为田间地块的主要致病类型。2.对140个棉花大丽。轮枝菌代表菌株进行生理。小种、交配型鉴定,结果显示,所有菌株均为2号生理。小种,交配。型均为MAT1-2型。菌株分离初期,对400个菌株的培养表型进行统计,菌核型菌株占比79.2%,中间型占比17.2%,菌丝型仅占3.6%。同时发现来自同一单孢的菌株,其菌落存在表现型变异现象。对23个代表性菌株的培养性状进行进一步测定,结果表明,23个代表性菌株形成菌核型、菌丝型和中间型3种菌落类型,菌核型为主要的培养类型,并进一步分化形成3种不同的类型。3.对棉花感病品种的致病力进行测定,结果显示,落叶型菌株引起的病指普遍高于非落叶型菌株引起的病指,非落叶型菌株中也有病指很高的菌株。同一地区的不同菌株的致病力存在明显差异,表明新疆棉花黄萎病菌的致病力存在明显分化。以上结果表明,新疆棉田采集的棉花黄萎病菌,其致病类型、培养特性及致病力均存在明显分化。
艾海提·艾合买提[5]（2018）在《海岛棉抗枯萎病基因GbLEA3、GbPR10和GbMPK16的克隆与功能鉴定》文中研究表明海岛棉具有纤维长度、比强度、细度等优势,在农业生产、国民经济中具有很重要的地位。然而棉花枯萎病的蔓延严重地影响着海岛棉产量和品质,给农民的经济水平带来了负面的影响。在分子水平上研究抗枯萎病基因的功能验证,为抗病分子育种提供功能明确的候选基因,是培育海岛棉抗枯萎病新品种和减少枯萎病危害的有效方法之一。本研究通过前期转录组测序和抗病表达谱数据,克隆了Gb LEA3、Gb PR10、Gb MPK16基因序列,并进行了生物信息学分析;利用枯萎病菌和乙烯、水杨酸诱导抗性不同的海岛棉品种,对克隆的抗病基因进行定量RT-PCR（q RT-PCR）表达分析;通过VIGS技术进行基因功能验证。取得的研究结果如下:1.根据前期转录组测序和抗病表达数据,从接种枯萎病菌的抗病海岛棉材料“06-146”中分别克隆了海岛棉同源基因序列,分别命名为Gb LEA3、Gb PR10、Gb MPK16,ORF序列长度分别为318bp、480 bp、1665 bp,氨基酸序列长度分别为105个、159个、554个,分别属于LEA-3、PR10、D组MAPK基因家族,相应的蛋白都属于亲水性蛋白,它们分布于线粒体、细胞质和细胞核中。结构域分析表明,Gb LEA3蛋白具有不同于LEA-3蛋白家族典型保守结构域,Gb PR10蛋白具有致病相关的Bet-v1功能区和核酸酶活性有关的甘氨酸环P-Loop（GXGGXG）,Gb MPK16蛋白具有蛋白激酶（Protein-Kinase-Dom）结构域。生物信息学分析结果表明,Gb PR10、Gb MPK16这两个基因与植物抗病相关。2.枯萎病诱导的q RT-PCR表达分析表明,Gb MPK16基因在海岛棉抗病品种中,各个组织的表达量都高于感病品种,Gb LEA3和Gb PR10在不同品种的不同组织上的表达量不均匀,Gb PR10基因在抗病品种各组织的表达量较高于感病品种,说明枯萎病诱导Gb PR10和Gb MPK16基因的表达量明显上调。3.激素诱导的q RT-PCR表达分析表明,ET诱导后Gb LEA3基因在抗病品种4 h开始上调表达,而感病品种在各时期的表达量低于处理前的表达量;Gb PR10基因在抗病品种中出现先增后降趋势,而感病品种处理后期上调表达;Gb MPK16基因在抗、感病品种上逐渐上调表达。SA诱导后,Gb LEA3在抗病品种2 h、4 h逐渐上调表达,之后表达量快速下降,在感病品种上,除了4 h外,其它时期的表达量低于处理前的表达量;Gb PR10在抗病品种出现先上调后下调表达量趋势,而在感病品种上几乎没有表达;Gb MPK16基因在抗病品种2 h达到最高的表达量之后缓慢下降,而在感病品种表达量先增后降。结果表明,Gb LEA3、Gb PR10、Gb MPK16基因同一激素处理抗病品种的表达量明显高于感病品种。4.通过VIGS技术,对3个基因进行功能验证,并q RT-PCR鉴定发现,Gb LEA3、Gb PR10、Gb MPK16基因都沉默成功,Gb LEA3、Gb PR10基因的沉默率较高于Gb MPK16基因;枯萎病诱导15 d后的病情指数大小为Gb PR10:26.25>Gb MPK16:22.81>Gb LEA3:17.18>对照:15.93,说明对枯萎病抗性大小顺序为Gb PR10>Gb MPK16>Gb LEA3。推测Gb LEA3、Gb PR10、Gb MPK16基因都可能在抗枯萎病途径中发挥着重要作用。
萨吉达木·艾则孜[6]（2018）在《新疆北部棉花病害调查及抗性品种筛选》文中指出棉花是新疆的主要经济作物。近几年来,新疆棉花病害发生逐年加重,造成一些棉区严重减产或品质下降。本研究通过田间调查及分子检测方法对新疆北部棉区的棉花病害种类及其分布进行了分析;通过分子检测对4种病害病原菌的侵染动态进行了研究;并通过室内盆栽鉴定和小区试验,比较了新疆棉花主栽品种对立枯病和红腐病的单一抗性和兼抗特性。为因地制宜地选择抗病品种及针对性地开展病害防控提供依据。田间调查结果表明:新疆北部棉花主要病害有枯萎病、立枯病、黄萎病、红腐病、炭疽病和角斑病。其中,枯萎病和立枯病发生较为普遍;黄萎病发生次之;红腐病分布地较少,集中地发生在塔城地区;炭疽病和角斑病在调查区域内仅有零散分布。对各地病样的分子检测结果表明:在新疆北部棉区均有4种病害病原菌的分布。其中,尖孢镰孢霉分布最为普遍;立枯丝核菌次之;大丽轮枝菌只在近半数的采样区域有分布;拟轮枝镰孢霉分布不广,有明显的区域性,仅个别采样区域有较高频的分布。对4种病害病原菌侵染动态监测结果表明:立枯丝核菌和拟轮枝镰孢霉对棉株的早期侵染率较高,在子叶期就有了较高的侵染,从子叶期到蕾铃期侵染株率逐渐减少,呈持续下降趋势,且立枯丝核菌侵染率一般高于拟轮枝镰孢霉;而尖孢镰刀菌和大丽轮枝菌虽然在子叶期也有侵染,但侵染株占比较低,从子叶期到蕾铃期侵染株率逐渐增加,呈持续上升趋势,且尖孢镰孢霉侵染株率一般高于大丽轮枝菌;在六叶期前立枯丝核菌和拟轮枝镰孢霉的侵染株率高于尖孢镰刀菌和大丽轮枝菌,而六叶期后尖孢镰孢霉和大丽轮枝菌的侵染株率高于立枯丝核菌和拟轮枝镰孢霉。基于分子检测的4病原菌的混合侵染情况分析表明:4种病原菌中两种或多种病原菌混合侵染单一棉株的情况非常普遍;其中,2种病原菌混合侵染的病株最多。品种抗性比较结果表明:大多数品种对立枯病和红腐病存在显着或极显着的抗性差异。供试品种中没有免疫（I）或高抗（HR）的品种,多数品种对2种病害表现为感病（S）或高感（HS）。仅有少数品种对红腐病或立枯病表现为抗病（R）或中抗（MR）。对红腐病抗性较好的品种有中棉72（R）、新陆早53（R）、中棉50（MR）等7个品种。对立枯病较好的品种有新陆早53（MR）、中棉72（MR）和中棉50（MR）等6个品种。对2种病害的兼抗性较好的品种有新陆早53（MR）、中棉72（MR）和中棉50（MR）等6个品种。此外棉花品种对2种病害的抗性存在一定程度的关联,对立枯病抗性较好的品种多数兼具对红腐病的抗性。
朱琳[7]（2018）在《绿豆枯萎病病原菌小种鉴定及抗源筛选》文中进行了进一步梳理绿豆是我国的主要食用豆类作物之一。由尖镰孢菌引起的绿豆枯萎病是一种为害性极大的土传病害,严重制约着绿豆的生产。本文以绿豆枯萎病为研究对象,获得了以下结果:1.建立了绿豆枯萎病抗性评价方法。对影响苗期抗病性鉴定结果的因素进行优化,结果表明,苗期抗病性鉴定最有效的接种方法为剪根浸根法,最适宜接种体浓度为106孢子/mL,接种最佳植株生育期为2叶期,接种体浸根最短时间为2 min,最适宜发病温度为2530℃,接种后调查病情最短时间为14 d。该方法能准确有效评价绿豆对枯萎病的抗性水平,适用于对绿豆枯萎病的抗源筛选以及品种的抗性鉴定。2.发现绿豆枯萎病菌存在致病性分化,建立了一套鉴别寄主。首先在苗期用分离物F08对105个绿豆品种进行抗性鉴定,从中选择8个抗病品种和3个感病品种与25个分离物进行互作研究,发现3个感病品种对25个分离物均表现为感病,8个抗病品种分别抗720分离物,对25个分离物共产生6个抗性反应型。结果表明,尖镰孢枯萎病菌和绿豆的互作符合“基因对基因”关系。最终,根据遗传背景不同选择6个品种作为绿豆枯萎病菌鉴别寄主。3.发现了12个绿豆尖镰孢枯萎病菌小种。用6个鉴别寄主对84个不同来源的分离物进行小种鉴定。结果表明,84个分离物被鉴定为12个小种。其中,3号小种出现频率最高为22.7%,分布于吉林、内蒙古、陕西、山西和河南绿豆产区,为我国绿豆枯萎病菌的优势小种。5号和11号小种致病性最强,毒力型分别为RSSSSS和SSRSSS;0号小种致病性最弱,对6个鉴别寄主均无致病性;另外,除5号小种仅分布在吉林外,其它小种均分布于不同省份（自治区）,表明绿豆枯萎病菌小种的分布与地理来源无关。4.比较分析了分离物效应子SIX6和SIX11基因序列及其特异性,初步探究了效应子基因与绿豆枯萎病菌致病性的关系。结果表明,在绿豆枯萎病菌所有分离物中均检测到SIX6和SIX11基因,而在无致病性分离物中没有检测到目的条带,表明SIX6和SIX11基因可能与绿豆枯萎病菌的致病性相关。序列分析表明,SIX6和SIX11都不能有效的将绿豆枯萎病菌12个小种区分开,表明这两个基因不能作为区分该病原菌小种的分子标记。5.筛选出一批绿豆抗枯萎病品种,鉴定选择出大量抗病品系。对433份绿豆资源进行抗性鉴定,筛选出抗病资源46份,占10.6%;对19绿豆品种的544个株系进行抗性鉴定,在14品种中筛选54个纯合抗病株系,为下一步抗病遗传以及基因定位工作打下较好基础。
郭庆港,王培培,鹿秀云,董丽红,赵卫松,张晓云,李社增,马平[8]（2018）在《棉花枯萎病菌新生理型菌株的分子鉴定》文中研究指明Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum（Fov）已报道有8个生理小种和一个澳大利亚生理型,在我国只报道有3、7、8号小种。前期研究发现,我国还有一个与3、7、8号小种具有较大遗传差异的Fov新生理型。本研究通过对3、7、8号小种和新生理型菌株的翻译延伸因子（EF-1α）基因序列比对分析,发现该新生理型菌株具有特异性碱基序列。根据这些特异性碱基序列,设计了一对针对新生理型菌株的特异性引物,并证明该引物可以特异性检测Fov新生理型菌株。利用该引物对采自河北省主要植棉区的77株Fov菌株进行筛选,鉴定出2株潜在的新生理型菌株。从这2个Fov菌株中克隆出EF-1α和β-tubulin基因序列,通过构建系统发育树,证明这2个Fov菌株为新生理型菌株,而且与澳大利亚生理型菌株具有较近的亲缘关系。本研究建立的分子检测方法可用于棉花枯萎病菌新生理型菌株的鉴定。
黄启秀[9]（2017）在《海岛棉类黄酮代谢途径中与枯萎病抗性相关基因的克隆及功能验证》文中研究指明枯萎病是危害海岛棉生产的重要因素之一,研究枯萎病抗性分子机制将为培育抗病海岛棉品种、解决枯萎病对海岛棉的危害问题提供坚实的基础。本文选取抗病和感病亲本及抗病株系、感病株系共6份材料进行转录组测序与差异表达基因分析（DEG,Differentially Expressed Gene）分析;利用实时荧光定量（qRT-PCR）方法对富集到的类黄酮代谢通路相关基因以抗病材料（06-146、埃棉2号、DJ-07-136、5917）和感病材料（新海14、海92-3、埃及棉424）进行表达分析。对类黄酮代谢通路相关基因进行克隆及生物信息学分析,并利用病毒介导的基因沉默的方法验证基因的功能,具体结果如下:1.海岛棉枯萎病转录组测序与DEG分析结果表明:抗病材料中类黄酮代谢通路相关基因的表达量显着高于感病材料,且接菌后基因的表达量均高于接菌前。2.qRT-PCR对类黄酮代谢通路8个关键基因ANR、CHI、LDOX、CHS、DFR、TT7以及C4H和FLS的表达特性进行分析,发现在接菌后40 h,这8个基因在抗病材料中的表达量均显着高于感病材料的。除4 h以外的时期,CHI基因在抗病材料中的表达量均显着高于感病材料。DFR基因在接菌后各个时期抗病材料的表达量均显着或极显着高于感病材料。TT7基因的表达量在感病材料中无明显变化,在抗病材料中后期表达量明显上调。3.将抗感材料间有显着差异的基因表达量与病情指数进行相关分析,结果表明:在接菌后40 h TT7和FLS基因的表达量与病情指数呈极显着负相关,CHI和DFR基因的表达量与病情指数呈显着负相关。接菌后28 h,CHI与LDOX基因的表达量与病情指数呈显着负相关。接菌后10 h,DFR基因与病情指数呈显着负相关。4.对类黄酮代谢通路中相关的基因:GbCHI、GbDFR、GbTT7进行克隆及生物信息学分析。得到如下结果:除GbTT7外,GbCHI和GbDFR为酸性蛋白。除GbCHI外,GbTT7、GbDFR稳定蛋白。GbCHI、GbDFR和GbTT7均为亲水蛋白。GbDFR,GbTT7在N端存在两个和一个跨膜区。GbCHI属于查尔酮合酶家族。GbTT7属于细胞色素P450蛋白酶家族,GbDFR属于SDR家族,与水稻亲缘关系较近,与亚洲棉、雷蒙德氏棉和陆地棉亲缘关系较远,推测这两个基因可能与海岛棉枯萎病抗性有关。5.将病毒介导的基因沉默技术成功应用与海岛棉中,阳性对照TRV-CLA于注射后12-13 d出现白化表型,不同真叶叶片白化程度为第一片白化程度最严重,老叶白化程度依次减弱。对沉默成功的VIGS-GbDFR、VIGS-GbCHI以及对照进行接菌处理,并统计病情指数,结果表明:VIGS-GbCHI和VIGS-GbDFR与对照相比,发病较严重。VIGSGbCHI的发病情况较VIGS-GbDFR更为严重。推测GbCHI和GbDFR在海岛棉抗枯萎病过程中起到重要作用。
舒灿伟,张源明,曾蕊,周而勋[10]（2017）在《香蕉枯萎病菌4个生理小种生化特征的比较》文中研究指明为研究香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporumf.sp.cubense）生理小种之间的差异,对该菌的细胞壁降解酶、酯酶同工酶和可溶性蛋白进行测定和分析,结果表明:在4个生理小种中均能检测到4种细胞壁降解酶（PG、PMG、Cx和FPA）。其中4号生理小种的PMG和Cx酶活性最高,且国外的1号和4号生理小种菌株的Cx酶活性比国内同种生理小种菌株的高;国内1号生理小种的FPA酶活性最低,其他小种的酶活性差异不显着;同一生理小种国内外菌株的PG酶活性差异不显着;4个生理小种的酯酶同工酶和可溶性蛋白电泳图谱差异较大,聚类分析表明致病力相近的菌株聚在同一分枝上,亲缘关系较近。
二、新疆棉花枯萎病菌生理小种的初步研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、新疆棉花枯萎病菌生理小种的初步研究（论文提纲范文）
（1）新疆兵团垦区棉花大丽轮枝菌群体遗传多样性初步分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩写表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 棉花黄萎病危害现状 |
| 1.1.1 棉花黄萎病病原 |
| 1.1.2 棉花黄萎病病征及发病特点 |
| 1.2 大丽轮枝菌致病机理研究进展 |
| 1.3 大丽轮枝菌种群遗传结构研究 |
| 1.3.1 致病型 |
| 1.3.2 培养表型 |
| 1.3.3 生理小种 |
| 1.3.4 营养亲和群 |
| 1.3.5 遗传谱系 |
| 1.3.6 配子型 |
| 1.3.7 生理型 |
| 1.4 病原真菌种群结构研究方法 |
| 1.4.1 营养亲和性技术 |
| 1.4.2 分子标记技术 |
| 1.4.3 基因组学技术 |
| 1.5 新疆棉花黄萎病主要研究进展 |
| 1.5.1 新疆棉花黄萎病危害现状 |
| 1.5.2 新疆棉花黄萎病主要研究现状 |
| 1.6 本研究的目的意义 |
| 第二章 新疆兵团棉花黄萎病病原菌的分离与鉴定 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 实验材料及主要仪器 |
| 2.1.2 新疆棉花黄萎病病样采集 |
| 2.1.3 棉花黄萎病的分离与纯化 |
| 2.1.4 大丽轮枝菌形态学鉴定 |
| 2.1.5 大丽轮枝菌分子鉴定 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 大丽轮枝菌形态学鉴定结果 |
| 2.2.2 大丽轮枝菌分子生物学鉴定结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 新疆兵团棉花大丽轮枝菌的培养表型鉴定与分析 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 实验材料及主要仪器 |
| 3.1.2 大丽轮枝菌的菌落培养 |
| 3.1.3 大丽轮枝菌的培养表型观察 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 大丽轮枝菌培养表型的鉴定与统计 |
| 3.2.2 培养表型变异 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 新疆兵团棉花大丽轮枝菌的基因型鉴定与分析 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 实验材料及主要仪器 |
| 4.1.2 大丽轮枝菌DNA的提取 |
| 4.1.3 大丽轮枝菌基因型鉴定引物 |
| 4.1.4 大丽轮枝菌的基因型鉴定 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 基于致病型分子标记落叶型(D)/非落叶型(ND)分析 |
| 4.2.2 基于寄主专化型分子标记1 号生理小种(R1)/2 号生理小种(R2)分析 |
| 4.2.3 基于有性生殖交配型分子标记Mating1-1-1/Mating1-2-1 分析 |
| 4.2.4 新疆兵团棉花大丽轮枝菌基因型鉴定结果及演化分析 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 新疆兵团棉花大丽轮枝菌群体遗传结构的初步鉴定 |
| 5.1 材料和方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 大丽轮枝菌群体全基因组重测序及数据质量分析 |
| 5.2.2 大丽轮枝菌群体全基因组遗传变异(SNPs和 Indels)分析 |
| 5.2.3 基于新疆兵团大丽轮枝菌SNPs的系统发育树构建 |
| 5.3 讨论 |
| 第六章 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 附件 |
（2）向日葵黄萎病菌的侵染过程、种子带菌及不同寄主间交互侵染的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 向日葵及向日葵病害 |
| 1.1.1 国内外向日葵种植情况 |
| 1.1.2 向日葵病害 |
| 1.2 向日葵黄萎病 |
| 1.2.1 向日葵黄萎病的危害 |
| 1.2.2 向日葵黄萎病的症状 |
| 1.2.3 向日葵黄萎病病原菌的形态特征 |
| 1.3 大丽轮枝孢菌的寄主专化性 |
| 1.3.1 大丽轮枝孢菌的生理小种 |
| 1.3.2 大丽轮枝孢菌的交配型 |
| 1.4 大丽轮枝孢菌的生活史、侵染过程以及种子带菌 |
| 1.4.1 大丽轮枝孢菌的生活史 |
| 1.4.2 大丽轮枝孢菌的侵染过程 |
| 1.4.3 大丽轮枝孢菌的种子带菌研究 |
| 1.5 农杆菌介导的遗传转化( ATMT)及其在植物和病菌互作研究中的应用 |
| 1.5.1 ATMT的发展过程 |
| 1.5.2 ATMT在植物和病菌互作研究中的应用 |
| 1.6 大丽轮枝孢菌的快速检测体系 |
| 1.7 向日葵黄萎病的防治措施 |
| 1.8 研究目的与意义 |
| 1.9 技术路线 |
| 2 向日葵黄萎病菌侵染过程的观察 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 供试材料 |
| 2.1.2 试剂和抗生素 |
| 2.1.3 供试培养基 |
| 2.1.4 仪器设备和耗材 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 向日葵大丽轮枝孢菌的遗传转化 |
| 2.2.2 阳性转化子生物学特性的研究 |
| 2.2.3 利用GFP标记的大丽轮枝孢菌研究其侵染向日葵的过程 |
| 2.3 数据分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 GFP标记大丽轮枝孢菌株的获得 |
| 2.4.2 GFP标记的大丽轮枝孢菌(VdBM9-6)对向日葵侵染过程的观察 |
| 2.5 讨论 |
| 3 向日葵种子携带黄萎病菌快速检测体系的建立 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 供试材料 |
| 3.1.2 试剂和抗生素 |
| 3.1.3 供试培养基 |
| 3.1.4 仪器设备和耗材 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 向日葵花盘各组织的带菌情况 |
| 3.2.2 田间病株种子的带菌情况 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 大丽轮枝孢菌在向日葵花盘上的定殖 |
| 3.3.2 黄萎病菌在田间向日葵种子上的定殖 |
| 3.4 讨论 |
| 4 向日葵种子携带黄萎病菌的检测 |
| 4.1 不同向日葵品种种子携带黄萎病菌的比例检测 |
| 4.1.1 供试材料 |
| 4.1.2 试剂和抗生素 |
| 4.1.3 供试培养基 |
| 4.1.4 仪器设备和耗材 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 不同向日葵品种种子携带黄萎病菌的比例检测 |
| 4.2.2 向日葵种子携带大丽轮枝孢菌的分离与单孢纯化 |
| 4.2.3 向日葵种子携带大丽轮枝孢菌的形态学鉴定 |
| 4.2.4 向日葵种子携带大丽轮枝孢菌的分子生物学鉴定 |
| 4.2.5 向日葵种子携带大丽轮枝孢菌的生理小种鉴定 |
| 4.2.6 向日葵种子携带大丽轮枝孢菌的交配型鉴定 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 不同向日葵品种种子携带大丽轮枝孢菌带菌率的检测 |
| 4.3.2 向日葵种子携带大丽轮枝孢菌的分离鉴定 |
| 4.3.3 向日葵种子携带大丽轮枝孢菌的生理小种鉴定 |
| 4.3.4 向日葵种子携带大丽轮枝孢菌的交配型鉴定 |
| 4.4 讨论 |
| 5 不同寄主来源轮枝孢菌的交互致病性 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 供试菌株和寄主材料 |
| 5.1.2 试剂和培养基 |
| 5.1.3 仪器设备和耗材 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 不同寄主来源的轮枝孢菌菌落形态和生长速度的测定 |
| 5.2.2 不同寄主来源的轮枝孢菌生理小种的鉴定 |
| 5.2.3 不同寄主来源的轮枝孢菌交配型的鉴定 |
| 5.2.4 不同寄主来源的轮枝孢菌致病力测定 |
| 5.2.5 数据分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 不同寄主来源轮枝孢菌菌落形态的比较 |
| 5.3.2 不同寄主来源轮枝孢菌菌落生长速度的比较 |
| 5.3.3 不同寄主来源轮枝孢菌生理小种的鉴定 |
| 5.3.4 不同寄主来源轮枝孢菌交配型的鉴定 |
| 5.3.5 不同寄主来源轮枝孢菌致病力的测定 |
| 5.4 讨论 |
| 6 全文结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介 |
（3）苦瓜枯萎病菌的分离鉴定、遗传多样性分析及其拮抗细菌的筛选（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 概述 |
| 1.2 苦瓜枯萎病的研究现状 |
| 1.2.1 症状及危害 |
| 1.2.2 病原及其生物学特性 |
| 1.2.3 病害循环及影响因子 |
| 1.2.4 苦瓜枯萎病的防治 |
| 1.2.5 瓜类枯萎病菌的致病性分化及遗传多样性研究 |
| 1.3 瓜类枯萎病的生物防治研究进展 |
| 1.3.1 生防真菌及其应用 |
| 1.3.2 生防细菌及其应用 |
| 1.3.3 生防放线菌及其应用 |
| 2 引言 |
| 3 材料与方法 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 供试植物 |
| 3.1.2 供试病原菌 |
| 3.1.3 培养基 |
| 3.1.4 PCR引物 |
| 3.1.5 主要试验仪器 |
| 3.1.6 试剂 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 苦瓜枯萎病菌的分离纯化 |
| 3.2.2 苦瓜枯萎病菌的形态学鉴定 |
| 3.2.3 苦瓜枯萎病菌的的致病性和寄主转化性检测 |
| 3.2.4 不同苦瓜品种的抗病性鉴定 |
| 3.2.5 苦瓜枯萎病菌的分子系统学研究 |
| 3.2.6 苦瓜枯萎病菌特异性检测技术的建立 |
| 3.2.7 苦瓜枯萎病菌的遗传多样性分析方法 |
| 3.2.8 生防细菌的筛选 |
| 3.2.9 生防细菌的鉴定 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 苦瓜枯萎病菌的分离纯化及其形态学特征 |
| 4.1.1 分离纯化 |
| 4.1.2 形态学特征 |
| 4.2 苦瓜枯萎病菌的致病性测定及苦瓜品种抗病性测定结果 |
| 4.2.1 盆栽接种方法的选择 |
| 4.2.2 致病性测定结果 |
| 4.2.3 寄主专化型测定结果 |
| 4.2.4 品种抗性测定结果 |
| 4.3 苦瓜枯萎病菌的系统分类学研究结果 |
| 4.3.1 基于rDNA-ITS基因序列的系统学研究结果 |
| 4.3.2 基于EF-1α基因序列的系统学研究结果 |
| 4.3.3 基于β-tubulin基因序列的系统学研究结果 |
| 4.3.4 三个基因联合序列分析结果 |
| 4.4 苦瓜枯萎病菌特异性检测体系的建立 |
| 4.4.1 URP-PCR特异性片段的筛选及PCR扩增体系建立 |
| 4.4.2 灵敏度和人工接种的植物组织检测结果 |
| 4.4.3 田间土壤和田间罹病苦瓜植株的检测验证 |
| 4.4.4 病原菌分离株的特异性检测验证 |
| 4.5 苦瓜枯萎病菌的遗传多样性分析结果 |
| 4.5.1 引物筛选结果 |
| 4.5.2 最佳退火温度筛选结果 |
| 4.5.3 优化的ISSR-PCR扩增结果 |
| 4.5.4 遗传多样性分化结果 |
| 4.5.5 聚类分析结果 |
| 4.6 生防细菌的筛选与鉴定结果 |
| 4.6.1 生防细菌的筛选 |
| 4.6.2 室内拮抗活性测定测定结果 |
| 4.6.3 生防菌株LWC6的盆栽防治效果 |
| 4.6.4 生防细菌LWC6的形态学鉴定 |
| 4.6.5 生防细菌LWC6的生理生化鉴定 |
| 4.6.6 生防细菌LWC6的16S rRNA基因序列分析 |
| 5 结论与讨论 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 讨论 |
| 5.2.1 关于苦瓜枯萎病菌致病性和寄主专化性分化的研究 |
| 5.2.2 关于苦瓜枯萎病菌特异性检测技术的建立 |
| 5.2.3 关于苦瓜枯萎病菌的遗传多样性研究 |
| 5.2.4 关于苦瓜枯萎病的生物防治研究 |
| 参考文献 |
| ABSTRACT |
| 附表 |
（4）新疆主要棉区棉花黄萎病菌培养特性及致病力分化研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 棉花黄萎病的发生与分布 |
| 1.2 轮枝菌属的分类 |
| 1.2.1 轮枝菌属的分类 |
| 1.2.2 大丽轮枝菌的分类 |
| 1.3 大丽轮枝菌的遗传与变异 |
| 1.3.1 大丽轮枝菌的致病类型 |
| 1.3.2 大丽轮枝菌的生理小种 |
| 1.3.3 大丽轮枝菌的交配型 |
| 1.3.4 大丽轮枝菌的培养特性变异 |
| 1.3.5 大丽轮枝菌的生理型变异 |
| 1.4 本研究的目的与意义 |
| 第二章 新疆主要棉区棉花黄萎病的分子鉴定及田间地块不同致病型菌株的分布 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 供试菌株的采集 |
| 2.1.2 培养基的配制 |
| 2.1.3 棉花黄萎病菌的分离、培养和纯化 |
| 2.1.4 棉花黄萎病基因组DNA的提取及特异性引物的选择 |
| 2.1.5 大丽轮枝菌及落叶型和非落叶型致病型特异性引物的选择 |
| 2.1.6 田间条田类型的划分 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 新疆棉花黄萎病菌的种类鉴定 |
| 2.2.2 新疆棉花黄萎病菌致病型分子检测结果 |
| 2.2.3 新疆棉花黄萎病不同致病型菌株的分布 |
| 2.3 结论与讨论 |
| 第三章 新疆主要棉区棉花黄萎病菌生理小种、交配型的鉴定及菌落培养特性的研究 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 供试菌株 |
| 3.1.2 培养基的配备 |
| 3.1.3 棉花黄萎病基因组DNA的提取及特异性引物的选择 |
| 3.1.4 棉花黄萎病菌的培养特性测定 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 棉花黄萎病菌生理小种的分子检测结果 |
| 3.2.2 棉花黄萎病菌交配型的分子检测结果 |
| 3.2.3 新疆棉区棉花黄萎病菌培养表型的初步统计 |
| 3.2.4 棉花黄萎病菌代表性菌株菌落培养性状的观察 |
| 3.2.5 棉花黄萎病菌代表性菌株菌落平均生长速度的测定 |
| 3.2.6 棉花黄萎病菌菌落培养性状的变异 |
| 3.3 结论与讨论 |
| 第四章 新疆主要棉区棉花黄萎病菌的致病力分化研究 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 供试病菌及植物材料 |
| 4.1.2 温室苗期棉花的培育及黄萎病菌株的接种 |
| 4.1.3 棉花黄萎病菌的致病性测定 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 棉苗浸根接种时间的确定 |
| 4.2.2 棉苗浸根接种浓度的确定 |
| 4.2.3 棉花黄萎病菌代表性菌株的棉花苗期致病力测定 |
| 4.3 结论与讨论 |
| 第五章 全文小结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 附件 |
（5）海岛棉抗枯萎病基因GbLEA3、GbPR10和GbMPK16的克隆与功能鉴定（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstracts |
| 第1章 引言 |
| 1.1 植物抗病机制 |
| 1.2 棉花枯萎病研究进展 |
| 1.3 转录组测序(RNA-Seq)在抗病基因挖掘中的应用 |
| 1.4 病毒诱导的基因沉默(VIGS)研究进展 |
| 1.5 LEAs蛋白研究进展 |
| 1.6 PRs蛋白研究进展 |
| 1.7 MAPKs蛋白研究进展 |
| 1.8 本研究的目的和意义 |
| 第2章 海岛棉抗枯萎病相关基因的克隆及生物信息学分析 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 结论 |
| 第3章 海岛棉抗枯萎病基因表达分析 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 结论 |
| 第4章 海岛棉抗枯萎病基因VIGS功能分析 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 结论 |
| 第5章 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（6）新疆北部棉花病害调查及抗性品种筛选（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 立题背景 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 1.3 本研究目的意义 |
| 1.4 技术路线 |
| 第2章 棉花主要病害种类及在新疆北部的分布调查 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.3 小结与讨论 |
| 第3章 新疆棉花4种病害病原菌的侵染动态 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.3 小结与讨论 |
| 第4章 新疆棉花主栽品种对2种苗期病害的抗性分析 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.3 小结与讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 Ⅰ 新疆北部各地棉田土壤信息 |
| 附录 Ⅱ 4种病原菌的部分电泳图 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（7）绿豆枯萎病病原菌小种鉴定及抗源筛选（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略表 |
| 第一章 引言 |
| 1.1 绿豆枯萎病概况 |
| 1.1.1 发生与危害 |
| 1.1.2 绿豆枯萎病的危害症状 |
| 1.2 尖镰孢枯萎病病原菌 |
| 1.2.1 学名及分类地位 |
| 1.2.2 形态及生物学特征 |
| 1.2.3 尖镰孢菌致病因子SIX基因研究进展 |
| 1.2.4 尖镰孢菌生理小种研究 |
| 1.2.5 尖镰孢菌生理小种鉴定方法 |
| 1.3 尖镰孢枯萎病的发病规律 |
| 1.4 尖镰孢枯萎病的防治 |
| 1.5 尖镰孢枯萎病的抗性评价 |
| 1.5.1 抗性鉴定方法 |
| 1.5.2 病害严重度分级及抗性评价标准 |
| 1.6 本研究的目的意义 |
| 第二章 绿豆尖镰孢枯萎病抗性鉴定方法 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 接种体 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 植株培育及接种体制备 |
| 2.2.2 接种方法 |
| 2.2.3 植株生育期 |
| 2.2.4 接种浓度 |
| 2.2.5 接种体处理(浸根)时间 |
| 2.2.6 培养温度 |
| 2.2.7 病情调查时间 |
| 2.2.8 病情调查与评价 |
| 2.2.9 统计分析方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 不同接种方法的结果比较 |
| 2.3.2 植株生育期对枯萎病表型的影响 |
| 2.3.3 接种体浓度对枯萎病表型的影响 |
| 2.3.4 接种体处理时间对枯萎病表型的影响 |
| 2.3.5 接种后培养温度对枯萎病表型的影响 |
| 2.3.6 最佳病情调查时间的选择 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 绿豆枯萎病菌鉴别寄主建立及生理小种鉴定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 病原菌及植物材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 抗性资源鉴定以及鉴别寄主候选品种筛选 |
| 3.2.2 候选鉴别品种×病原菌互作分析以及鉴别寄主构建 |
| 3.2.3 生理小种鉴定 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 鉴别寄主的选择 |
| 3.3.2 生理小种的鉴定 |
| 第四章 绿豆枯萎病菌生理小种致病基因SIX6和SIX11的检测 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.1.2.1 供试菌株的培养 |
| 4.1.2.2 分离物基因组DNA的提取 |
| 4.1.2.3 PCR扩增 |
| 4.1.2.4 PCR扩增产物的检测 |
| 4.1.2.5 系统发育分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 SIX6和SIX11基因检测 |
| 4.2.2 SIX6基因的序列分析及系统发育树的构建 |
| 4.2.3 SIX11基因的序列分析及系统发育树的构建 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 绿豆枯萎病抗性资源筛选 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 植物材料及接种体 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.2 株系筛选流程 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.4 讨论 |
| 第六章 全文结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（8）棉花枯萎病菌新生理型菌株的分子鉴定（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 棉花枯萎病菌供试菌株 |
| 1.2 棉花枯萎病菌基因组DNA的提取 |
| 1.3 棉花枯萎病菌新生理型菌株特异性引物的设计及验证 |
| 1.4 棉花枯萎病菌新生理型小种的筛选 |
| 1.5 棉花枯萎病菌看家基因的序列分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 棉花枯萎病菌新生理型菌株特异性引物的设计及验证 |
| 2.2 棉花枯萎病菌新生理型菌株的检测 |
| 2.3 棉花枯萎病菌新生理型菌株的验证 |
| 3 讨论 |
（9）海岛棉类黄酮代谢途径中与枯萎病抗性相关基因的克隆及功能验证（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 棉花枯萎病研究进展 |
| 1.2 棉花抗枯萎病功能基因的研究 |
| 1.3 类黄酮化合物及相关基因的研究 |
| 1.4 病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)研究进展 |
| 1.5 本研究的目的与意义 |
| 第2章 类黄酮代谢通路相关基因与海岛棉抗枯萎病性的关系 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 海岛棉类黄酮相关基因的克隆及生物信息学分析 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 海岛棉基因沉默体系的建立及沉默GbCHI,GbDFR对海岛棉枯萎病抗性的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第5章 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）香蕉枯萎病菌4个生理小种生化特征的比较（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 真菌菌株(小种)和试剂 |
| 1.2 细胞壁降解酶液的制备 |
| 1.3 细胞壁降解酶活性的测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 细胞壁降解酶的测定结果 |
| 2.2 酯酶同工酶的测定结果 |
| 2.3 可溶性蛋白的电泳结果 |
| 3 讨论 |
四、新疆棉花枯萎病菌生理小种的初步研究（论文参考文献）
- [1]新疆兵团垦区棉花大丽轮枝菌群体遗传多样性初步分析[D]. 纪晓彬. 石河子大学, 2020(08)
- [2]向日葵黄萎病菌的侵染过程、种子带菌及不同寄主间交互侵染的研究[D]. 张园园. 内蒙古农业大学, 2019(01)
- [3]苦瓜枯萎病菌的分离鉴定、遗传多样性分析及其拮抗细菌的筛选[D]. 郭康迪. 河南农业大学, 2019(04)
- [4]新疆主要棉区棉花黄萎病菌培养特性及致病力分化研究[D]. 蔡梦杭. 石河子大学, 2019(01)
- [5]海岛棉抗枯萎病基因GbLEA3、GbPR10和GbMPK16的克隆与功能鉴定[D]. 艾海提·艾合买提. 新疆农业大学, 2018(05)
- [6]新疆北部棉花病害调查及抗性品种筛选[D]. 萨吉达木·艾则孜. 新疆农业大学, 2018
- [7]绿豆枯萎病病原菌小种鉴定及抗源筛选[D]. 朱琳. 中国农业科学院, 2018(12)
- [8]棉花枯萎病菌新生理型菌株的分子鉴定[J]. 郭庆港,王培培,鹿秀云,董丽红,赵卫松,张晓云,李社增,马平. 植物病理学报, 2018(02)
- [9]海岛棉类黄酮代谢途径中与枯萎病抗性相关基因的克隆及功能验证[D]. 黄启秀. 新疆农业大学, 2017(02)
- [10]香蕉枯萎病菌4个生理小种生化特征的比较[J]. 舒灿伟,张源明,曾蕊,周而勋. 华中农业大学学报, 2017(03)