一、热损伤温度对新生SD大鼠下丘脑神经元膜上ATP激活单通道活动的影响（论文文献综述）
安帅[1]（2018）在《基于电压阈值测定法的外界因素对神经网络电兴奋性的影响及其相关分子机理研究》文中认为本论文的目的是介绍并验证神经网络电兴奋性定量测试的新方法——电压阈值测定法（Voltage Threshold Measurement Method,VTMM）:首先基于微电极阵列（Microelectrode arrays,MEA）生物传感器构建了PC12类神经元、大鼠海马神经元和大鼠海马区脑片三种类型的神经芯片,并在此基础上介绍并验证了新型电压阈值测定法,然后采用该方法研究了乙酰胆碱（ACh）、酒精（EtOH）和温度（T）三种不同因素作用下三种神经网络电兴奋性的变化规律。接着,本论文采用高内涵技术（High Content Screening,HCS）,对PC12类神经元网络和大鼠海马神经元网络中细胞在上述三种因素作用下神经网络中细胞的存活率、神经细胞突起长度和面积、ROS和Ca2+含量进行了研究,并分析了上述细胞分子生物学指标在三种影响因素作用下的变化规律。最后,本论文进一步对VTMM和高内涵细胞技术研究结果进行联合分析,研究了在三种外界因素作用下,PC12类神经元网络和大鼠海马神经元网络中细胞的细胞分子生物学指标与阈值电压(VTh)之间的相互关系,讨论了三种因素影响神经网络电兴奋性变化的相关分子机理。本论文主要实验结果如下:1)PC12类神经元网络、大鼠海马神经元网络和大鼠海马区脑切片的标准阈值电压(Normal VTh)分别为36、56和31 mV;2)三种神经网络的阈值电压均与乙酰胆碱浓度成反比关系;当培养液中乙酰胆碱浓度（单位:μg/mL）分别增至8（PC12）、6（海马神经元）和4（海马区脑切片）时,三种神经元网络的阈值电压都减小到0mV。在乙酰胆碱作用下,PC12类神经元网络和海马神经元网络的细胞存活率、突起长度、突起面积、ROS含量和Ca2+含量均未出现显着性变化;乙酰胆碱对神经网络电兴奋性影响的相关分子机理大致为:首先乙酰胆碱作用于接头或突触后膜上的胆碱能受体,激活了多种离子通道及腺苷酸环化酶系统,不仅改变了包括Ca2+在内多种离子的含量,影响了细胞膜电位等,也提高了“钠带”等的活性,最终使神经网络兴奋性上升,阈值电压下降。3)三种神经网络的阈值电压均与酒精浓度成指数率关系;当培养液中酒精浓度（单位:mmol/L）分别高于80（PC12）、110（海马神经元）和120（海马区脑切片）时,三种神经网络均不再具有电兴奋性。在酒精作用下,PC12类神经元网络和海马神经元网络中细胞的存活率没有显着性变化;两类神经元网络中细胞的突起长度和面积均呈极显着性下降、ROS和Ca2+含量均呈极显着性上升（海马神经元网络中细胞的ROS含量呈显着性上升）;酒精对神经网络电兴奋性影响的相关分子机理大致为:一方面直接导致突起长度和面积降低,使“钠带”活性受到抑制;另一方面促使Ca2+快速超载,导致突起长度和面积减少,同时Ca2+的快速超载也使ROS快速累积,进一步加重突起长度和面积的减少,并直接抑制“钠带”活性。最后使神经网络兴奋性受抑制,阈值电压上升。4)三种神经网络的阈值电压与培养基温度（单位:℃）的关系都呈现为“U”形曲线,即从37℃向下,都随培养基温度降低而升高,从37℃向上,随培养基温度升高而迅速降低,当培养基温度分别降低至33（PC12）、33（海马神经元）和32（海马区脑切片）℃时,或者分别增加至42（PC12）、43（海马神经元）和44（海马区脑切片）℃时,三种神经网络失去电兴奋性;相比较降低培养基温度,阈值电压受培养基温度升高的影响较小。在不同培养基温度作用下,两类神经网络中细胞的存活率均出现先升后降的趋势,但整体变化并不显着;从37℃开始升高培养基温度至42℃,两类神经网络中细胞的突起长度均呈显着性下降,突起面积均呈极显着性下降,ROS和Ca2+含量均呈极显着性增加;从37℃开始降低培养基温度至33℃,两类神经元网络中细胞的突起长度和面积均未发生显着性变化,而ROS和Ca2+含量均呈极显着性上升（PC12类神经元网络中细胞的ROS含量呈显着性上升）。温度对神经网络电兴奋性影响的相关分子机理大致为:（1）降低温度一方面降低了Ca2+的含量,直接抑制了神经兴奋性,同时造成了ROS含量的降低。最后,Ca2+和ROS含量的减少,共同造成了“钠带”等的活性下降,神经网络兴奋性受到抑制,阈值电压升高。（2）提高温度一方面造成Ca2+含量的上升,Ca2+含量的上升不仅直接干扰神经兴奋性,也加重ROS的积累;另一方面造成ROS含量的快速累积,干扰“钠带”等的活性,并加重Ca2+含量的上升;最终,高温物理效应的直接干扰及Ca2+和ROS的超载,共同造成了突起长度和面积的减少及“钠带”等的活性上升,神经网络兴奋性上升,阈值电压下降。本论文研究表明:1)电压阈值测定法（VTMM）是一种能定量测评神经网络电兴奋性的准确、简便而又高效的新方法,可以用于研究环境（温度等）、食物（酒精等）和药物（乙酰胆碱等）等不同因素对神经网络电兴奋性的影响规律;2)VTMM方法能够,在与细胞电兴奋性相关分子指标发生显着性变化之前,准确而定量地检测到待测因素对神经网络的影响,灵敏且非常有效;3)三种神经网络均存在阈值电压,且阈值电压在不同种类及同种不同浓（强）度外界因素作用下均会发生相似的规律性变化。阈值电压的大小及阈值电压受外界因素影响而减小至0或增大至正无穷时外界因素的作用浓（强）度因神经网络种类的不同而不同。
周恬恬[2]（2016）在《基于“Src-NR2-nNOS”信号通路的芍药甘草配伍调控“GABA-Glu”平衡的神经保护作用》文中研究说明在中枢神经系统疾病的发展过程中,神经元的丢失是其基本的病理变化之一。兴奋性损伤,作为神经元损伤的重要机制之一,以诱导其凋亡作为神经元退变的主要机制。研究证明,减少兴奋性氨基酸释放和抑制突触后谷氨酸受体功能能够有效对抗谷氨酸介导的神经元损伤,但由于谷氨酸受体拮抗剂诸多的不良反应限制了临床应用。中药复方及单味药也呈现出确切的中枢神经系统的保护作用,前期动物实验表明,芍药甘草汤对于痉挛性偏瘫和缺血性脑损伤疗效确切,可显着改善脑卒中大鼠的神经功能障碍,调节神经递质Glu、GABA水平及其受体的表达。本实验拟在NMDA诱导PC12细胞兴奋性损伤的基础上,采用抑制性氨基酸GABA受体激动剂和拮抗剂,加入芍药甘草3：1最佳配伍含药血清,同时以1：1原方配伍比例含药血清作为对照,探讨芍药甘草配伍干预作用,以及"Src-NR2-nNOS"信号介导的受体之间的相互作用。以期通过本研究阐明体外兴奋性细胞损伤模型中二者的协同作用机制,研究两种配比的作用差异。为芍药甘草配伍临床应用于防治中枢神经损伤疾病提供实验依据,为中药复方抗兴奋性氨基酸损伤有效成分新药的开发和利用提供实验依据。目的探讨芍药甘草配伍对PC12细胞的保护作用；探讨"Src-NR2-nNOS"信号介导的芍药甘草配伍调节GABA-Glu平衡作用。方法1.芍药甘草汤的制备和HPLC质量控制。2.检测芍药甘草配伍含药血清对NMDA诱导兴奋性损伤PC12细胞的活性、凋亡和Ca2+离子浓度的影响。3.检测"Src-NR2-nNOS"信号通路Src、NR2A、NR2B、nNOSmRNA和蛋白磷酸化表达水平,及芍药甘草配伍含药血清干预作用。结果1.指纹图谱共检测到10个特征峰,其中5个为白芍特征峰,5个为甘草特征峰；本次所用芍药甘草汤（白芍：甘草=3：1）中,芍药苷含量为19.13 mg/g、甘草苷含量为13.39mg/g、甘草酸铵含量为0.018 mg/g。2.芍药甘草配伍含药血清对PC12细胞活性的影响NMDA可显着抑制PC12的细胞活性,模型组OD值较空白组显着降低（P<0.01）,给予芍药甘草汤1：1低剂量组可增加细胞活性,中剂量组和高剂量组较模型组显着升高（P<0.05,P<0.01）,给予芍药甘草汤3：1低剂量组减少细胞活性,中剂量组和高剂量组较模型组显着升高（P<0.05,P<0.01）; GABAA受体激动剂（Muscimol）组、GABAB受体激动剂（Baclofen）组细胞OD值与模型组比较升高；GABAA受体拮抗剂（Bicuculline）组与模型组相比升高、GABAB受体拮抗剂（Saclofen）组细胞OD值下降。3.芍药甘草配伍含药血清对PC12细胞凋亡的影响3.1芍药甘草配伍含药血清对凋亡率的影响NMDA可显着增加PC12的细胞凋亡,模型组凋亡率较空白组显着升高（P<0.05）,给予芍药甘草汤1：1组凋亡率较模型组显着下降（P<0.05）、3：1组较模型组有所下降；GABAA受体激动剂（Muscimol）组、GABAB受体激动剂（Baclofen）组细胞凋亡率与模型组比较显着下降（P<0.05,P<0.01）; GABAA受体拮抗剂（Bicuculline）组、GABAB受体拮抗剂（Saclofen）组细胞凋亡率与模型组相比显着升高（P<0.05、P<0.01）。3.2芍药甘草配伍含药血清对Caspase-3凋亡蛋白表达的影响NMDA可显着增加PC12的Caspase-3凋亡蛋白表达（P<0.01）,给予芍药甘草汤1：1、3：1均抑制细胞凋亡,Caspase-3凋亡蛋白较模型组显着下降（P<0.05）; GABAA受体激动剂（Muscimol）组细胞Caspase-3凋亡蛋白与模型组显着下降（P<0.05）、GABAB受体激动剂（Baclofen）有下降趋势；GABAA受体拮抗剂（Bicuculline）组Caspase-3凋亡蛋白较模型组显着下降（P<0.05）,GABAB受体拮抗剂（Saclofen）组细胞Caspase-3凋亡蛋白与模型组相比有所下降。4.芍药甘草配伍含药血清对PC12细胞Ca2+浓度的影响NMDA可显着增加PC12细胞内的Ca2+浓度（P<0.01）,给予芍药甘草汤1：1、3：1均可抑制细胞Ca2+浓度,较模型组显着下降（P<0.05,P<0.01）;GABAA受体激动剂（Muscimol）组、GABAB受体激动剂（Baclofen）组细胞Ca2+浓度与模型组显着下降（P<0.05）;GABAA受体拮抗剂（Bicuculline）组Ca2+浓度较模型组下降,GABAB受体拮抗剂（Saclofen）组细胞Ca2+浓度与模型组相比显着下降（P<0.01）。5.芍药甘草配伍含药血清对Src、NR2A、NR2B、nNOS mRNA表达的影响与空白组相比,NMDA组NR2A、nNOS mRNA的表达显着升高（P<0.01,P<0.05）,上调NR2B mRNA的表达,Src mRNA的表达有所下降。与模型组相比,给予芍药甘草汤1：1组可下调Src、NR2BmRNA的表达,显着下调NR2A、nNOS mRNA的表达（P<0.01,P<0.05）；给予芍药甘草汤3：1组可下调Src、NR2B、nNOS mRNA的表达。显着下调NR2AmRNA的表达（P<0.01）。与模型组相比,GABAA受体激动剂（Muscimol）组细胞NR2A、NR2B、nNOS mRNA表达与模型组比较显着降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）,且Src mRNA的表达也呈下降趋势；GABAB受体激动剂（Baclofen）组NR2A、nNOSmRNA的表达显着下降（P<0.01,P<0.05）,Src、NR2BmRNA的表达有所下降。与模型组相比,GABAA受体拮抗剂（Bicuculline）组、细胞NR2A、NR2B、nNOS mRNA的表达与模型组比较显着降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）,且Src mRNA的表达也呈下降趋势；GABAB受体拮抗剂（Saclofen）组细胞NR2A.nNOS mRNA的表达显着下降（P<0.01,P<0.05）,Src、NR2BmRNA的表达有所下降。6.芍药甘草配伍含药血清对p-Src（Tyr418）、p-NR2A（Tyr1325）、p-NR2B（Tyr1472）、 p-nNOS（Ser1417）蛋白表达的影响与空白组相比,NMDA组p-NR2A、p-NR2B、p-nNOS的蛋白表达显着升高（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,p-Src的蛋白表达有所升高。与模型组相比,给予芍药甘草汤1：1组可下调p-NR2A、p-NR2B、p-nNOS蛋白的表达,显着下调p-Src的蛋白表达（P<0.05）；给予芍药甘草汤3：1组可下调p-Src的蛋白表达,显着下调p-NR2A、p-NR2B、 p-nNOS的蛋白表达（P<0.05,P<0.01,P<0.01）。与模型组相比,GABAA受体激动剂（Muscimol）组细胞p-Src、p-NR2A、p-nNOS的蛋白表达与模型组比较显着降低（P<0.05,P<0.05, P<0.001）,p-NR2B的蛋白表达有所上升；GABAB受体激动剂（Baclofen）组p-Src、p-NR2A、p-NR2B、p-nNOS的蛋白表达显着下降（P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01）。与模型组相比,GABAA受体拮抗剂（Bicuculline）组p-NR2B的蛋白表达显着降低（P<0.01）,p-Src的蛋白表达呈下降趋势,p-NR2A的蛋白显着升高（P<0.01）,p-nNOS的蛋白表达有所升高；GABAB受体拮抗剂（Saclofen）组细胞p-Src、p-nNOS的蛋白表达显着下降（P<0.01）,p-NR2B的蛋白的表达有所下降,p-NR2A的蛋白表达有上升趋势。结论1.NMDA诱导PC12兴奋性损伤模型成立,造模浓度为200μmol/L。芍药甘草配伍含药血清可以升高细胞活性,降低凋亡率和凋亡蛋白Caspase-3蛋白表达,降低胞内钙离子浓度,从而减轻NMDA兴奋性神经损伤。2. GABA激动剂均显示良好的拮抗NMDA兴奋性损伤的作用,但不排除可能存在的GABA与NMDA胞外的负反馈调节,在GABA受体过度兴奋的同时,可能会激动NMDA受体,加剧兴奋性毒性；GABA拮抗剂则不能明显增加兴奋性神经毒作用。3.芍药甘草配伍发挥Src抑制剂样作用,显着影响NR2A受体磷酸化,通过结合蛋白进一步影响nNOS合成减弱NO释放。4.本实验探讨了芍药甘草汤滋阴制阳,调节大脑中枢抑制性和兴奋性神经递质系统的功能特色,为中药复方NMDA抑制剂的开发提供有效思路。而且本实验中白芍在“酸甘化阴”的配伍中所体现出来的“酸”贡献度更大,为探讨五味和合的科学内涵提供了一定的实验基础。
邱方[3]（2015）在《骨癌痛模型酸感受离子通道表达变化和SDF-1对钠离子通道电流调节机制的研究》文中进行了进一步梳理研究一 大鼠骨癌痛模型的建立及酸感受离子通道（ASIC）亚基的表达目的通过建立大鼠骨癌痛模型并研究其背根神经节（DRG）上ASIC亚基mRNA和蛋白质的表达变化,来探索ASIC亚基在骨癌痛发生发展中的作用。方法Sprague-Dawley大鼠45只随机分为三组：假手术组（sham, n=15）,骨癌痛模型7天组（C7,n=15）,骨癌痛模型14天组（C14,n=15）。三组大鼠分别于左后肢胫骨上段髓腔内注射5μL生理盐水（sham组）或1×104/μL walker256鼠源性乳腺癌细胞生理盐水悬浮液（C7组和C14组）,建立癌痛模型。术后密切观察大鼠健康状况，用Von Frey filament（VFF）细丝和CO2激光热刺激仪测量大鼠左下肢机械痛敏缩足阈值（Paw withdrawal threshold,PWT）和热痛敏PWT的变化。分别于术后7天和14天对大鼠进行行microCT影像学检查和HE病理学检查,以确定肿瘤对胫骨的破坏情况。在各组观察期结束时,分别取腰4、腰5（L4、L5）DRG。RT-PCR,免疫印迹和免疫荧光分别用来检测DRG上ASIC的mRNA和蛋白质的表达变化。结果与sham组大鼠相比,C7、C14术侧下肢机械痛敏PWT和热痛敏PWT明显下降（P<0.01）。Micro CT图像表明,C7组胫骨破坏不明显,C14组有明显的骨质破坏,甚至有骨皮质的缺损。与假手术组相比较,在六个ASIC亚基中,只有C14组同侧的ASIC3亚基的：mRNA表达升高（P<0.05）。但是在蛋白表达方面,除了ASIC2a,同侧的ASIC1, ASIC3, ASIC4亚基蛋白都不同程度的表达升高（P<0.01）。免疫双标的方法检测到与假手术组相比较,C14组手术中ASIC3和异凝集素-B4（IB4）共表达的神经元的数目更多。另外,我们也发现与假手术组相比较,C14组中ASIC3和neurofilament 200 （NF200）共同表达的DRG神经元更多。结论大鼠胫骨内注射Walker256细胞可以成功复制骨癌痛模型。大鼠脊髓左侧L4、L5 DRG上ASIC3的mRNA和蛋白质的表达量明显增高,提示ASIC3亚基可能在骨癌痛的发生发展中有一定作用。组同侧的ASIC3亚基的：mRNA表达升高（P<0.05）。但是在蛋白表达方面,除了ASIC2a,同侧的ASIC1, ASIC3, ASIC4亚基蛋白都不同程度的表达升高（P<0.01）。免疫双标的方法检测到与假手术组相比较,C14组手术中ASIC3和异凝集素-B4（IB4）共表达的神经元的数目更多。另外,我们也发现与假手术组相比较,C14组中ASIC3和neurofilament 200 （NF200）共同表达的DRG神经元更多。结论大鼠胫骨内注射Walker256细胞可以成功复制骨癌痛模型。大鼠脊髓左侧L4、L5 DRG上ASIC3的mRNA和蛋白质的表达量明显增高,提示ASIC3亚基可能在骨癌痛的发生发展中有一定作用。研究二SDF-1及其下游信号通路对于Nav1.8电流的调节作用目的趋化因子作为一种新的神经调质参与脊髓水平和脊髓上水平的疼痛感知过程。Stromal cell-derived factor 1 （SDF-1）,又名chemokine CXC motif ligand 12（CXCL12）,在慢性疼痛模型动物的背根神经节（DRG）上的表达升高。但是SDF-1对于河豚毒素不敏感（TTXR）内通道Nav1.8电流变化的作用机制尚未得到研究。本文就是利用电生理学的方法研究SDF-1及其受体CXCR4对于Navl.8钠离子通道的调控作用。方法免疫荧光的方法用来检测Nav1.8和CXCR4在DRG神经元上的共分布。急性分离培养的DRG神经元和不同浓度的SDF-1 （5,25,50,200,400 ng/mL）进行孵育1-2小时。全细胞电压钳记录空白对照组和不同浓度SDF-1孵育组DRG神经元上的Nav1.8电流的变化,以观察SDF-1对Navl.8电流的影响。随后,全细胞电压钳技术记录CXCR4受体抑制剂AMD3100、G蛋白抑制剂百日咳毒素（PTX）和霍乱毒素（CTX）、磷酸肌醇3激酶（PI3K）抑制剂LY294002对于Nav1.8电流的影响。结果利用免疫荧光的方法,实验发现42%的DRG神经元是CXCR4蛋白和Nav1.8钠离子通道蛋白共同表达的。SDF-1预处理急性分离的小直径的DRG神经元,会记录到神经元上Nav1.8电流幅度呈现SDF-1浓度依赖性的增高。SDF-1也使得Nav1.8电流的稳态激活曲线向超极化的方向发展。实验中所用的抑制剂（AMD3100,PTX, CTX, LY294002）都会不同程度的增加Nav1.8电流。另外用这些抑制剂预处理背根神经节也会使Nav1.8的稳态激活曲线向着超极化的方向转移。结论SDF-1可以增加Nav1.8电流来兴奋初级伤害性感受神经元,但是SDF-1对Nav1.8的调节可能并不是通过CXCR4及其下游的G蛋白和PI3K信号通路。离子通道蛋白共同表达的。SDF-1预处理急性分离的小直径的DRG神经元,会记录到神经元上Nav1.8电流幅度呈现SDF-1浓度依赖性的增高。SDF-1也使得Nav1.8电流的稳态激活曲线向超极化的方向发展。实验中所用的抑制剂（AMD3100,PTX, CTX, LY294002）都会不同程度的增加Nav1.8电流。另外用这些抑制剂预处理背根神经节也会使Nav1.8的稳态激活曲线向着超极化的方向转移。结论SDF-1可以增加Nav1.8电流来兴奋初级伤害性感受神经元,但是SDF-1对Nav1.8的调节可能并不是通过CXCR4及其下游的G蛋白和PI3K信号通路。研究三SDF-1及其下游信号通路对于Nav1.9电流的调节作用目的研究表明趋化因子是小分子蛋白的细胞因子超家族,它们在免疫和神经调节中发挥重要的作用。Stromal cell-derived factor 1（SDF-1）,又名chemokine CXC motif ligand 12（CXCL12）,在慢性疼痛模型动物的背根神经节（DRG）上的表达升高。但是SDF-1引起TTXR钠离子电流Nav1.9电流发生变化的机制尚未得到研究。本实验利用电生理学的方法研究SDF-1及其受体CXCR4对于Nav1.9钠离子通道的调控作用。方法免疫荧光的方法用来检测Nav1.9和CXCR4在DRG神经元上的共表达。急性分离的DRG神经元和不同浓度的SDF-1（5,25,50,200,400 ng/mL）进行孵育1-2小时。全细胞电压钳记录空白对照组和SDF-1孵育组DRG神经元上的Nav1.9电流的变化,以观察SDF-1对Nav1.9电流的影响。同时,全细胞电压钳技术也记录了CXCR4受体抑制剂AMD3100、G蛋白抑制剂百日咳毒素（PTX）和霍乱毒素（CTX）、磷酸肌醇3激酶（PI3K）抑制剂LY294002对于Navl.9电流的影响。结果利用免疫荧光的方法,实验中发现37%的DRG神经元是CXCR4蛋白和Nav1.9钠离子通道蛋白共同表达的。研究中我们也发现,SDF-1预处理急性分离的小直径DRG神经元,可以记录到神经元上Nav1.9电流幅度呈现SDF-1浓度依赖性的增高。SDF-1也使得Nav1.9电流的稳态激活曲线向超极化的方向发展。对于Nav1.9通道来说,CXCR4受体抑制剂AMD3100可以阻断SDF-1引起的Nav1.9电流密度和通道动力学特性的改变。PTX而不是CTX可以阻断SDF-1引起的Navl.9电流的增加,这表明Gi/o蛋白亚基参与SDF-1对于Nav1.9钠通道电流的调节。另外,磷酸肌醇3激酶（PI3K）抑制剂LY294002也参与SDF-1对于Nav1.9电流的调节。结论研究表明,SDF-1可能通过作用于Nav1.9电流来兴奋初级伤害性感受神经元。SDF-1通过激活其受体CXCR4及其下游信号通路来调节Nav1.9电流的变化。
李新宇[4]（2015）在《近红外激光调节可兴奋细胞膜钠离子通道功能的实验研究》文中进行了进一步梳理激光医疗技术在临床上已有广泛的应用,但激光治疗作用的生理学基础尚不十分清楚。针对这一问题国内外研究者借助电生理等手段探讨了激光对可兴奋细胞的作用,结果发现激光不但可以调节可兴奋细胞的电生理功能,甚至可以直接诱发动作电位。而动作电位的发生是以钠离子从细胞外流向细胞内为起始的,因此这一现象表明激光作用不但可以调节可兴奋细胞膜上的钠通道蛋白功能,还可以直接开启电压门控钠离子通道,从而导致动作电位的发生。本论文基于近红外激光辐照对可兴奋细胞膜上钠离子通道功能的调节作用,来研究其作用机制。研究中选择980nm的近红外激光作用于细胞膜,用膜片钳技术同步地记录下全细胞钠离子通道电流在激光辐照作用前、后的变化情况。再根据描述离子通道全细胞电流动力学特性的Hodgkin-Huxley模型,对实验记录到的全细胞钠电流进行数据拟合,从而获得表征钠离子通道电流激活与失活动力学特性的时间常数τm与τh,并对激光辐照前、后的这两个时间常数进行比值运算,来定量表征激光对细胞活性的影响。为了测量实验中涉及到的激光诱导的光热效应,使用空电极测温方法直接测量激光辐照所产生的溶液瞬时温升。这一测温方法将直径为微米量级的玻璃微电极充灌导电溶液作为热敏元件,细胞外溶液中的快速温度变化可以瞬时改变该微电极的阻抗,再根据温度标定实验即可获得相应的溶液温度变化。这种方法可以测得空间中1微米左右区域内0.1毫秒的温度变化。本论文中主要研究工作包括,一定功率激光辐照作用中的不同时程对钠离子通道功能的调节作用,以及不同功率的980nm激光对细胞功能的调节两大部分内容。通过对实验结果的分析发现：1.一定功率的激光作用时程中,上升沿可以使钠电流激活过程受到抑制,而使失活过程加快。激光的下降沿则使钠电流激活和失活两个过程都得到加速。通过对激光辐照上升沿对钠电流激活抑制效应的分析发现,980nmm激光辐照所产生温度场的建立时间将长于1毫秒左右的钠通道激活时间。也就是说,在钠通道的激活时间内尚没有明显的光热效应产生,此时近红外激光作为一种电磁波会降低钠通道的活性。而激光作用的下降沿情况中,光热效应成为激光调节细胞电生理功能的主要机制,激光的调节作用可以很好的用钠通道蛋白温度特性以及激光作用引起的溶液平均温升来定量解释。2.不同功率的980nm激光对细胞功能的调节效果研究,分为时间动力学研究和峰值钠电流研究两个方面。时间动力学研究中选取不同功率激光刺激细胞膜上钠离子通道,在光热效应最显着的激光辐照的下降沿同步地引出全细胞钠电流。结果发现钠电流的激活时间常数τm在激光作用前后的比值与辐照激光的功率呈线性关系,且与细胞膜电位的变化无关。这一结果表明不同功率980nm激光辐照对钠电流的线性调制效果是通过光热效应实现的。激光辐照对峰值钠电流调制的功率依赖性研究中,通过测量不同功率激光作用下峰值钠电流的变化,并与相应的细胞外环境温度变化相互参考,经分析发现近红外激光作用可以使峰值钠电流增加,增加量不但线性依赖于激光功率,而且也可以用细胞外溶液温升和钠通道蛋白的温度特性来解释。但在激光作用以后的钠电流恢复程度则与溶液温度耗散的时间变化率相关,快速负的温度变化率有利于钠电流从激光作用中恢复。钠电流的失活恢复实验则表明在激光作用后钠电流的失活恢复速度加快。综合结果表明980nm红外激光是通过改变细胞外溶液的温度（绝对温升）,以及温度改变的快慢（温度变化率）一起影响细胞功能的,温升本身会使峰值钠电流增加,而温度耗散过程中的温度梯度会加快钠电流的恢复。本论文的研究针对近红外980nm激光对细胞功能调节作用的离子通道机制,为理解激光直接诱发动作电位提供了直接的实验支持。因为钠离子通道是动作电位的产生基础,为神经细胞、肌肉细胞和腺体细胞等实现正常的电生理功能所必需,从另一方面来看,钠离子通道的兴奋性保证了生物体正常的新陈代谢,并且是70%药物的作用靶点,与众多疾病的产生和治疗息息相关,因此这一研究对于激光医学的临床实践又有一定的参考价值。
刘扬[5]（2012）在《TRPV4在大鼠脑中的表达及在次声损伤中的作用》文中进行了进一步梳理研究背景：次声是指频率小于20Hz的声波。次声暴露可引起多种组织器官损害，是一种公认的环境污染因素，并被认为具有潜在军事用途。次声来源广泛，穿透性很强，防护比较困难，因此有必要深入研究其作用机制。研究目的：次声频率与组织器官固有频率一致，二者发生共振被认为是次声损伤的始动因素。但振动做为一种机械刺激，如何转变成生物信号并不清楚。TRPV是近年研究较多的一类通道蛋白，其不少成员能感受机械刺激，并调节组织细胞的活动。据此，我们假设，次声可能激活某些机械感受分子，以此引起组织损伤。为给该假设提供证据支持，深入了解次声损伤的机制，我们进行本研究。研究内容：（1）16Hz/130db次声处理大鼠2h，之后立即提取大鼠脑组织RNA并反转录，设计trpv1-trpv4的特异性引物，用RT-PCR的方法对各自mRNA含量进行定量分析，比较次声处理对trpV转录的影响；（2）用WB的方法检测大鼠次声暴露后急性期不同时间点，TRPV4表达的变化趋势；（3）在体外培养的大鼠皮质神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞中，用免疫荧光染色、WB和RT-PCR的方法，确定TRPV4的细胞定位；（4）构建trpV4特异的RNAi表达载体，并用脂质体瞬时转染U87细胞，验证转染效率；（5）6Hz/130dB次声处理U87细胞，在急性期的不同时间点检测U87细胞上清液MDA含量、裂解液SOD活性和裂解液GSH含量，研究次声对U87的过氧化损伤；（6）用trpv4特异的RNAi载体瞬转U87细胞，再次观察上述指标，研究RNAi对次声引起的过氧化损伤有无保护作用。研究结果：（1）16Hz/130db次声处理能显着提高大鼠脑组织trpv4mRNA量（；2）16Hz/130db次声处理大鼠2h，在终止次声0.5h时间点TRPV4表达即可达到峰值，之后轻度下降，但到2h时间点时仍高于正常（；3）TRPV4在大鼠皮层神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞都有表达，其中以星形胶质细胞表达水平最高；（4）构建的trpv4特异的RNAi载体能有效地下调U87细胞TRPV4的表达，为下一步实验打下基础；（5）6Hz/130dB次声处理U87细胞后，在1-4h时间点，上清液MDA含量都有明显上升，裂解液SOD活性和裂解液GSH含量都有明显下降，提示次声对U87细胞的过氧化损伤；（6）下调U87细胞TRPV4的表达，对次声过氧化损伤有一定的保护作用。结论：TRPV4做为一种近年研究较多的机械刺激感受分子，在大鼠皮层神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞都有表达,其中以星形胶质细胞表达水平最高；6Hz/130dB次声处理U87细胞可引起明显的过氧化损伤，而下调U87细胞TRPV4的表达，对次声过氧化损伤有一定的而保护作用，提示TRPV4参与了次声引起的组织损伤。
杨柳[6]（2012）在《异氟烷致新生大鼠睾丸生殖细胞凋亡及机制研究》文中研究指明目的探讨临床相关浓度的异氟烷对新生大鼠睾丸生殖细胞的影响及其作用机制。本课题为最终阐明吸入性全身麻醉药的生殖毒性及其作用机制，指导全身麻醉药的安全合理应用，以及探索其毒性作用的有效防治手段等方面提供了理论依据。方法60只出生1天（P1d）雄性大鼠随机分为对照组和实验组，对照组大鼠自主吸入空气，实验组大鼠则分别暴露于1MAC异氟烷+30%O2中2h、4h和6h（2h组、4h组及6h组）。运用TUNEL法对大鼠睾丸生殖细胞的凋亡进行评价；Western Blot法对大鼠睾丸生殖细胞Bcl-2、Bax、细胞色素C（Cytochrome C）和活化Caspase-3蛋白质表达水平进行检测；Real-Time PCR法对大鼠睾丸生殖细胞Bcl-2、Bax、Cytochrome C和Caspase-3mRNA表达水平进行测定。结果TUNE结果显示，对照组大鼠睾丸的生精小管内很少出现凋亡的阳性细胞，异氟烷暴露2h、4h、6h组均使大鼠睾丸的平均每生精小管内阳性细胞数显着增加。与对照组相比，实验组大鼠睾丸细胞Bcl-2蛋白水平表达下调（P<0.05）；且Bcl-2蛋白的表达在6h组较4h组下调（P<0.05）。4h和6h组与空白对照组相比较，大鼠睾丸细胞Bcl-2mRNA水平表达下调（P<0.05）；Bcl-2mRNA的表达在2h、4h和6h依次下调（P<0.05）。实验组大鼠的Bax的蛋白质表达水平较对照组上调（P<0.05）；4h暴露组与2h暴露组相比，表达上调（P<0.05）。4h、6h暴露组与空白对照组相比较，Bax mRNA表达水平明显上调（P<0.05）；Bax的mRNA的表达水平在2h、4h和6h依次上调（P<0.05）。与对照组比较，异氟烷暴露2h、4h、6h均使大鼠睾丸Cytochrome C蛋白表达增加（P<0.05）。Cytochrome C mRNA的表达在4h和6h组表达上调（P<0.05）。睾丸内活化Caspase-3蛋白及Caspase-3的mRNA表达量在实验组均明显升高，与空白对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05）；活化Caspase-3蛋白及Caspase-3mRNA的表达在2h组、4h组和6h组依次上调（P<0.05）。结论通过对新生大鼠暴露于异氟烷的研究证实，P1d大鼠暴露于1MAC的异氟烷2h将致睾丸生殖细胞凋亡，随着暴露时间延长至6h，其凋亡效应呈现时间依赖性。Bcl-2、Bax和Cytochrome C参与了异氟烷所致的新生大鼠生殖细胞凋亡。
陈晓仰[7]（2011）在《克罗卡林在缺氧缺血性脑病新生鼠不同脑区的神经保护作用研究》文中研究说明背景与目的新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic ischemic encephalopathy,HIE）是由于围产期缺氧窒息致新生儿缺氧缺血性脑损伤（hypoxic ischemic brain damage,HIBD）,临床上出现脑病表现,部分病例可留有不同程度神经系统后遗症,在围产期神经系统疾病中占重要地位,是引起儿童期脑瘫的主要原因。近年研究发现ATP敏感性钾离子通道(ATP-sensitive K+ channels,KATP通道)开放对多种组织细胞缺氧缺血损伤有保护作用,该通道是电压非依赖性配体门控通道,在缺氧缺血等病理状态下被激活开放,使大量K+外流,细胞膜超极化,从而使Na+、Ca2+内流减少,避免或减轻钙超载、减少能耗、减轻兴奋性氨基酸及氧自由基释放,保护细胞。克罗卡林是一种针对线粒体KATP通道特异性的钾通道开放剂(KATP channel opener, KCO),许多研究证实克罗卡林预处理能对抗缺氧缺血性脑损伤,具有神经保护作用,然而其具体保护机制尚不明确。本文以宫内窒息致HIBD新生大鼠为研究对象,观察不同脑区（皮质、海马、小脑、丘脑、脑干）KATP通道亚基蛋白（Kir6.1、Kir6.2、SUR1、SUR2B）基因表达情况,以及加用克罗卡林预处理后对不同脑区的保护作用不同,以期进一步阐明KCOs对脑保护作用的分子机制。该研究结果为深入认识KATP通道亚基蛋白在脑组织不同区域的表达情况提供依据,为开发特异性更高的KATP通道开放剂治疗新生儿HIE提供理论基础。材料与方法采用刚出生SD新生大鼠250只,分为五组,随机分为正常对照组（Control组）、缺氧缺血组（HI组）、克罗卡林组（Cro组）、溶剂对照组（NaOH组）及克罗卡林+格列苯脲（Cro+Gli）组,每组50只。HI组、Cro组、NaOH组及Cro+Gli组均制作成HIBD模型。分别在窒息后0h、12h、24h,共给药三次,克罗卡林每次按100ug/kg腹腔内注射,克罗卡林+格列苯脲组在上述相同时间点用克罗卡林后立即腹腔注射通道抑制剂格列本脲每次300ug / kg,抑制通道开放。NaOH组于同样时间点给予腹腔注射0.1M NaOH,体积同Cro组。对各组动物进行神经行为学评分,采用HE染色观察病理改变和进行显微损伤评分,TTC染色测量脑梗死面积,RT-PCR方法检测KATP通道亚基蛋白（Kir6.1、Kir6.2、SUR1、SUR2B）基因表达情况。实验结果用EXCEL2003和SPSS13.0统计软件进行分析处理。结果以均数±标准差（（x|-）±s）表示,采用重复测量分析（repeated measures）、方差分析（ANOVA）、LSD、SNK和Dunnett T3进行组间均数比较,P<0.05为差异有显着性。结果1.神经行为观察及评分:正常对照组动物未见明显的神经功能缺失,窒息组（HI组）、溶剂对照组（NaOH组）缺血缺氧后症状较重,出现烦躁不安,惊跳,呼吸加深加快,随着缺氧时间延长,出现嗜睡,活动减少;重则抽搐、昏迷。克罗卡林组神经行为学评分较HI组及NaOH组低,克罗卡林+格列苯脲组神经行为学评分较克罗卡林组高（P<0.05）。窒息组与溶剂组差异无统计学意义,P>0.05,窒息组、溶剂对照组>克罗卡林+格列苯脲组>克罗卡林组>正常对照组,P<0.01,差异均有统计学意义。2.HE染色病理变化和显微损伤评分:从常规HE染色的病理切片观察结果来看,正常对照组光镜下脑组织结构、层次清晰,细胞数目较多,排列规则,细胞轮廓及核仁清楚可见,细胞及间质无水肿;HI组及NaOH组可见大脑皮质神经元正常排列结构消失,间质水肿,神经细胞肿胀,核结构不清、固缩,继而变性、坏死,有空泡变,可见细胞凋亡,神经元数目明显减少;克罗卡林组脑组织细胞亦有不同程度的水肿、变性及坏死,神经元数目略微减少,多数细胞形态基本保持完整,细胞排列相对整齐,坏死程度较HI组及NaOH组减轻。克罗卡林+格列苯脲组脑组织形态特点较克罗卡林组重。HE显微损伤评分结果:每个脑区各组通过两两比较,窒息组、溶剂对照组差异无统计学意义,P>0.05,窒息组、溶剂对照组>克罗卡林+格列苯脲组>克罗卡林组>正常对照组,P<0.05或者P<0.01,差异均有统计学意义。每个脑区的窒息组进行对比,海马、皮质>小脑、丘脑、脑干,差异有统计学意义（P<0.01）。3.通过TTC染色测量脑梗死面积提示:正常组整个脑组织呈红色,窒息组及溶剂组脑组织梗死区较大,克罗卡林组脑组织梗死区较小,克罗卡林+格列苯脲组脑组织梗死区较克罗卡林组大。通过两两比较,窒息组、溶剂对照组差异无统计学意义,P>0.05,窒息组、溶剂对照组>克罗卡林+格列苯脲组>克罗卡林组>正常对照组,P<0.01,差异均有统计学意义。4.RT-PCR方法检测KATP通道亚单位基因在不同脑区表达情况:不同脑区Kir6.1、Kir6.2各组进行比较,窒息组、溶剂对照组与克罗卡林+格列苯脲组、克罗卡林组、正常对照组对比,P<0.01,差异均有统计学意义。窒息组与溶剂对照组对比,P>0.05,差异无统计学意义。皮质区Kir6.2>kir6.1,海马区Kir6.2>kir6.1,P<0.05,差异均有统计学意义。利用各脑区Kir6.2（克罗卡林组与对照组）比较,皮质区克罗卡林与对照组表达量相近,P=0.44,无统计学意义,而海马区P=0.29,也无统计学意义。小脑、丘脑、脑干P值均小于0.05,有统计学意义。不同脑区的SUR1、SUR2B各组进行比较,窒息组、溶剂对照组与克罗卡林+格列苯脲组、克罗卡林组、正常对照组对比, P<0.01,差异均有统计学意义。窒息组与溶剂对照组对比,P>0.05,差异无统计学意义。皮质区SUR2B> SUR1,海马区SUR1> SUR2B,P<0.05,差异均有统计学意义。结论1.本实验显示给予KATP通道开放剂克罗卡林能显着改善HIBD新生大鼠神经功能缺损程度,减少脑组织细胞的水肿、变性及坏死程度,减少脑缺血再灌注后梗死面积。提示KATP通道开放剂对脑缺血再灌注损伤具有重要的保护作用。2.在新生鼠缺血缺氧性脑损伤后,通过脑损伤评分,海马及皮质评分最高,提示海马和皮质损伤程度最高。3.同一脑组织不同部位KATP通道组成不同,而克罗卡林对损伤最严重的皮质区和海马区有较好的保护作用,格列本脲能抑制克罗卡林的脑保护作用。
曹志友[8]（2010）在《下丘脑TRPV1在LPS致大鼠发热过程中对体温及脑内AVP含量、[Ca2+]i的影响》文中研究表明前言瞬时感受器电位香草酸亚型1 （transient receptor potential vanilloid subfamily member 1, TRPV1）是近年来发现的存在于细胞膜或胞内细胞器膜上的一类与多种感受功能有关的非选择性阳离子通道蛋白,该通道可被多种理化因素激活,主要有辣椒素、大于43℃的热刺激和质子等,且被激活时主要引起Ca2+的大量内流,以胞内Ca2+浓度增高的形式调节着相应的生理功能或病理机制的发生。本研究室以往的研究结果显示,下丘脑中的TRPV1参与了发热过程中的体温调节,特别是对限制体温升高的幅度具有重要的作用。精氨酸加压素（arginine vasopressin, AVP）是一种内源性解热物质,在参与体温调节时脑内最敏感的作用部位是腹中隔区（ventral septal area, VSA）,向VSA注射AVP能明显地抑制家兔的发热反应。TRPV1通道阻断剂辣椒平（capsazepine）被广泛应用于对该通道的研究中,capsazepine可有效的抑制TRPV1的活化效应。本实验通过用脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）复制大鼠发热模型,结合应用capsazepine抑制TRPV1的活化,观察发热不同时相下丘脑组织中TRPV1表达量、细胞内钙离子浓度变化与AVP含量变化的时相关系,以期进一步探讨机体体温调节过程中限热的生物学机制。材料与方法一、实验动物及处理选用健康雄性SD大鼠120只,体重250-280g,基础体温（38.1±0.2）℃,由中国医科大学实验动物中心提供。饲育室室温（20±2）℃,相对湿度40%-60%,昼夜光照节律12h：12h,单笼饲养,自由进食水。实验中各项操作按常规无菌操作规则进行。将动物随机分为4组：正常对照组（N）：侧脑室注射溶剂10μl,30min后腹腔注射生理盐水4ml·kg-1; （2）Capsazepine组（C）：侧脑室注射Capsazepine 0.02 mg·kg-1配制成10μl（溶剂：10%无水乙醇+10%Tween80+80%生理盐水配制）（Sigma, USA）,30min后腹腔注射生理盐水4ml-kg-1; （3）LPS发热组（L）：向侧脑室注射溶剂10μl,30min后腹腔注射LPS4ml·kg-1（20μg·ml-1,用生理盐水配制）（Sigma, USA）;（4） Capsazepine+LPS组（C+L）：向侧脑室注射Capsazepine 0.02 mg·kg-1配制成10μl,30min后腹腔注射LPS4ml·kg-1。侧脑室插管采用10%水合氯醛3ml-kg-1腹腔麻醉下,参照大鼠脑图谱（A StereotaxicAtlas of the Rat Brain）进行。各组取6只动物持续观察体温变化540 min,并描绘其体温变化曲线。在各实验条件下取6只动物检测脑内AVP含量、下丘脑[Ca2+]i及TRPV1表达。测试样品的采集及处理如下：N组和C组于注射生理盐水后240min时立即断头采样,L组和C+L组分别在给予LPS后0、120、240、300、360、420和540min时采样。打开颅骨顶,暴露脑组织,按大鼠脑图谱以灰结节和视交叉的中心点为界定部位,取出下丘脑组织,一部分立即进行细胞内钙离子浓度测定,一部分立即投入液氮中速冻固定,20 min后放入-70℃冰箱内待测。测量体温时将数字温度计探头插入大鼠直肠内6cm处,数值稳定后读数,以给药前1h测得的3次直肠温的平均值为大鼠基础体温。实验过程中每30min测温一次。二、脑内AVP含量的测定大鼠处死后,迅速取出下丘脑、腹中隔组织各30 mg,煮沸5 min,加入1 mol·L-1盐酸1 ml充分匀浆后,室温中放置100 min,加入1 mol·L-1氢氧化钠1 ml以中和盐酸,离心3000r·min-1,10min,取上清液按照AVP放免检测试剂盒说明书进行测定。三、下丘脑细胞内钙离子浓度（[Ca2+]i）测定分离出下丘脑组织,制备成单细胞悬液,保持细胞存活率须在95%以上。然后Fura-2/AM避光孵育负载,调激发波长340nm,发射波长510nm,采用日立F-4500型荧光双波长分光光度计测定。四、Western blot检测下丘脑组织TRPV1表达取大鼠下丘脑组织,冰浴匀浆,4℃离心（12000 r·min-1,30min）两次,取上清。进行蛋白定量后,电泳、转膜、封闭,加兔抗大鼠TRPV1单克隆抗体（1：1000）,二抗为羊抗兔IgG, ECL化学发光法显色,凝胶成像图像分析系统分析。对照选用抗β-肌动蛋白抗体（β-actin）。目的蛋白与相应β-actin蛋白的灰度比值作为该目的蛋白的相对表达量。五、免疫荧光检测下丘脑组织TRPV1表达将冰冻切片在4℃条件下用丙酮固定10 min,加入山羊血清封闭液孵育1h,兔抗鼠TRPV1抗体（1：100）,4℃过夜。翌日切片经0.01M PBS（pH 7.4）充分漂洗后,暗室内滴加山羊抗兔抗体IgG-FITC（1:100）,室温孵育1 h,充分清洗后,荧光显微镜下观察并摄片。六、RT-PCR检测下丘脑组织TRPV1 mRNA表达按照Trizol说明书的方法提取下丘脑组织内总RNA,按RT-PCR试剂盒检测方法进行目的基因和内参基因的扩增。反应条件：94℃变性1 min,56℃退火1 min,72℃延伸1min,共35个循环,最后72℃延伸10min。TRPV1上游引物为5’-TTCTGCTCAACATGCTCATTG-3’,下游引物为5’-AATCCTTGAAAACCT CAGC-3’,扩增片段的长度为478bp。PCR产物经1.2%的琼脂糖凝胶电泳后,用凝胶成像分析系统进行基因表达水平分析。七、数据分析所有实验数据均用均数±标准差（x±s）表示,各组均数间差异的比较应用t检验,相关分析用相关性检验分析法。实验结果一、注射LPS后大鼠的体温变化大鼠腹腔注射LPS后,体温明显升高,240min达到高峰（△T：1.20℃±0.21℃）,发热大约持续540 min左右体温回降至接近基础水平；在发热期间L组各观察时间点与N组比较体温变化均有显着性差异（P<0.05）。二、capsazepine对体温的影响当预先经侧脑室注入capsazepine,30min后腹腔注射LPS时,即在C+L组体温变化也出现明显升高,大鼠在300min左右体温达到高峰,与N组和C组各采样时间点比较体温变化值有显着性差异（P<0.01）；与L组相比,发热幅度升高,在300-540min期间,两组△T差异均非常显着（P<0.01）；表现为发热时程延长,经540min后体温仍维持在较高水平。三、下丘脑及腹中隔区AVP含量的变化L组VSA中AVP的含量在注射LPS后开始升高,240min时达到高峰（29.81±2.74）,与N组比较增加了4.6倍,540min时回降至基础水平,在120、240、300、360min和420 min时间点AVP含量与N组比较差异显着。C+L组VSA中AVP含量的变化趋势与L组相似,300min时达到高峰,在120、240和300 min时间点,则明显低于L组（P<0.05）。L组和C+L组各自0时间点与N组和C组比较均无显着差异（P>0.05）。下丘脑中AVP含量在各组间均无显着性差异（P>0.05）。四、下丘脑神经元[Ca2+]i的变化N组下丘脑细胞内钙离子浓度为144.52±14.04,C组为139.67±14.13,L组（0min）为141.33±15.38,C+L（Omin）为137.17±13.11,以上各组之间没有显着性差异。L组下丘脑细胞内钙离子浓度值（[Ca2+]i）在给予LPS后开始升高,240min达到高峰（232±20.34）,与L组（0min）比较增加了1.6倍,540min时回降至基础水平,在120、240、300、360和420 min时间点[Ca2+]i与L组（0min）比较差异显着（P<0.05）。C+L组下丘脑细胞内Ca2+浓度在300min达到高峰（197.16±19.64）,与C+L（Omin）比较增加了1.37倍。C+L组与L组相比在120、240和300 min时间点显着降低（P<0.05）。五、下丘脑组织TRPV1表达的变化在L组和C+L组TRPV1表达量均随温度升高而增多,在体温处于高峰值时（240、300min） TRPV1表达水平达高峰值,之后,随TRPV1表达量逐渐降低,体温逐渐下降。在L组体温处于高峰时,TRPV1表达量为基础状态的2.18倍。C+L组TRPV1表达量在120min、240min、300min、360 min组均低于对应的L组（P<0.05）。结论1、应用TRPV1特异性阻断剂capsazepine对正常体温水平没有明显的影响。2、在LPS致热过程中,体温升高到一定程度可诱导下丘脑中TRPV1的表达和开放,TRPV1通过下丘脑细胞内Ca2+浓度升高,导致作用于腹中膈区的AVP含量增多,这可能是其发挥限热作用的途径之一。
李爱萍[9]（2009）在《高温、运动对大鼠心肌HSP70及相关指标的影响》文中研究表明目的:本研究从急性力竭运动大鼠心肌HSP70等相关指标的变化探讨运动热应激发生时心肌是否存在损伤进而是否会影响机体的运动能力。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为安静对照组C、运动即刻组E、高温暴露l小时组H、高温运动即刻组HE,运动后恢复24小时组E’、高温运动后恢复24小时组HE’,每组8只。E、HE、E’、HE’组均进行跑台运动。H组进行高温暴露。C、E、HE、H组在即刻进行宰杀,HE’、E’分别在高温及常温下运动后均在常温下恢复24小时后进行宰杀。测试大鼠心肌组织中的HSP70、MDA、SOD、Na+-K+-ATP酶活性及血清ANP和CK-MB。结果:1.E组HSP70表达量比C组显着性升高P<0.05且E’组极显着性升高P<0.01;HE’组极显着性高于H组及E’组P<0.0l。H组极显着高于C组P<0.01。2.H组的SOD水平极显着低于C组P<0.01;HE组则显着低于C组P<0.05。HE组的MDA含量显着高于H组及HE’组P<0.05。3.E组ANP和CK-MB水平极显着性高于C组P<0.01;HE组则显着高于H组P<0.05;E’组和HE’组分别比E组和HE组极显着性的降低P<0.0l。4.E组的Na+-K+-ATP酶的活性显着性低于C组P<0.05;H组极显着性低于C组P<0.01。结论:1.高温导致了心肌组织SOD的下降,运动导致了MDA升高、Na+-K+-ATPase活性下降、CK-MB显着升高,心肌细胞产生部分脂质过氧化损伤,细胞膜完整性遭到一定程度破坏,大鼠运动能力下降。2.运动造成心钠素大量释放,改善了心肌缺血缺氧状态,同时高温和运动均导致了HSP70高表达并在24小时后达到高峰,对心肌损伤起到一定的保护作用3.24小时后HSP70升高,SOD升高,MDA含量下降,心钠素、CK-MB、Na+-K+-ATP酶含量恢复正常。心肌损伤可能为暂时性损伤。
杨柳[10]（2009）在《热应激对鼠精液品质的影响及其与HSP70相关性分析》文中研究说明热应激是指动物受到超过自身体温调节能力的高温刺激时,引起机体产生的非特异性应答反应。动物在高温环境下,由于体温调节及生理机能趋于紊乱而引发的一系列的异常反应,并伴随着生产性能下降,严重时甚至出现热休克或死亡,对畜牧业危害较大。随着全球气候温室效应的不断加剧及高度集约化动物生产的发展,目前热应激已成为动物生产关注的一个焦点问题。本试验拟采用小鼠和大鼠为研究对象,建立高温条件下热应激对精液品质影响的动物模型,并研究不同温度条件下精液品质变化规律与热应激蛋白70家族（HSP70）在蛋白与基因水平的表达规律,为进一步探讨热应激对大动物精液品质的影响奠定基础。实验结果表明:温度越高,精液品质越低;在热应激处理时,精液品质随着热应激处理时间的增加呈现先降低后有所回升的变化趋势,且精液品质回升起始于HSP70 mRNA转录量、HSP70表达量达到最高值后趋于稳定表达期。综合分析表明:高温条件下,首先诱导机体内HSP70 mRNA转录量增加,进而促进HSP70表达,最终起到缓解机体遭受到胁迫时所产生的不利影响,起到保护作用。鉴于大型动物淋巴细胞易于采集,且淋巴细胞HSP70 mRNA受热应激影响反应迅速,随着应激时间增加呈规律性变化,可以考虑把淋巴细胞HSP70 mRNA作为评估热应激的分子生物学指标。
二、热损伤温度对新生SD大鼠下丘脑神经元膜上ATP激活单通道活动的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、热损伤温度对新生SD大鼠下丘脑神经元膜上ATP激活单通道活动的影响（论文提纲范文）
（1）基于电压阈值测定法的外界因素对神经网络电兴奋性的影响及其相关分子机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文对照缩略词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 神经元及神经网络 |
| 1.1.1 神经元 |
| 1.1.2 神经网络 |
| 1.1.2.1 神经网络的形成 |
| 1.1.2.2 神经元网络中神经元的组成方式 |
| 1.1.2.3 体外人工神经元网络 |
| 1.2 神经电信号 |
| 1.2.1 神经电信号的产生 |
| 1.2.2 神经网络的兴奋性 |
| 1.3 神经电信号的测量 |
| 1.4 神经芯片技术的发展和应用 |
| 1.4.1 神经芯片技术的发展 |
| 1.4.1.1 MEA电极形状设计 |
| 1.4.1.2 国内MEA设计 |
| 1.4.2 神经芯片技术的应用 |
| 1.4.2.1 对神经网络发育周期的研究 |
| 1.4.2.2 对神经网络图案化培养的研究 |
| 1.4.2.3 电刺激对神经网络影响的研究 |
| 1.4.2.4 温度对神经网络影响的研究 |
| 1.4.2.5 药物对神经网络影响的研究 |
| 1.4.2.6 酒精和其它化合物对神经网络影响的研究 |
| 1.5 神经元的细胞组学研究 |
| 1.5.1 高内涵技术 |
| 1.5.2 兴奋性相关分子生物学指标及其检测方法 |
| 1.6 本论文研究内容和目标 |
| 参考文献 |
| 第2章 电压阈值测定法与神经网络标准阈值测定 |
| 2.1 引言 |
| 2.1.1 神经电兴奋性相关研究关注的信号 |
| 2.1.2 神经电兴奋性相关研究中对记录到的信号进行甄别的重要性 |
| 2.1.3 目前基于神经芯片技术的神经电兴奋性研究方法的局限性 |
| 2.1.4 电压阈值测定法 |
| 2.1.5 本研究采用的电刺激波形和方式 |
| 2.1.6 本研究关注的信号—诱发信号 |
| 2.1.7 本研究选用的神经网络 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 仪器、试剂及细胞株 |
| 2.2.2 神经芯片的制备与VTMM测试系统连接 |
| 2.2.3 标准电压阈值的测量 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第3章 乙酰胆碱对神经网络兴奋性和细胞分子生物学指标影响的联合分析 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 仪器、试剂、细胞和动物 |
| 3.2.2 三种神经芯片的制备 |
| 3.2.3 VTMM测试系统的连接与测试方法 |
| 3.2.4 高内涵系统的仪器连接、参数设置、细胞分子指标的检测及统计分析方法 |
| 3.2.4.1 仪器连接与参数设置 |
| 3.2.4.2 ACh急性作用对细胞存活率影响的研究——PI/Hoechst染色 |
| 3.2.4.3 ACh急性作用对细胞突起长度和面积影响的研究——鬼笔环肽/DAPI染色 |
| 3.2.4.4 ACh急性作用对ROS含量影响的研究——ROS染色 |
| 3.2.4.5 ACh急性作用对Ca2+含量影响的研究——Ca2+染色 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 ACh作用下神经网络兴奋性变化的研究 |
| 3.3.2 ACh急性作用对神经网络中细胞和分子生物学指标影响的研究 |
| 3.3.2.1 ACh急性作用对细胞存活率影响的HCS图像分析结果 |
| 3.3.2.2 ACh急性作用对细胞突起长度和面积影响的HCS图像分析结果 |
| 3.3.2.3 ACh急性作用对细胞ROS和 Ca2+含量影响HCS图像分析结果 |
| 3.3.3 ACh急性作用对神经网络兴奋性影响的相关分子机理讨论 |
| 3.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第4章 酒精对神经网络兴奋性和细胞分子生物学指标影响的联合分析 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 仪器、试剂、细胞和动物 |
| 4.2.2 三种神经芯片的制备 |
| 4.2.3 VTMM测试系统的连接与测试方法 |
| 4.2.4 高内涵系统的仪器连接、参数设置、细胞分子指标的检测及统计分析方法 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 酒精作用下神经网络兴奋性的研究 |
| 4.3.2 酒精急性作用对神经网络中细胞和分子生物学指标影响的研究 |
| 4.3.2.1 酒精急性作用对细胞存活率影响的HCS图像分析结果 |
| 4.3.2.2 酒精急性作用对细胞突起长度和面积影响的HCS图像分析结果 |
| 4.3.2.3 酒精急性作用对细胞ROS和 Ca2+含量影响HCS图像分析结果 |
| 4.3.3 酒精作用下神经网络兴奋性的相关分子机理讨论 |
| 4.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第5章 温度对神经网络兴奋性和细胞分子生物学指标影响的联合分析 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 仪器、试剂、细胞和动物 |
| 5.2.2 三种神经芯片的制备 |
| 5.2.3 VTMM测试系统的连接与测试方法 |
| 5.2.4 高内涵系统的仪器连接、参数设置、细胞分子指标的检测及统计分析方法 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 温度作用下神经网络兴奋性的研究 |
| 5.3.2 温度急性作用对神经网络中细胞和分子生物学指标影响的研究 |
| 5.3.2.1 温度急性作用对细胞存活率影响的HCS图像分析结果 |
| 5.3.2.2 温度急性作用对细胞突起长度和面积影响的HCS图像分析结果 |
| 5.3.2.3 温度急性作用对细胞ROS和 Ca2+含量影响HCS图像分析结果 |
| 5.3.3 温度急性作用对神经网络兴奋性影响的相关分子机理讨论 |
| 5.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第6章 总结与展望 |
| 6.1 总结 |
| 6.2 展望 |
| 攻读博士期间发表论文 |
| 致谢 |
| 附录一 |
| 附录二 综述 论文研究相关的神经电生理基础理论 |
| 参考文献 |
（2）基于“Src-NR2-nNOS”信号通路的芍药甘草配伍调控“GABA-Glu”平衡的神经保护作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 文献综述 |
| 1 芍药甘草汤的研究进展 |
| 1.1 芍药甘草汤的药理作用和临床应用 |
| 1.2 芍药甘草汤的药效组分与中枢神经系统保护作用 |
| 参考文献 |
| 2 兴奋性神经损伤与神经保护剂的研究进展 |
| 2.1 兴奋性毒性 |
| 2.2 兴奋性神经损伤与中枢系统疾病 |
| 2.3 兴奋性氨基酸受体抑制剂的神经保护作用 |
| 2.4 中药谷氨酸能神经保护剂的开发 |
| 参考文献 |
| 3 基于“Src-NR2-nNOS”调控“GABA-Glu”平衡的研究进展 |
| 3.1 兴奋性氨基酸受体 |
| 3.2 抑制性氨基酸受体 |
| 3.3 “Src-NR2-nNOS”路径 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 芍药甘草汤的制备及质量控制 |
| 实验二 芍药甘草配伍含药血清对NMDA兴奋性神经损伤的保护作用 |
| 1. 芍药甘草配伍含药血清对PC12细胞活性的影响 |
| 2. 芍药甘草配伍含药血清对PC12细胞凋亡的影响 |
| 3. 药甘草配伍含药血清对PC12细胞Ca~(2+)浓度的影响 |
| 实验三 芍药甘草配伍含药血清对“Src-NR2-nNOS”信号的调控作用 |
| 1. 芍药甘草配伍含药血清对Src、NR2A、NR2B、nNOS mRNA表达的影响 |
| 2. 芍药甘草配伍含药血清对p-Src、p-NR2A、p-NR2B、p-nNOS蛋白表达的影响 |
| 结语 |
| 创新点及论文特色 |
| 存在的问题与不足 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）骨癌痛模型酸感受离子通道表达变化和SDF-1对钠离子通道电流调节机制的研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究一 大鼠骨癌痛模型中酸感受离子通道的表达变化 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 研究二 SDF-1及其下游信号通路对于Nav1.8电流的调节作用 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 研究三 SDF-1及其下游信号通路对于Nav1.9电流的调节作用 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表论文 |
| 致谢 |
（4）近红外激光调节可兴奋细胞膜钠离子通道功能的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| TABLE OF CONTENTS |
| 图目录 |
| 表目录 |
| 主要符号表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景与意义 |
| 1.2 国内外相关研究进展 |
| 1.3 光与生物组织的相互作用 |
| 1.4 本文主要研究思路与内容 |
| 2 离子通道与膜片钳技术 |
| 2.1 细胞的兴奋性 |
| 2.1.1 离子通道 |
| 2.1.2 离子通道的特征 |
| 2.1.3 离子通道的分类 |
| 2.1.4 离子的主动输运和被动输运 |
| 2.1.5 静息膜电位 |
| 2.1.6 动作电位 |
| 2.2 电压门控钠离子通道 |
| 2.2.1 钠离子通道的分类 |
| 2.2.2 电压门控钠离子通道的结构 |
| 2.2.3 电压门控钠离子通道的特性 |
| 2.2.4 钠通道相关的离子通道病 |
| 2.3 膜片钳技术 |
| 2.3.1 膜片钳技术原理 |
| 2.3.2 膜片钳技术基本记录模式 |
| 2.3.3 细胞膜的电学模型 |
| 2.3.4 膜片钳技术实验记录过程 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 空电极方法测量激光诱导的溶液温升 |
| 3.1 玻璃微电极几何尺寸的温度敏感性分析 |
| 3.2 玻璃微电极电阻与温度的关系 |
| 3.3 玻璃微电极尺寸的扫描电镜测量 |
| 3.4 激光辐照影响空电极电流实验 |
| 3.5 温度标定实验 |
| 3.6 本章小结 |
| 4 激光辐照上升沿和下降沿对钠通道动力学特性的影响 |
| 4.1 实验材料以及设备 |
| 4.1.1 实验动物 |
| 4.1.2 实验试剂 |
| 4.1.3 实验溶液 |
| 4.1.4 实验仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 SD大鼠脑海马神经元细胞的制备 |
| 4.2.2 玻璃微电极的拉制涂胶和抛光 |
| 4.2.3 激光光源的外部调制 |
| 4.2.4 膜片钳实验 |
| 4.3 激光辐照上升沿和下降沿对钠电流动力学的影响 |
| 4.3.1 激光辐照的上升沿与下降沿作用下的钠电流记录 |
| 4.3.2 激光辐照在溶液内造成的温升测量 |
| 4.3.3 定量描述钠通道电流动力学特性的HH模型 |
| 4.3.4 激光辐照下钠电流激活和失活时间常数的定量描述 |
| 4.3.5 细胞外液温升与钠电流动力学特性变化之间的联系 |
| 4.3.6 钠电流动力学特性分析的特征电压 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 钠电流响应不同功率近红外激光刺激研究 |
| 5.1 实验材料以及设备 |
| 5.1.1. 药品试剂 |
| 5.1.2. 实验溶液 |
| 5.1.3. 实验仪器 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 HEK293细胞培养 |
| 5.2.2 实验记录的刺激电压和辐照激光设置 |
| 5.3 溶液内激光诱导的温度变化探测 |
| 5.3.1 溶液温升的理论计算 |
| 5.3.2 溶液温升的空电极测温 |
| 5.3.3 溶液温升与辐照激光功率的关系 |
| 5.4 激光作用下钠电流动力学特性变化的功率依赖特性 |
| 5.4.1 激光作用下钠电流激活时间常数的变化 |
| 5.4.2 激光诱导的溶液温升与钠电流动力学特性变化的联系 |
| 5.5 激光作用下钠电流峰值变化的功率依赖特性 |
| 5.5.1 不同功率激光对钠电流峰值的调制效果 |
| 5.5.2 不同功率激光作用后钠电流峰值恢复情况分析 |
| 5.5.3 激光辐照对钠电流失活恢复特性的影响 |
| 5.5.4 钠电流峰值和溶液温度变化的联系 |
| 5.6 本章小结 |
| 6 结论与展望 |
| 6.1 主要研究内容和结论 |
| 6.2 论文创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）TRPV4在大鼠脑中的表达及在次声损伤中的作用（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 实验一 次声暴露后大鼠脑组织 trpvs mRNA 水平的变化 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 TRPV4 在大鼠脑中的细胞定位及次声暴露对其表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 构建 trpv4 RNAi 载体以及 RNAi 对次声过氧化损伤的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（6）异氟烷致新生大鼠睾丸生殖细胞凋亡及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）克罗卡林在缺氧缺血性脑病新生鼠不同脑区的神经保护作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写词表 |
| 目录 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 结果 |
| 1. 各组新生鼠神经行为学评分比较 |
| 2. HE 染色病理变化及显微脑损伤评分 |
| 3. TTC染色 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）下丘脑TRPV1在LPS致大鼠发热过程中对体温及脑内AVP含量、[Ca2+]i的影响（论文提纲范文）
| 一、摘要 |
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 二、英文缩略语 |
| 三、论文 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 四、本研究创新性的自我评价 |
| 五、参考文献 |
| 六、附录 |
| 综述 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（9）高温、运动对大鼠心肌HSP70及相关指标的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 前言 |
| 2 文献综述 |
| 2.1 高温对机体各个系统的影响 |
| 2.1.1 热环境的定义 |
| 2.1.2 高温对机体不同系统的影响 |
| 2.2 热休克蛋白与心肌功能的关系 |
| 2.2.1 热休克蛋白的概念 |
| 2.2.2 热休克蛋白的分类 |
| 2.2.3 热休克蛋白的生物学功能 |
| 2.3 热休克蛋白在运动及高温中的相关研究 |
| 2.4 自由基对心脏功能的影响 |
| 2.4.1 自由基概述 |
| 2.4.2 自由基的清除系统 |
| 2.4.3 自由基产生的途径 |
| 2.4.4 高温及运动对机体主要的自由基的产生及清除系统的影响 |
| 2.5 高温及运动与心钠素、Na~+-K~+-ATP 酶及 CK-MB 的关系 |
| 2.5.1 心钠素概述 |
| 2.5.2 高温及运动对心钠素、Na~+-K~+-ATP 酶及 CK-MB 的影响 |
| 3 实验材料及研究方法 |
| 3.1 实验动物 |
| 3.2 动物分组、实验方案及取材 |
| 3.2.1 动物分组 |
| 3.2.2 动物训练及实验方案 |
| 3.2.3 取材 |
| 3.3 主要试剂及仪器 |
| 3.4 指标的测试方法 |
| 3.4.1 western blotting 方法测试大鼠心室肌中 HSP70 |
| 3.4.2 心钠素的测试 |
| 3.4.3 SOD、MDA、Na~+-K~+-ATP 酶、CK-MB 的测定 |
| 3.4.3.1 蛋白定量——考马司亮兰法 |
| 3.4.3.2 超氧化物歧化酶(SOD) 测定 |
| 3.4.3.3 丙二醛(MDA) 测定 |
| 3.4.3.4 Na~+-K~+-ATP 酶的测定 |
| 3.4.3.5 CK-MB 的测定 |
| 3.5 统计学处理 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 大鼠肛温及运动时间的变化 |
| 4.1.1 大鼠运动力竭时间 |
| 4.1.2 大鼠高温暴露、运动前后及 24 小时恢复后的体温变化 |
| 4.2 高温、运动对大鼠心肌 HSP70 的影响 |
| 4.3 高温、运动对大鼠血浆心钠素的影响 |
| 4.4 高温、运动对大鼠心肌 SOD、MDA、Na~+-K~+-ATPase 的影响 |
| 4.5 高温、运动对大鼠血浆 CK-MB 的影响 |
| 5 分析与讨论 |
| 5.1 高温、运动对大鼠体温和运动时间的影响 |
| 5.2 高温、运动对大鼠心肌 HSP70 的影响 |
| 5.3 高温、运动对大鼠血浆心钠素的影响 |
| 5.4 高温、运动对大鼠心肌 SOD、MDA、Na~+-K~+-ATP 酶活性的影响 |
| 5.5 高温、运动对大鼠血浆 CK-MB 的影响 |
| 6 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果 |
（10）热应激对鼠精液品质的影响及其与HSP70相关性分析（论文提纲范文）
| 内容提要 |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第1章 热应激及其影响 |
| 第2章 模式生物与动物模型 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第1章 热应激小鼠动物模型的建立及精液品质检测 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 小结 |
| 第2章 HSP70 mRNA转录水平检测 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第3章 HSP70蛋白水平表达检测 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 导师及作者简介 |
| CURRICULUM |
四、热损伤温度对新生SD大鼠下丘脑神经元膜上ATP激活单通道活动的影响（论文参考文献）
- [1]基于电压阈值测定法的外界因素对神经网络电兴奋性的影响及其相关分子机理研究[D]. 安帅. 东南大学, 2018
- [2]基于“Src-NR2-nNOS”信号通路的芍药甘草配伍调控“GABA-Glu”平衡的神经保护作用[D]. 周恬恬. 北京中医药大学, 2016(08)
- [3]骨癌痛模型酸感受离子通道表达变化和SDF-1对钠离子通道电流调节机制的研究[D]. 邱方. 中国人民解放军医学院, 2015(10)
- [4]近红外激光调节可兴奋细胞膜钠离子通道功能的实验研究[D]. 李新宇. 大连理工大学, 2015(07)
- [5]TRPV4在大鼠脑中的表达及在次声损伤中的作用[D]. 刘扬. 第四军医大学, 2012(02)
- [6]异氟烷致新生大鼠睾丸生殖细胞凋亡及机制研究[D]. 杨柳. 华中科技大学, 2012(07)
- [7]克罗卡林在缺氧缺血性脑病新生鼠不同脑区的神经保护作用研究[D]. 陈晓仰. 汕头大学, 2011(01)
- [8]下丘脑TRPV1在LPS致大鼠发热过程中对体温及脑内AVP含量、[Ca2+]i的影响[D]. 曹志友. 中国医科大学, 2010(10)
- [9]高温、运动对大鼠心肌HSP70及相关指标的影响[D]. 李爱萍. 北京体育大学, 2009(10)
- [10]热应激对鼠精液品质的影响及其与HSP70相关性分析[D]. 杨柳. 吉林大学, 2009(09)