一、窒息对新生大鼠脑组织含水量及IL-1β影响的实验研究（论文文献综述）
周东蕊[1]（2021）在《血塞通对MCAO大鼠和OGD/R损伤SH-SY5Y细胞LINGO-1，EGFR，PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的研究》文中认为研究目的:1.观察血塞通注射液对大鼠大脑中脉闭塞（MCAO）28天神经功能的影响,探究血塞通对损伤皮层LINGO-1,EGFR,PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的调节作用。2.观察血塞通注射液对体外培养SH-SY5Y细胞氧糖剥夺再灌注（OGD/R）损伤的保护作用,验证血塞通注射液对OGD/R损伤的SH-SY5Y细胞PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的调节作用。研究方法:1.采用改良的Longa法对SD大鼠进行MCAO模型的制备,假手术组大鼠只进行皮肤切开以及钝性分离血管和神经,不插入栓线。大鼠MCAO模型的成功建立评价方法选用TTC染色法。2.根据术后Longa评分将手术组大鼠随机分为模型组,血塞通小剂量组,血塞通大剂量组和尼莫地平组（即阳性药物组）。假手术组和模型组注射同等剂量的生理盐水,其余组别给与相对应的药物治疗。术后1-28天,每日清晨给药前对大鼠进行称重,根据mNSS神经功能评分表进行评分。评价血塞通对大鼠MCAO术后不同时间点（7天,14天和28天）神经功能和体重恢复的疗效。MCAO术后28天,将所有大鼠麻醉后断头取脑,采用HE染色观察大鼠大脑皮层的病理变化,采用Western blot法检测皮层梗死侧的SYN和PSD-95的蛋白表达变化,探索血塞通注射液对皮层梗死区的神经保护作用。采用qRT-PCR、免疫组织化学（IHC）和Western Blot检测MCAO术后28天大鼠大脑皮层LINGO-1,EGFR以及PI3K/AKT的mRNA和蛋白表达,探索血塞通的神经保护机制。3.采用qRT-PCR和Western Blot检测MCAO术后28天大鼠大脑皮层PTEN和GSK-3β的mRNA和蛋白表达,进一步探索血塞通的神经保护机制。4.体外培养SH-SY5Y细胞,CCK-8法确定最佳缺氧时间,建立OGD/R损伤SH-SY5Y细胞模型,CCK-8法确定血塞通和bpV的最适药物浓度。将SH-SY5Y细胞随机分为正常组,模型组,血塞通组,bpV组以及血塞通+bpV组等5个组别,按照不同组别给与相对应的药物,正常组给与无血清的EBSS液,模型组给与无糖的Earle’s液。镜下观察血塞通对OGD/R损伤SHSY-5Y细胞生长状态的影响。采用qRT-PCR和Western Blot检测OGD/R损伤SH-SY5Y细胞的PI3K/AKT以及PTEN和GSK-3β的mRNA和蛋白表达对体内实验进一步验证,观察当使用bpV时,PTEN及其下游的PI3K/AKT通路、GSK-3β mRNA和蛋白的表达情况。研究结果:1.TTC染色显示:假手术组大鼠右脑为均一的红色,表明脑组织并未损伤;手术组大鼠由于大脑右侧被梗塞而出现广泛的白色,表明MCAO可诱导大鼠右侧脑组织梗死。研究结果证明大鼠MCAO模型成功建立。2.各组大鼠的体重在造模前未见显着的差异（P>0.05）;在MCAO术后第7天和第14天,各组大鼠体重均明显低于假手术组（P<0.05或者P<0.01）;术后第28天,除模型组外,各药物治疗组大鼠的体重与假手术组没有明显差异（P>0.05）。术后第14天的假手术组大鼠的体重高于第7天假手术组的体重,余组别两个时间点比较未见明显差异（P>0.05）;而第28天各组大鼠的体重均显着高于第14天相同组别的大鼠（P<0.01）。手术组各组大鼠苏醒后EZ-Longa评分组间未见明显差异（P>0.05）。在第7天的mNSS评分中,血塞通大剂量组明显低于模型组（P<0.05）。药物治疗后14天,血塞通治疗组（包括小剂量和大剂量）和尼莫地平组大鼠的mNSS评分与模型组相比显着降低（P<0.05）。而药物治疗后28天,血塞通治疗组大鼠的mNSS评分与模型组相比明显降低（P<0.05或P<0.01）;血塞通大剂量组在降低大鼠的mNSS评分方面显着优于血塞通小剂量组和尼莫地平组（P<0.05）。这说明血塞通治疗可长期缓解MCAO大鼠的神经功能障碍,且具有剂量依赖性。MCAO术后相同组别的mNSS评分在不同时间点的比较显示:第7天和第14天同一组别的mNSS评分无显着差异（P>0.05）;除尼莫地平组外,第28天的mNSS评分显着高于同一组别第14天的mNSS评分（P<0.05）。MCAO术后28天,HE染色结果显示:假手术组大鼠的脑组织形态和细胞结构完整。模型组大鼠脑组织呈大面积损伤,组织着色较浅,神经细胞坏死、核固缩、深染;治疗组大鼠的脑组织也出现一定的损伤,但是和模型组相比,损伤程度较轻,神经细胞的数量也多;与血塞通小剂量组和尼莫地平组相比,血塞通大剂量组的脑组织结构更完整,神经细胞数量亦明显增多。MCAO术后28天,与模型组相比较,各治疗大鼠的PSD-95蛋白表达显着升高（P<0.01）;对各治疗进行比较发现,血塞通大剂量组在提高PSD-95表达方面显着优于血塞通小剂量组和尼莫地平组（P<0.05或P<0.01）。与模型组相比,血塞通大剂量组和尼莫地平组可显着提高大鼠大脑皮层SYN蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）;与血塞通小剂量组相比,血塞通大剂量组在提高SYN蛋白表达方面具有显着的优势（P<0.05）。MCAO术后28天,qRT-PCR结果显示:各组LINGO-1,EGFR,PI3K以及AKT mRNA表达无显着变化（P>0.05）。IHC结果显示:LINGO-1的阳性颜色为深棕色,假手术组大鼠脑组织LINGO-1的阳性表达较少;各治疗组大鼠脑组织LINGO-1的阳性表达显着低于模型组的阳性表达（P<0.01）;而对各治疗组之间皮层LINGO-1的阳性表达进行比较发现,组间未见显着差异（P>0.05）。各组大鼠脑组织P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT的阳性颜色均为深棕色,假手术组大鼠脑组织P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT呈低表达;各治疗组大鼠大脑皮层P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT的表达显着高于模型组（P<0.01）;对各治疗组之间的P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT的表达进行比较发现,组间未见显着差异（P>0.05）。Western blotting结果显示:各治疗组大鼠的Lingo-1蛋白的相对表达相较于模型组显着下降（P<0.01）,接近正常水平;而各治疗组之间进行比较,Lingo-1的表达未见明显差异（P>0.05）。各治疗组的P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT高于模型组（有趋势,或P<0.05,或P<0.01）;治疗组之间比较无明显差异（P>0.05）。3.MCAO术后28天,qRT-PCR结果显示:除血塞通大剂量组的大鼠脑组织的PTEN mRNA表达明显高于假手术组的mRNA（P<0.05）,其余各组大鼠脑组织的PTEN mRNA表达组间比较未见显着差异（P>0.05）;各组大鼠脑组织的GSK-3β mRNA表达组间亦未见显着差异（P>0.05）。Western blotting结果显示:与模型组相比,各治疗组的P-PTEN和P-GSK3β相对蛋白表达水平显着升高（P<0.05或P<0.01）;而各治疗组之间的P-PTEN和P-GSK3β相对蛋白水平无明显差异（P>0.05）。4.CCK-8法检测SH-SY5Y细胞的最佳缺氧时间为7 h;血塞通和bpV对OGD/R损伤的SH-SY5Y细胞的最适药物浓度分别为20μg/ml和1μmol/L。通过镜下观察血塞通,bpV以及血塞通+bpV对OGD 7 h/R 24 h培养的SH-SY5Y细胞生长状态的影响发现,血塞通组、bpV组以及血塞通+bpV组的贴壁细胞数量较模型组多,大部分细胞呈多边形或梭形,部分细胞突触缩短,但大部分细胞突触仍存在,各治疗组之间的细胞形态未见明显的差异。SH-SY5Y细胞OGD 7h/R24 h培养后,qRT-PCR结果显示:正常组,模型组,血塞通组,bpV组以及血塞通+bpV组细胞的PI3K,AKT,PTEN和GSK-3β mRNA的水平未见显着差异（P>0.05）。Western blotting检测结果显示,与模型组相比,各治疗组大鼠大脑皮层的 P-PI3K/PI3K,P-AKT/AKT,P-PTEN/PTEN 以及 P-GSK-3β/GSK-3β蛋白水平显着升高（P<0.05,或P<0.01）;各治疗组之间的P-PI3K/PI3K,P-AKT/AKT,P-PTEN/PTEN以及P-GSK-3β/GSK-3β蛋白水平比较未见明显差异（P>0.05）。研究结论:1.血塞通可以长期缓解MCAO大鼠的脑组织损伤并促进神经重塑和再生从而增加MCAO术后大鼠的体重,改善MCAO大鼠的神经功能。2.血塞通发挥的神经保护作用机制包括抑制LINGO-1表达,激活EGFR和PI3K/AKT信号通路,抑制PTEN的表达进一步激活PI3K/AKT通路,从而抑制下游GSK-3β的活性,长期促进突触的重塑和再生。3.血塞通可以缓解OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞损伤,通过抑制PTEN的活性,激活其下游PI3K/AKT/GSK-3β信号通路,发挥长期的神经保护作用。
杜宁[2]（2021）在《益母草碱对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用及机制研究》文中研究指明背景与目的:缺氧缺血性脑损伤（Hypoxic-Ischemic Brain Injury,HIBI）是新生儿期间一种严重的脑损伤,有着复杂的生理、细胞和分子变化。这可能导致新生儿过早死亡或各种终身疾病,包括癫痫发作、意识改变、呼吸微弱、肌肉无力和代谢紊乱等急性症状,以及脑瘫、癫痫、智力残疾和行为障碍等在内的慢性症状[1,2]。为了创建新的神经保护和干预策略来对抗大脑缺血缺氧的进展,在基础科学中已经有了广泛而深入的研究,但为了改善潜在的脑损伤症状,仍有更多方面的研究需要进行。本研究实验旨在探讨益母草碱（leonurine）对新生大鼠HIBI的保护作用及机制。材料与方法:本实验将60只新生大鼠随机分为假手术（sham-operated,SO）组、HIBI组和Leonurine组,每组20只。HIBI组和Leonurine组采用Rice-Vannucci方法构建HIBI模型。在HIBI建模后,立即给予Leonurine组新生大鼠5mg/kg益母草碱腹腔注射。在HIBI模型建立48小时后,每组取出5只新生大鼠行斩首处理并测量脑含水量,另取5只行斩首处理测量大脑梗死比率。再每组取5只新生大鼠行斩首处理后测量脑组织氧化应激和炎症反应指标。脑组织中超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）,采用黄嘌呤氧化酶法测定。脑组织中丙二醛（Malondialdehyde,MDA）用硫代巴比妥酸法测定。脑组织中肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素1β（Interleukin-1β,IL-1β）,采用酶联免疫吸附法测定。最后每组取出5只新生大鼠行斩首后测定大脑皮层神经细胞凋亡率。采用Western-blot法测定大脑皮层组织中蛋白激酶B（p-Akt）、磷酸化糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase-3βphosphorylation,p-GSK3β）、B细胞淋巴瘤-2基因（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）和cleaved-caspase-3的水平。结果:1、在实验后观察Leonurine组新生大鼠的动物行为学较HIBI组新生大鼠缺血缺氧症状明显减轻。2、HIBI组与SO组相比新生大鼠脑含水量和脑梗死比均显着增加;Leonurine组与HIBI组相比均显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）。3、HIBI组与SO组相比脑组织MDA水平显着升高;而脑组织SOD水平则显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）。Leonurine组与HIBI组相比脑组织MDA水平显着降低;而脑组织SOD水平则显着提高,差异有统计学意义（P<0.05）。4、HIBI组新生大鼠脑组织TNF-α和IL-1β水平均明显高于SO组;Leonurine组均明显低于HIBI组,差异有统计学意义（P<0.05）。5、HIBI组神经细胞凋亡率与SO组相比显着升高;Leonurine组与HIBI组相比明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。6、HIBI组新生大鼠大脑皮质p-Akt和p-GSK3β蛋白表达水平与SO组相比分别显着升高;Leonurine组与HIBI组相比显着升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.益母草碱可以通过减少氧自由基损伤、减少脑组织的炎症反应来减轻新生大鼠的HIBI症状。2.益母草碱可以增加p-Akt和p-GSK3β的表达,抑制cleaved-caspase-3的表达,促进Bcl-2的表达,从而减少神经细胞凋亡。
白梦思[3]（2021）在《高氧诱导新生大鼠脑损伤的PET/CT表现及其对远期认知功能的影响》文中研究表明目的:在新生儿救治过程中,常常需要氧疗。由于早产儿脑未发育成熟,易受高浓度氧气损伤,甚至遗留严重的远期神经障碍。早产儿高氧性脑损伤,起病隐匿、临床表现无特异性,目前尚无准确敏感的早期诊断方法。正电子发射型计算机断层显像（positron emission omography/computed tomography,PET/CT）可以通过检测组织中葡萄糖代谢的改变,已用于多种中枢神经系统疾病的早期诊断和预后评估,是否可以用于高氧性脑损伤的早期诊断,尚不清楚。高氧性脑损伤的发病过程中是否存在葡萄糖代谢的改变,目前尚不清楚。本研究在建立高氧性脑损伤动物模型的基础上,首先采用PET/CT检测在高氧性脑损伤过程中的脑组织葡萄糖代谢的改变,进而探讨其在用于高氧性脑损伤的早期诊断的价值,同时探讨高氧导致脑损伤后远期认知功能的改变。方法:建立高氧诱导的新生SD大鼠脑损伤模型。将生后12小时内的新生SD大鼠随机分为空气组和高氧组。高氧组同母鼠置于自制氧箱中,持续通入氧气,测氧仪监测氧浓度维持于85%～90%,并利用钠石灰吸收二氧化碳。空气组置于同样环境的空气中,氧浓度21%左右。每24小时开箱30分钟,观察、称重、交换母鼠、添加食物,3天更换一次垫料。连续高氧暴露14天后,每组随机各取12只新生SD大鼠,收集脑组织,6只用于测量脑组织含水量,反映脑水肿情况;6只用于HE染色观察脑组织形态。每组剩下的6只于生后14天进行PET/CT扫描,以观察脑组织不同区域葡萄糖代谢率改变;PET/CT扫描结束后继续饲养于空气中,于生后2月再次进行PET/CT扫描;并于生后28～32天进行水迷宫实验,探究青春期认知功能。结果:1.生长发育情况:随高氧暴露,高氧组新生SD大鼠生长发育受限,逐渐出现震颤、行走不稳、四肢不协调;而空气组一般情况良好,未出现以上情况。高氧暴露后,直至成年,高氧组体重均低于空气组（P<0.05）。2.脑组织含水量变化:在高氧暴露14天后,高氧组新生SD大鼠脑组织含水量高于空气组（P<0.05）。3.脑组织病理学改变:与空气组新生SD大鼠脑组织相比,高氧组大鼠脑细胞排列紊乱,胞质淡染水肿,呈现脑水肿病理特征。4.脑组织葡萄糖代谢:与空气组SD大鼠脑组织葡萄糖代谢率相比,高氧组全脑、大脑、小脑的葡萄糖代谢率在生后14天及2月时均降低（P<0.05）。5.水迷宫实验结果:在定位航行实验的第3～4天,与同时间点空气组大鼠相比,高氧组大鼠的逃避潜伏期均增加（P<0.05）;进行空间探索实验时,与空气组大鼠相比,高氧组大鼠穿越原平台的次数显着降低（P<0.05）。结论:高氧暴露的大鼠,脑组织发生损伤,全脑、大脑、小脑葡萄糖代谢率均降低;18F-FDG PET/CT可用于探究新生儿高氧性脑损伤的早期诊断和机制;未发育成熟的脑长期高氧暴露会导致远期认知功能障碍,在啮齿动物表现为对空间的学习和记忆能力下降。
周丹丹[4]（2020）在《TSPO在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用及机制研究》文中研究说明目的:大量研究结果显示小胶质细胞的激活与新生儿缺氧缺血有关,受损脑组织内小胶质细胞存在经典激活（M1）和替代激活（M2）两种表型,分别发挥促炎和抗炎、修复功能。在缺氧的早期,小胶质细胞迅速激活,表现为M1型,约24小时后转为M2型。从分子水平分析HIE中小胶质细胞活化的相关机制,可为此类患儿的治疗提供新的靶点。研究显示TSPO在静息小胶质细胞中的表达很低,当小胶质细胞因神经系统受损而出现活化时,TSPO水平经检测呈现明显升高,表明小胶质的激活与TSPO的表达可能存在一定的联系。另有研究显示PPARγ通路的激活还可参与血肿的清除及神经功能的保护。因此本课题组通过体内、体外实验来探讨外周型苯二氮?受体转运蛋白（TSPO）是否介导PPARγ通路来调节小胶质细胞向M2型极化,从而为新生儿缺血、缺氧的治疗寻找新的靶点。方法:（1）体内实验:本次实验我们选择Rice-Vannucci法来建立新生Wistar大鼠缺血缺氧模型,将处理后的大鼠分成四组:（1）A组（假手术组,n=20）;（2）B组（模型组,n=20）;（3）C组（模型+PBS注射组,n=20）;（4）D组[模型+Atriol（TSPO抑制剂）注射组,n=20]。各组大鼠造模后第3天后分两批处死,分别进行灌注取脑（用于免疫荧光分析）和断头取脑（用于蛋白检测）。对各组大鼠脑组织行尼氏染色检查,并检测大鼠脑组织含水量、伊文思蓝（EB）含量。通过Western blot法来检测造模后第3天不同组中PPARγ通路蛋白和凋亡相关蛋白BAX、Bcl-2及Caspase-3蛋白的表达情况。选择免疫荧光染色法对脑组织中Iba-1+CD16/32、Neu N+caspase-3及Iba-1+CD206的共定位表达情况进行检测。（2）体外实验:分离BALB/c小鼠原代小胶质细胞,将上述培养处于对数生长期的原代小胶质细胞按照1×104的细胞数接种于48孔板内,并选择20ng/ml的r IL-4对小胶质细胞分别处理0,6,12,以及24小时。将细胞分成五组:（1）Control组:为正常培养的小胶质细胞;（2）IL-4组:为经过20ng/ml的r IL-4诱导小胶质细胞极化M2表型模型;（3）IL-4+Atriol组:为经过r IL-4诱导小胶质细胞极化M2表型模型加Atriol（50μM）处理;（4）IL-4+FGIN-1-27组:为经过r IL-4诱导小胶质细胞极化M2表型模型加FGIN-1-27（1μM）处理;（5）IL-4+HA-TSPO组:取转染处理后的小胶质细胞使用r IL-4进行诱导处理。将5组细胞置于37℃的细胞培养箱内继续培养12h。利用Western blot法检测各组TSPO、PPARγ蛋白的表达情况;通过实时定量PCR法检测各组TSPO、PPARγm RNA及M2极化型小胶质细胞标志物CD206、Arg-1、YM-1和FIZZ-1的表达情况;使用Elisa法检测各组中BDNF、CNTF-1、IGF-1和NGF-1细胞因子的表达水平。结果:1.体内实验:（1）造模后第3天B、C组大鼠的损伤侧可见明显的水肿,而D组大鼠的损伤侧水肿情况较B、C组大鼠显着减轻。经过统计分析,B、C及D组大鼠损伤侧脑含水量相较于A组大鼠显着升高;同时相较于B、C组大鼠,D组大鼠损伤侧脑含水量着降低（P<0.05）。同时B、C及D组大鼠损伤侧EB的含量相较于A组显着升高;而相较于B、C组大鼠,D组大鼠损伤侧的EB的含量显着降低（P<0.05）。Nissl染色结果则显示A组大鼠的海马区及大脑皮层的细胞整齐排列,具有正常的结构,而B、C、D组的上述细胞则可见结构出现紊乱,经统计分析3组细胞的丢失量显着高于A组大鼠（P<0.05）。然而D组大鼠右侧脑组织的细胞坏死及变性程度相较于B、C组大鼠显着减轻,且D组大鼠细胞的丢失量显着低于B、C组大鼠（P<0.05）。（2）相较于A组大鼠,B组、C组和D组大鼠脑组织中Neu N+Caspase-3荧光蛋白表达共定位的阳性细胞数表达水平显着增加,同时B组、C组大鼠脑组织中Neu N+Caspase-3荧光蛋白表达共定位的阳性细胞数表达水平显着高于D组大鼠（P<0.05）。A组大鼠的神经元基本未出现凋亡,而B组、C组和D组大鼠脑组织中Caspase-3、Bax蛋白的表达水平显着升高,Bcl-2蛋白的表达水平显着下降;同时B组、C组大鼠脑组织中caspase-3、Bax蛋白的表达水平相较于D组显着升高,Bcl-2蛋白的表达水平较于D组显着下降,差异均存在统计学意义（P<0.05）。（3）B组、C组新生Wistar大鼠脑组织在造模后的第3天,Iba-1+CD206及Iba-1+CD16/32荧光蛋白共定位阳性细胞的水平经对比无明显差异（P>0.05）;但B组、C组和D组新生Wistar大鼠脑组织Iba-1+CD206及Iba-1+CD16/32荧光蛋白共定位阳性细胞的水平显着高于A组（P<0.05）;同时B组、C组中荧光蛋白表达共位阳性细胞中Iba-1+CD16/32细胞的水平相较于Iba-1+CD206细胞显着升高;但在D组中,荧光蛋白表达共位阳性细胞中Iba-1+CD16/32细胞的水平相较于Iba-1+CD206细胞显着降低（P<0.05）。（4）B、C及D组大鼠脑组织中PPARγ蛋白的表达水平相较于A组均显着降低（P<0.05）,而TSPO蛋白的表达水平则显着升高（P<0.05）;同时D组大鼠脑组织中PPARγ蛋白的表达水平相较于B、C组显着升高（P<0.05）,而TSPO蛋白的表达水平则显着降低（P<0.05）。2.体外实验:（1）小胶质细胞在镜下主要呈现长梭形、圆形及阿米巴样,该细胞贴壁生长。为了对小胶质细胞的纯度进行检测,我们对其进行DAPI和Lectin荧光双标,检测结果显示我们获取的小胶质细胞纯度已超过96%。（2）将纯化后的小胶质细胞使用20ng/ml的r IL-4分别诱导0、6、12和24小时,检测TSPO和PPARγ蛋白及m RNA在小胶质细胞中的表达水平。Western blot结果表明,在r IL-4诱导6、12小时后,TSPO蛋白的表达逐渐降低,诱导24小时后略有恢复。r IL-4诱导后PPARγ蛋白表达水平显着升高,其最高表达水平在诱导12小时后。同时TSPO和PPARγ的m RNA表达水平变化与两者的蛋白表达水平一致。（3）为了进一步研究TSPO在极化为M2表型小胶质细胞中的功能,用不同TSPO配体处理小胶质细胞12小时,并测定PPARγ的表达水平。结果显示活化的PPARγ定位于细胞核并引起靶基因的激活或抑制。在免疫印迹实验前提取小胶质细胞的核蛋白和胞质蛋白,分析PPARγ蛋白在细胞质和细胞核中的表达水平。结果显示TSPO拮抗剂Atriol增强了极化为M2表型小胶质细胞中PPARγ蛋白的表达,而TSPO激动剂FGIN-1-27则抑制了PPARγ蛋白在细胞质和细胞核中的表达。TSPO在小胶质细胞中的过度表达可显着抑制r IL-4诱导后小胶质细胞细胞质和细胞核中PPARγ蛋白的表达。提示极化为M2表型小胶质细胞中PPARγ的表达和激活受到TSPO的调控。（4）为了确定r IL-4诱导的小胶质细胞M2极化是否受TSPO的调节,我们通过实时PCR方法检测TSPO干预后极化为M2表型小胶质细胞标志物的表达。与对照组相比,r IL-4明显增加小胶质细胞中CD206、Arg-1、YM-1和FIZZ-1基因的表达,表明小胶质细胞呈M2表型极化。同时TSPO拮抗剂Atriol增强了r IL-4诱导的小胶质细胞中CD206、Arg-1、YM-1和FIZZ-1基因的表达。与r IL-4诱导组相比,TSPO激动剂FGIN-1-27和TSPO过表组上述基因的表达显着降低。提示TSPO是参与小胶质细胞M2极化的重要调节因子。（5）我们使用TSPO配体对培养的小胶质细胞进行干预,检测培养液中脑源性神经营养因子（BDNF）、睫状神经营养因子1（CNTF-1）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）和神经生长因子1（NGF-1）的表达水平。与对照组相比,r IL-4可诱导小胶质细胞释放BDNF、CNTF-1、IGF-1和NGF-1;PK11195同样可增强BDNF、CNTF-1、IGF-1和NGF-1的表达水平,FGIN-1-27和TSPO过度表达组上述细胞因子的表达水平受到明显抑制。提示TSPO通路可能参与调控了小胶质细胞的促营养能力。结论:TSPO可能通过介导PPARγ通路调控新生大鼠缺氧、缺血后M2表型小胶质细胞的极化而对受损神经发挥保护作用。
赖馨[5]（2019）在《1.EPO联合亚低温对HIE模型神经保护作用及机制研究 2.α-细辛醚抑制小胶质细胞介导炎症反应的抗癫痫作用研究》文中研究表明第一章7日龄SD大鼠HIE模型的建立及评价目的:建立一种标准的HIE大鼠模型,为下一步EPO联合亚低温对HIE大鼠神经保护作用及机制研究奠定理论基础。方法:借鉴国内外经验,以7日龄SD大鼠为研究对象,通过行左侧颈总动脉双线结扎并离断后置于自制常压缺氧箱中,通入含8%O2+92%N2混合气体创造缺氧环境,持续2.5 h,制作HIE模型,采用Longa 5分法、鼠大脑外观、体质量变化测定、脑含水量测定、左右脑半球质量比较、组织病理学（HE染色、Nissl染色、TTC染色、透射电镜、TUNEL染色）检测、行为学实验（抓力、转棒、水迷宫实验）等方法以鉴定模型是否成功。结果:本实验中,7日龄SD大鼠建模后出现全身青紫或发黑、反应迟缓、身体左旋、运动障碍等症状符合临床上新生儿中重度HIE表现;模型组72 h可出现左脑萎缩,体重增长速度明显低于对照组,左脑含水量与对照组左脑含水量相比显着升高,左脑半球质量小于对照组;HE染色显示左侧脑组织皮层细胞水肿,神经元出现不规则排列;Nissl染色显示神经细胞水肿、变性甚至坏死,Nissl小体形态模糊或消失;TUNEL染色显示脑组织可见大量凋亡小体,呈棕黄色;电镜结果提示模型组大鼠海马CA1区细胞体积大,数量减少,胞浆内有空泡形成,粗面内质网减少,CA3区核糖体多,线粒体增多,粗面内质网减少。行为学实验结果提示模型组右前肢肌力减小,协调运动能力下降,学习记忆能力减退。结论:我们成功建立HIE模型,可用于中重度HIE实验研究,为下一步研究奠定基础。第二章EPO联合亚低温治疗对HIE模型神经保护作用及机制研究目的:研究EPO联合亚低温治疗对HIE模型神经保护作用及机制方法:采用TUNEL染色法对各组大鼠脑组织神经细胞凋亡情况进行检测,免疫组化法检测脑组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达以及Western blotting检测Jak2、NFκB、Bax、Bcl-2、cyt C表达,行为学实验观察前肢肌力、协调运动能力及空间学习记忆能力。结果:抓力测试结果提示,EPO治疗、亚低温治疗对HIE鼠右前肢肌力有改善作用（P<0.05）,EPO联合亚低温治疗对大鼠右前肢肌力有显着改善作用（P<0.01）。EPO治疗组、亚低温治疗组、EPO联合亚低温治疗对大鼠右前肢肌力的改善程度没有统计学意义（P>0.05）。转棒测试结果显示,EPO治疗组、亚低温治疗对大鼠协调运动能力有改善作用（P<0.05）,EPO联合亚低温治疗对大鼠协调运动能力有显着改善作用（P<0.01）。EPO治疗组、亚低温治疗组、EPO联合亚低温治疗在改善大鼠协调运动能力程度上无差异（P>0.05）。水迷宫实验结果提示,EPO治疗组、亚低温治疗对大鼠学习记忆能力有改善作用（P<0.05）,EPO联合亚低温治疗对大鼠学习记忆能力有显着改善作用（P<0.01）。EPO治疗组、亚低温治疗组、EPO联合亚低温治疗在改善大鼠学习记忆能力程度上无明显差异（P>0.05）。TUNEL染色结果表明,HIE组脑组织神经凋亡细胞数量大于假手术组（P<0.01）。EPO治疗组、亚低温治疗组脑组织神经凋亡细胞数量小于HIE组（P<0.05）,EPO联合亚低温治疗组脑组织神经凋亡细胞数量显着小于HIE组（P<0.01）。EPO治疗组、亚低温治疗组、EPO联合亚低温治疗组脑组织神经凋亡细胞数量组间比较无明显差异（P>0.05）。免疫组化结果显示,HIE组脑组织促凋亡蛋白Bax表达显着高于假手术组（P<0.01）。EPO治疗组、亚低温治疗组脑组织促凋亡蛋白Bax表达少于HIE组（P<0.05）,EPO联合亚低温治疗组脑组织促凋亡蛋白Bax表达显着少于HIE组（P<0.01）。EPO治疗组、亚低温治疗组、EPO联合亚低温治疗组脑组织促凋亡蛋白Bax表达量无明显差异（P>0.05）。HIE组脑组织抗凋亡蛋白Bcl-2表达显着少于假手术组（P<0.01）。EPO治疗组、亚低温治疗组脑组织抗凋亡蛋白Bcl-2表达多于HIE组（P<0.05）,EPO联合亚低温治疗组脑组织抗凋亡蛋白Bcl-2表达显着多于HIE组（P<0.01）。EPO治疗组、亚低温治疗组、EPO联合亚低温治疗组脑组织抗凋亡蛋白Bcl-2表达量无明显差异（P>0.05）。WB结果提示,HIE组大鼠脑组织Jak2、NFκB、Bax、cyt C蛋白的表达量显着大于假手术组（P<0.01）。EPO治疗组（P<0.05）、亚低温治疗组（P<0.05）、EPO联合亚低温治疗组（P<0.01）脑组织Jak2、NFκB、Bax、cyt C表达量小于HIE组。HIE组Bcl-2蛋白表达量小于假手术组（P<0.01）。EPO治疗组（P<0.05）、亚低温治疗组（P<0.05）、EPO联合亚低温治疗组（P<0.01）脑组织Bcl-2蛋白表达量大于HIE组。EPO治疗组、亚低温治疗组、EPO联合亚低温治疗组脑组织Jak2、NFκB、Bax、cyt C蛋白表达量无明显差异（P>0.05）。结论:1.EPO联合亚低温治疗能够显着改善HIE大鼠右前肢肌力、协调运动能力和学习记忆能力。2.EPO联合亚低温治疗显着减少了神经细胞凋亡,表明EPO联合亚低温对HIE大鼠神经细胞有保护作用。3.EPO治疗、亚低温治疗、EPO联合亚低温治疗在改善HIE大鼠右前肢肌力、协调运动能力和学习记忆能力、抑制神经细胞凋亡、调节脑组织Jak2、NFκB、Bax、Bcl-2、cyt C蛋白表达上无显着差异。4.EPO联合亚低温对HIE的神经保护作用可能与抑制细胞凋亡有关,该作用可能与上调Bcl-2蛋白表达,下调Jak2、NFκB、Bax、cyt C蛋白表达有关。目的:通过体内实验探讨α-细辛醚对癫痫大鼠脑组织内小胶质细胞介导的免疫炎症反应的作用,体外实验研究α-细辛醚对脂多糖（LPS）介导大鼠小胶质细胞免疫炎症反应的影响,从而明确α-细辛醚的抗癫痫作用及其抑制免疫炎症反应的关键环节及其作用靶点。方法:建立大鼠Li-Pilocarpine癫痫模型,随机分为正常对照组,模型组以及α-细辛醚干预组,免疫组化法观察各组大鼠脑组织内小胶质细胞活化情况,EMSA检测脑组织内NFκB活化、入核,Westernblotting检测i NOS和COX-2表达。原代培养大鼠小胶质细胞,LPS诱导其活化,随机分为正常对照组、模型组和不同浓度α-细辛醚干预组,免疫荧光观察小胶质细胞形态学变化,EMSA检测各组细胞NFκB活化入核情况,Western-blotting法检测各组细胞i NOS和COX-2表达。并应用HPLC-MS/MS方法测定腹腔给予100 mg/kgα-细辛醚后其在大鼠脑组织中的浓度曲线。结果:与对照组比较,癫痫大鼠脑内NFκB活化入核增多,α-细辛醚干预组大鼠脑内NFκB活化入核减弱（P<0.05）。与正常对照组比较,模型组小胶质细胞活化数目增多,胞内NFκB活化入核增加（P<0.05）。与模型组比较,不同浓度的α-细辛醚均可抑制小胶质细胞活化,并对胞内NFκB活化入核,i NOS和COX-2表达均有抑制作用（P<0.05）,其作用呈剂量依赖性,100μg/m Lα-细辛醚作用最明显。HPLC-MS/MS结果表明体内给予100 mg/kgα-细辛醚在体外剂量范围内（0.4,4,8,16,32,和64μg/ml）。结论:1.α-细辛醚可从体内及体外两方面抑制NFκB活化入核,呈剂量依赖性,以100μg/m Lα-细辛醚作用最明显。2.本研究揭示了α-细辛醚可能通过抑制NFκB活化入核发挥抗炎抗癫痫作用,为α-细辛醚抗癫痫的临床应用提供了理论基础,并为研发抗癫痫药物及有效治疗癫痫提供了新思路。
罗智花[6]（2020）在《调控PI3K/Akt信号通路对新生兔缺氧缺血脑损伤神经修复作用的研究》文中研究表明目的:围产期缺氧缺血性脑损伤（Hypoxic Ischemic Brain Damage,HIBD）是常见引起儿童严重神经系统后遗症的主要原因之一,给家庭和社会带来沉重负担。本实验模拟人类新生儿常见急性宫内缺氧病因,建立围生期兔HIBD模型,进一步研究PI3K/Akt信号通路是否参与新生兔HIBD机制,为HIBD提供科学的治疗靶点。方法:1.围产期兔HIBD模型的建立采用手术栓塞腹主动脉间接阻断孕兔子宫动脉血供的方法,建立围生期兔缺氧缺血脑损伤模型。选取健康的新西兰孕兔（孕29天,约占92.06%孕期）。麻醉成功后无菌手术,将4F Fogarty动脉导管插入动脉,并顺畅进入约10cm,此时球囊的位置正好在肾动脉开口下端和子宫动脉上端之间。注入0.3ml生理盐水以扩张球囊,阻断子宫血供。阻断开始到结束计时25分钟,回抽生理盐水,撤回导管,永久结扎动脉近端,逐层缝合关闭皮肤。24小时后孕兔一般情况良好情况下剖宫产取出幼兔,立即对新生兔进行一般情况记录、神经行为检查,测定血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平和脑组织含水量,使用免疫组织化学法观察海马CA1区裂解Caspase-3阳性细胞水平。2.在确立新生兔HIBD模型建立成功基础上,进一步研究PI3K/Akt信号通路是否参与HIBD的发病机制。将32只孕兔严格依照统计学上随机数字表的随机性原则,将其分成4组,每组8只,分别为Sham组（假手术组）、HIBD组（缺氧缺血组）、DMSO组（二甲基亚砜溶剂组）、LY294002组（PI3K/Akt通路抑制剂组）。假手术组只做股动脉结扎处理。DMSO组和LY294002抑制剂组分别为宫内缺氧后即刻通过孕兔耳缘静脉推注DMSO溶剂2ml或LY294002（6.4μg/Kg,由DMSO溶剂定容为2ml）。应用荧光定量PCR和Western Blot法检测PI3K/Akt信号途径相关蛋白和凋亡基因表达。采用SPSS22.0软件进行上述各组相关指标的统计分析。结果:1.成功建立围生期兔HIBD模型,适用于缺氧急性期神经信号传导机制研究。在新生家兔中,HIBD与Sham组相比,（1）各项神经学评分降低:姿势评分（1.62±0.51∝2.75±0.46,P<0.05）、翻正反射评分（1.50±0.54∝2.75±0.46,P<0.05）、吸吮吞咽反射评分（1.35±0.71∝2.75±0.46,P<0.05）;（2）血清NSE水平（1.28±0.18pg/L∝0.32±0.13pg/L,P<0.05）;（3）脑含水量（89.52±0.15%∝88.18±0.22%,P<0.05）升高;（4）脑组织病理示:HIBD组细胞数量减少,细胞核染色不均匀,核固缩;海马CA1区裂解caspase‐3阳性细胞增多。（5）HIBD组新生兔在生后24小时内死亡率较高,幸存新生兔在生后3天时姿势、翻正反射次数、翻正反射评分（分别为:2.63±0.50,9.00±1.41,2.63±0.50）仍低于Sham组（all P<0.05）,生后7天时仅体重低于Sham组（66.27±9.2g∝86.00±13.94g,t=5.309,P<0.05）,神经行为反射已完全恢复正常。2.PI3K/Akt信号通路参与了新生兔HIBD及其发病机制本实验研究结果表明:缺氧缺血抑制PI3K/Akt信号通路,HIBD组与Sham组相比PI3K的蛋白质水平（0.68±0.07 pg/L∝1.28±0.08 pg/L,P<0.05）和Akt磷酸化程度（0.50±0.06%∝0.85±0.07%,P<0.05）降低;Bcl-2 m RNA表达减少（0.72±0.05 pg/L∝1.10±0.02 pg/L,P<0.05）,BAD和Bax m RNA表达增加（分别为1.59±0.08 pg/L∝1.00±0.03 pg/L;1.48±0.07 pg/L∝1.05±0.02 pg/L,均P<0.05）,Akt、BAD磷酸化程度降低（分别为0.50±0.06∝0.85±0.07%,0.42±0.05∝0.78±0.06,均P<0.05）。3.调控PI3K/Akt信号通路可修复新生兔HIBD神经损伤的及其机制本实验研究结果显示:（1）LY294002组与HIBD组相比进一步增加了胎儿死亡率（35.4%∝12.30%,P<0.05）;（2）LY294002降低缺氧后新生兔的神经行为评分,与HIBD组相比,姿态评分（0.88±0.24∝1.62±0.51,P<0.05）、翻正反射评分（0.75±0.07∝1.50±0.54,P<0.05）、吞咽反射评分（0.75±0.07∝1.35±0.71,P<0.05）均减低;（3）LY294002组与HIBD组相比,NSE（1.75±0.14 pg/L∝1.28±0.18 pg/L,P<0.05）和脑含水量（89.92±0.28%∝89.52±0.15,P<0.05）增加;（4）脑组织病理学显示LY294002组海马区脑损伤程度加重,细胞数量明显减少;LY294002组与HIBD组相比,可增加HIBD裂解Caspase-3阳性细胞表达（27.54±2.68%∝20.61±2.16%,P<0.05）;增强神经元对HIBD的凋亡反应（AI:36.48±1.43∝32.56±2.08,P<0.05）;（5）LY294002组与HIBD组相比,Bcl-2 m RNA的表达（0.44±0.03 pg/L∝0.72±0.05 pg/L,P<0.05）,增加Bad和Bax m RNA的表达（分别为1.92±0.09pg/L∝1.59±0.08pg/L,1.86±0.06pg/L∝1.48±0.07pg/L,P<0.05）。LY294002组p-BAD/t-BAD和Bcl-2/Bax蛋白水平比值均低于HIBD组（分别为0.28±0.02∝0.42±0.05,0.41±0.04∝0.74±0.07,P<0.05）。结论:1.围生期兔HIBD的模型成功建立,可作为新生儿HIBD早期分子机制和干预方法的研究。2.本研究发现缺氧抑制了PI3K/Akt信号通路的活化,证明该通路参与了新生兔HIBD发病机制。3.PI3K/Akt信号可减少HIBD神经元凋亡发挥神经保护作用。PI3K/Akt信号通路可作为修复神经功能损伤的治疗靶点之一。
冯祝婷[7]（2018）在《基于NOD2/RIP2/NF-κB信号通路研究柚皮素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用》文中进行了进一步梳理目的:探讨柚皮素（Naringenin,NG）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用及其机制。方法:1.观察HIE模型中NOD2蛋白在脑组织中的表达随时间的变化规律。40只7日龄SD大鼠,雌雄不限,随机分为2组,假手术组（Sham,n=8）、HIE模型组（HIBD,n=32）,模型组于建模型后12h、24h、48h和72h分别取标本,采用蛋白质印迹法检测NOD2蛋白的表达。2.柚皮素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用研究。96只7日龄SD大鼠,雌雄不限,随机分为4组,每组24只,假手术组（Sham）、HIE模型组（HIBD）、柚皮素低剂量组(50mg·kg-1,NG-L)和柚皮素高剂量组(100 mg·kg-1,NG-H)。建模48 h后采用Longa评分法对各组新生大鼠进行神经功能缺陷评分,HE染色观察各组新生大鼠脑组织病理学改变,干湿重法检测各组新生大鼠脑含水量,蛋白质印迹法测定各组新生大鼠缺氧缺血侧脑组织中NOD2、RIP2和NF-κB蛋白的表达,酶联免疫吸附法检测脑组织中炎症因子TNF-α和IL-1β的表达。3.研究柚皮素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用机制。40只7日龄新生SD大鼠,雌雄不限,随机分为5组,每组8只,假手术组（Sham）、HIE模型组（HIBD）、MDP（NOD2受体激动剂）组、MDP+柚皮素组(100 mg·kg-1,MDP+NG)和柚皮素组(100mg·kg-1,NG),建模48 h后取标本,蛋白质印迹法测定缺氧缺血侧脑组织NOD2、RIP2和NF-κB蛋白的表达。结果:1.HIE模型中NOD2蛋白在脑组织中的表达随时间的变化显示:与假手术组相比较,模型组各时间点NOD2蛋白的表达均明显上调,且于24hNOD2蛋白的表达量达到最高,48h和72hNOD2蛋白的表达量较24h有下降,但仍具有显着性差异（P<0.05）。2.柚皮素的保护作用研究显示:假手术组新生大鼠无神经功能缺陷症状。与假手术组相比较,模型组神经功能缺陷评分最高,新生大鼠神经功能缺陷明显,病理学损伤严重,脑含水量明显增多;与模型组相比较,柚皮素低、高剂量组神经行为学指标评分下降,病理学损伤减轻,新生大鼠脑含水量明显减少（P<0.05）;蛋白质印迹结果显示,与假手术相比较,模型组NOD2、RIP2和NF-κB蛋白表达显着增多,与模型组比较,柚皮素低、高剂量组新生大鼠脑组织NOD2、RIP2和NF-κB蛋白表达下调（P<0.05）;ELISA测定结果显示:与假手术组相比较,模型组TNF-α和IL-1β在脑组织中含量显着升高;柚皮素低、高剂量组TNF-α和IL-1β在脑组织中含量低于模型组（P<0.05）。3.机制研究结果显示:与模型组相比较,MDP组NOD2、RIP2和NF-κB蛋白表达上调,柚皮素组NOD2、RIP2和NF-κB蛋白表达下调（P<0.05）。结论:HIE模型在12h、24h、48h和72h中24hNOD2蛋白的表达量达到最高;柚皮素(50 mg·kg-1,100 mg·kg-1)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有保护作用;其机制可能是:柚皮素下调NOD2、RIP2和NF-κB蛋白的表达,并减少炎症因子TNF-α和IL-1β的分泌。
王春南[8]（2017）在《基于“脑为元神之府”理论研究电振系统对HIE临床疗效及IKB/NF-kB信号通路的影响》文中研究指明基于“脑为元神之府”的理论,进行临床试验及动物实验研究,以观察电振系统对缺血缺氧脑病的临床疗效以及探讨电振系统对脑IKB/NF-k B信号通路及其炎性反应因子的作用机制。通过临床研究及动物模型的实验研究,电针联合振动训练进行的两项实验,试验一为临床试验,通过头MRI影像学结合超声学评价HIE患儿的脑发育情况,结合Gesell、Alberta评价量表进行发育行为及运动行为疗效评估,采用肌肉超声测量HIE各组婴儿双侧下肢腓肠肌内侧头的肌肉横截面积对患儿的肌容积进行评价,并通过研究血清TNF-α、IL-6炎性因子的表达来阐述电振系统在治疗HIE患儿脑发育及运动行为中的临床疗效及对炎性因子的作用机制。实验二为动物实验,以动物行为学及脑组织形态学作为造模及疗效评价标准,观察电振系统对HIE乳鼠脑中IKB/NF-k B信号通路及炎性因子的表达的影响,探索炎性因子对HIE的致病机制以及电振系统的疗效产生机制。试验一电振系统对HIE患儿临床疗效及炎性因子表达影响的机制研究目的:采用Alberta运动量表与Gesell全身发育量表对HIE各组患儿进行评估测试,评价治疗前后的临床行为疗效;采用头MRI影像学结合超声学对各组治疗前后脑发育进行评价;采用肌肉超声测量双侧下肢腓肠肌内侧头的肌肉横截面积评定各组患儿的肌肉发育情况;采用ELISA方法检验血清中TNF-α及IL-6含量。通过综合分析临床疗效及血清炎症因子的变化,探讨电振系统治疗对HIE患儿神经行为发育及脑发育的影响。材料与方法:在2015年6月-2016年6月在沈阳市儿童医院神经康复科住院的80例HIE足月儿。其中男孩50名,女孩30名。按照随机数字表法将入院患儿随机分为电针组20例、振动组20例、训练组20例、电振组20例。于治疗前及分组治疗2个月后应用Alberta运动量表与Gesell全身发育量表对HIE患儿行为学进行评价;根据新生儿缺血缺氧性脑病MRI及超声测量侧脑室扩张程度对各组进行脑发育评价;采用肌肉超声测量各组患儿双侧下肢腓肠肌内侧头的肌肉横截面积;采用ELISA法检测各组患儿血清TNF-α、IL-6含量。结果:1各组治疗前后Albert婴儿运动量表比较各组患儿治疗前Albert运动量表分值无明显差异（P>0.05）;治疗2个月后,各组Albert运动量表分值均有升高（P<0.05）,其中电振组升高最显着,高于其它各组,差异具有统计学意义（P<0.05）;与电针组相比较,振动组及训练组分值升高不显着,具有统计学差异（P<0.05）;振动组分值显着高于训练组,具有统计学差异（P<0.05）。2各组治疗前后Gesell运动发育量表比较各组患儿治疗前Gesell运动发育量表分值无明显差异（P>0.05）;治疗2个月后,各组Gesell运动发育量表分值均有升高,但只有电振组及电针组分值升高显着,与治疗前相比较,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗2个月后,与电振组相比,振动组与训练组Gesell分值升高不明显,差异具有统计学意义（P<0.05）;与电针组相比较,振动组与训练组分值升高不显着,具有统计学差异（P<0.05）。3腓肠肌最大横截面积结果比较治疗后电振组左、右侧腓肠肌内侧头最大横截面积均大于其它各组,差异有统计学意义（P<0.05）;与振动组比较,电针组及训练组左、右侧腓肠肌内侧头最大横截面积显着低于振动组,差异具有统计学意义（P<0.05）。4各组治疗前后头部MRI结果比较治疗前HIE患儿MRI可见严重的脑水肿,磁共振T1W2像可见脑实质呈弥漫性高信号伴脑室变窄,皮层下白质及深部脑白质斑点状和弯曲条状高信,内囊后肢信号异常,伴有脑出血、脑室出血及蛛网膜下腔出血,或伴有脑梗死,脑出血表现为相应供血区高信号,脑梗死表现为低信号。严重HIE可见基底节和丘脑改度,最常受累的部位是豆状核,其次是苍白球和丘脑腹外侧,表现为斑片状对称性T1W1不均匀高信号。经治疗2个月后,各组患儿不同程度脑室系统及脑沟增大、增宽,白质范围变小,蛛网膜下腔增宽。脑室旁白质软化:呈局灶性T2WI点片状高信号,脑室边缘不光整,胼胝体变薄。电针组脑室系统及脑沟增大及增宽较其他组减轻,脑室旁白质软化范围减小,白质范围增多。未形成空洞及大面积多灶性白质软化。髓鞘化程度电振及电针组优于振动及训练组。训练组可见脑梗死及空洞形成:T1WI低信号,T2WI表现为高信号,常位于基底节,皮层下白质等处。5各组治疗前后侧脑室体部超声测量值比较治疗2个月后,各组与治疗前比较,测量值均有减少,其中电振组测量值减少更显着。与电振组相比较,振动组与训练组测量值减少不显着,具有统计学差异（△P<0.05）。各组组内比较,电振组与电针组与治疗前比较,测量值显明显减少,具有统计学差异（▲P<0.05）。6各组治疗前后血清TNF-α、IL-6比较各组患儿治疗前血清TNF-α、IL-6含量均无明显差异（P>0.05）;治疗后,各组血清TNF-α、IL-6含量均有降低（P<0.05）;其中电振组降低最明显,与其它各组比较,统计学均具有差异性（P<0.05）;与电针组相比较,训练组及振动组TNF-α、IL-6含量降低不显着,具有统计学意义（P<0.05）;与振动组相比较,训练组血清IL-6含量降低不显着,差异具有统计学意义,（P<0.05）结论:1.缺血缺氧可以引起IL-6与TNF-α的高表达以及明显的脑损伤,临床上造成明显的神经行为异常和发育迟滞。2.电振系统及振动治疗可以提高肌容积,防止肢体肌肉萎缩,进而提高运动能力。3.电振系统及电针治疗对侧脑室的扩张度的降低优于其它各组。4.电振系统治疗对IL-6与TNF-α表达的降低及神经行为的改善优于其它治疗组。5.阐释了“脑为元神之府”的部分科学内涵。实验二电振系统对缺血缺氧性脑病乳鼠IKB/NF-k B信号通路及运动功能影响的实验研究目的:采用Bederson量表评价乳鼠神经行为,作为HIE建模标准及疗效标准;采用肌肉超声技术观察乳鼠的肌容积。采用ELISA法测定坏死脑组织中TNF-α及血清中IL-1、IL-6、TNF-α的含量,探讨电振疗法对上述炎性因子的影响;采用HE染色法观察治疗前后HIE缺血坏死脑组织的形态及结构变化;采用免疫组化及Westen Blot法检测HIE胎鼠IKB、NF-k BP65的蛋白表达;采用实时定量Q-PCR法检测IKB、NF-k BP65的基因表达。探讨电振系统对IKB/NF-k B信号通路的作用机制,阐释脑为元神之府的生物学基础。材料与方法:将按要求选取的201只健康7日龄SD新生乳鼠按随机数字表法随机分成假手术组、模型组、电针组、振动组以及电振组,除假手术组外,其余四组乳鼠建立HIE乳鼠模型,以翻身不能,平衡异常（向患侧倾斜）者视为模型评价标准。根据Bederson评分,对乳鼠神经行为进行评价、在造模后及治疗2周后采用肌肉超声技术分别测量各组乳鼠左侧后肢最大横截面积,测定肌肉容积。在建模前、建模后24h以及干预2周后,开腹,取腹主动脉血液,离心分离血清,将乳鼠断头处死,分离缺血坏死区脑组织。采用ELASA方法检测乳鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α含量以及脑组织TNF-α含量;采用HE染色方法,观察各组缺血坏死脑组织形态及结构变化;采用免疫组化及Westen blot法检测HIE乳鼠IKB/NF-KB信号通路中IKB、NF-k BP65的蛋白表达;采用实时定量Q-PCR法检测IKB/NF-KB信号通路中IKB、NF-KBP65的基因表达。结果:1各组神经行为评分变化比较在建模前各组乳鼠的神经行为均无明显异常;在建模后各组乳鼠的神经行为均出现明显的瘫痪性表现,神经行为评分显着升高（P<0.05）;干预治疗后,电振组、电针组、振动组各乳鼠的神经行为评分均有不同程度的降低,与建模24h后比较,具有显着性差异（P<0.05）。其中以电振组乳鼠的神经行为评分降低最明显,电针组与振动组与其相比较,行为评分降低不显着,具有统计学差异（P<0.05）。2各组左侧后肢肌肉最大横截面积结果比较与建模后24小时各组内比较,治疗2周后,电针组、振动组及电振组左侧后肢肌肉最大横截面积均有显着增加,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,治疗2周后,电针组、电振组、振动组最大横截面积增加显着,具有统计学差异（P<0.05）;与电针组比较,振动组及电振组最大横截面积增加显着,具有统计学差异（P<0.05）;与电振组比较,电针组最大横截面积小于电振组,有统计学差异（P<0.05）。3各组血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量结果比较建模前各组乳鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α均呈极低表达水平,无明显差异;建模24h后除假手术组其它各组乳鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平显着升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;在干预治疗2周后,与模型组比较,电振组、电针组、振动组血清IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平均有不同程度的下降,具有统计学差异（P<0.05）。其中电振组血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低最显着,电针组血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量低于振动组,差异均有统计学意义（P<0.05）。4各组脑组织TNF-α含量结果比较建模前各组乳鼠脑组织TNF-α均呈极低表达水平;在建模24h后,除假手术组其它各组乳鼠脑组织TNF-α表达水平均显着升高,具有显着性差异（P<0.05）;在治疗2周后,电振组、电针组、振动组脑组织TNF-α表达水平明显下降,差异具有统计学意（P<0.05）,且电振组脑组织TNF-α显着低于电针组及振动组,差异有统计学意义（P<0.05）。5脑组织形态学测定结果比较假手术组乳鼠脑组织结构正常,胞浆丰满,胞核清晰可见。经HIE造模后侧脑室旁白质胶质细胞胞体肿胀明显,细胞排列紊乱,部分细胞核萎缩后消失,间质组织疏松水肿,毛细血管痉挛、血管扩张血肿,细胞充血坏死,周围见明显空白带。经治疗2周后,电针组、振动组及电振组脑组织形态学均有一定程度改善,其中电振组充血细胞坏死减少,细胞排列及形态基本正常。电针组及振动组仍有少量细胞源变性,存在部分损伤细胞,细胞排列较紊乱。6脑组织中IKB、NF-k B p65的免疫组化表达结果比较假手术组有极少量IKB、NF-k B p65表达,HIE造模24小时后大脑白质细胞胞浆内IKB、NF-k B p65表达达到高峰,胞浆深染,阳性细胞增多,白质疏松,阳性细胞聚集。治疗2周后,与模型组相比,电针组及电振组脑组织中IKB、NF-k B p65免疫组化表达均有所下降,差异均有统计学意义（P<0.05）;与电振组相比,振动组IKB、NF-k B p65免疫组化表达与电振组有差异,具有统计学意义（P<0.05）;与电针组相比较,电振组免疫组化表达显着降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。7脑组织IKB、NF-k B p65基因检测结果比较各组乳鼠在建模后各组脑组织中IKB、NF-k B p65基因表达量显着上升;在干预治疗2周,接受治疗的3组乳鼠脑组织IKB、NF-k B p65基因表达量均见减少,且电振组脑组织IKB、NF-k B p65基因表达量显着少于其它组;与电振组比较,电针组与振动组的基因表达降低量少于电振组,差异具有统计学意义（P<0.05）;与电针组相比,振动组基因表达量显着降低,具有统计学意义（P<0.05）。8脑组织IKB、NF-k B p65的蛋白表达结果比较各组乳鼠在建模后各组脑组织中IKB、NF-k B p65蛋白表达量显着上升;在干预治疗2周,接受治疗的3组乳鼠脑组织IKB、NF-k B p65蛋白表达量均见减少,与模型组相比,均具有统计学意义（P<0.05）。电振组脑组织IKB、NF-k B p65蛋白表达量显着少于电针组及振动组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.缺血缺氧激活IKB/NF-k B信号通路及炎性因子的高表达是造成HIE脑损伤的病理基础2.之一。2.电振系统能下调IKB/NF-k B信号通路及炎性因子IL-6与TNF-α的高表达。3.HIE乳鼠存在明显的脑损伤及神经行为学异常,电振系统能明显改善乳鼠脑损伤及异常的神经行为。4.电振系统治疗及振动治疗可以维持乳鼠肌肉横截面积,防止肌肉萎缩,提高运动能力。
蔡丹[9]（2015）在《依达拉奉联合参麦注射液对窒息新生鼠的心肌保护作用》文中研究表明目的:1、探讨新生鼠窒息缺氧过程中,心肌是否存在p38MAPK信号通路的激活。2、探讨依达拉奉及参麦注射液对窒息新生鼠心肌的保护作用及其可能的机制。3、探讨单用及联合使用依达拉奉、参麦注射液对窒息新生鼠心肌的作用效果。方法:1、实验分组及模型建立:按随机数表法将50只7日龄新生SD大鼠分为对照组（10只）、窒息组（10只）、Eda组（10只）、参麦组（10只）、Eda+参麦组（10只）。分别将新生鼠置于内装有钠石灰的磨口瓶中（容积55ml）,安静后用凡士林涂抹瓶口,密闭30分钟后立即取出,对照组不密封。2、给药方法:模型建立成功后3分钟内分别经腹腔分两部位给予参麦注射液2ml/kg、依达拉奉2mg/kg及生理盐水4ml/kg,复氧120分钟后立即取标本（血液、心肌组织）。3、观察指标:血清CK、LDH水平;心肌HE染色病理形态学改变;心肌组织p-p38MAPK及Bcl-2蛋白表达含量（免疫组织化学染色法）;定性及定量分析心肌细胞凋亡（Tunel法）。结果:1、血清心肌酶CK、LDH值比较:与对照组相比,其余各组CK、LDH值均显着升高（P<0.01）。与窒息组相比,参麦组、Eda组及Eda+参麦组CK、LDH水平下降（P<0.05）,其中Eda组及Eda+参麦组CK水平明显低于参麦组（P<0.05）;Eda组与Eda+参麦组CK水平无差异（P>0.05）;参麦组、Eda组及Eda+参麦组LDH水平无统计学差异（P>0.05）。2、心肌组织HE染色:对照组细胞质均匀淡染,细胞核清晰,组织间质无水肿,少见炎性细胞浸润,心肌细胞排列整齐;窒息组部分细胞呈空泡样,细胞核不规则,呈浓缩状,部分核消失,间质明显充血水肿,大量炎性细胞浸润,心肌细胞排列紊乱,有部分肌纤维断裂。参麦组、Eda组及Eda+参麦组上述改变较窒息组明显减轻。3、心肌组织p-p38MAPK、Bcl-2蛋白表达:与对照组相比,其余各组p-p38MAPK、Bcl-2蛋白表达均显着升高（P<0.01）。与窒息组比较,参麦组、Eda组及Eda+参麦组p-p MAPK蛋白均下降（P<0.05～0.01）,而Bcl-2蛋白升高（P<0.05）,其中Eda组及Eda+参麦组p-p38MAPK蛋白水平明显低于参麦组（P<0.05）;Eda组与Eda+参麦组p-p38MAPK蛋白水平差异无统计学意义（P>0.05）,Bcl-2蛋白水平三者组间比差异无统计学意义（P>0.05）。4、心肌细胞凋亡荧光显色及凋亡指数（AI）结果比较:在荧光显微镜下,对照组仅有少量的绿色荧光,其余各组均较多,AI水平显着升高（P<0.01）。与窒息组相比,可见参麦组、Eda组及Eda+参麦组凋亡细胞荧光显色有所减少,AI水平显着下降（P<0.01）;其中Eda及Eda+参麦组AI水平明显低于参麦组（P<0.05）,但Eda与Eda+参麦组AI水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1、在新生鼠窒息心肌损伤中,存在p38MAPK信号分子的激活,p-p38MAPK蛋白水平增高,心肌细胞凋亡增加。2、依达拉奉、参麦注射液均可减少p38MAPK的活化,上调Bcl-2蛋白水平,减少窒息新生鼠心肌细胞凋亡,起到心肌保护作用。3、单用依达拉奉与依达拉奉联合参麦注射液对窒息新生鼠心肌保护作用优于单用参麦注射液治疗,单用依达拉奉与依达拉奉联合参麦注射液治疗其疗效无明显差异。
王海涛[10]（2012）在《益消复瘫汤治疗糖尿病并脑梗死的实验研究》文中研究表明目的：探讨糖尿病并脑梗死的病机治法，提出“气虚血瘀-瘀热生毒-毒损脑络”为糖尿病并脑梗死的主要病机，清热解毒益气活血法为其有效治疗方法，并应用临床确有疗效的导师经验方益消复瘫汤为治疗药物。研究糖尿病合并脑梗死的可能机制，观察糖尿病并脑梗死后神经损伤的影响，探讨益消复瘫汤治疗糖尿病并脑梗死的作用及机制。方法：应用SD大鼠高脂高糖饲料喂养4周联合小剂量STZ（30mg/kg）腹腔注射方法建立糖尿病模型，1周后筛选血糖合格（血糖≥16.7mmol/L）大鼠进行线栓法建立局灶性大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）脑梗死模型。应用益消复瘫汤高、低剂量为治疗组，并设假手术对照、单纯脑梗死组、单纯糖尿病组为对照，观察比较各组大鼠死亡率并分析死亡原因，行为学观察进行神经功能评分，脑组织TTC染色法计算梗死容积，干湿法计算脑组织含水量，应用尼氏染色观察海马CA1区神经元损伤，比色法计算脑组织匀浆髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性观察炎性细胞浸润情况，western blot方法检测脑组织炎症信号通路TLR4及其下游肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）蛋白表达。结果：糖尿病脑梗死组大鼠表现了更重的神经损伤，神经行为学评分、脑梗死容积、脑水肿程度、脑组织炎性浸润程度，TLR4、TNF-α、IL-1β表达均重于各对照组，益消复瘫汤能抑制糖尿病脑梗死大鼠TLR4信号通路，减少TLR4蛋白表达，降低TNF-α、IL-1β等炎症因子表达，降低脑组织MPO活性，减少梗死面积，发挥神经保护作用。结论：利用高脂高糖膳食联合小剂量STZ注射基础上进行线栓可成功建立糖尿病脑梗死模型，益消复瘫汤能抑制糖尿病脑梗死后的TLR4炎性信号通路，减少TLR4、TNF-α、IL-1β表达，降低脑组织MPO活性，减轻神经损伤，发挥脑保护作用。
二、窒息对新生大鼠脑组织含水量及IL-1β影响的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、窒息对新生大鼠脑组织含水量及IL-1β影响的实验研究（论文提纲范文）
（1）血塞通对MCAO大鼠和OGD/R损伤SH-SY5Y细胞LINGO-1，EGFR，PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 三七、三七总皂苷各成分对脑卒中的研究进展 |
| 1 中药三七和其成分的研究 |
| 2 三七总皂苷及其各成分对脑卒中的研究进展 |
| 3 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 LINGO-1及其下游信号通路在缺血性脑卒中后神经再生的机制研究 |
| 1 LINGO-1 |
| 2 EGFR |
| 3 PI3K//AKT |
| 4 PTEN |
| 5 GSK-3β |
| 6 PTE、AKT以及GSK-3β的关系 |
| 7 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 动物实验研究 |
| 实验一 大鼠MCAO模型的建立和评价 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 血塞通对MCAO大鼠术后28天LINGO-1,EGFR以及下游PI3K/AKT通路的作用 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 血塞通对MCAO大鼠术后28天PTEN和GSK-3β的作用 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 细胞实验研究 |
| 实验四 血塞通对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注损伤的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 附录 mNSS神经功能评分表 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（2）益母草碱对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词汇表 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 动物分组 |
| 2.2 试剂与仪器 |
| 2.2.1 实验试剂 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 建立HIBI 模型方法 |
| 2.3.2 新生大鼠脑含水量的测定 |
| 2.3.3 新生大鼠脑梗死比率的测定 |
| 2.3.4 脑组织SOD和 MDA的测定 |
| 2.3.5 脑组织TNF-α和IL-1β的测定 |
| 2.3.6 大脑皮层神经细胞凋亡率的测定 |
| 2.3.7 脑组织p-Akt、p-GSK3β、Bcl-2 和cleaved-caspase-3 的测定 |
| 2.4 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 新生大鼠行为改变 |
| 3.2 三组新生大鼠脑含水量和脑梗死比例 |
| 3.3 三组新生大鼠脑组织MDA 和SOD 水平 |
| 3.4 三组新生大鼠脑组织TNF-α和IL-1β水平 |
| 3.5 三组新生大鼠神经细胞凋亡率 |
| 3.6 三组新生大鼠大脑皮质p-Akt 和蛋白表达 |
| 3.7 三组新生大鼠大脑皮质Bcl-2和cleaved-caspase-3 蛋白表达 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 第六章 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 新生儿缺氧缺血性脑病的病理机制及治疗 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 |
（3）高氧诱导新生大鼠脑损伤的PET/CT表现及其对远期认知功能的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略词对照表 |
| 脑功能成像在新生儿高氧性脑损伤中的应用前景(综述) |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（4）TSPO在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 TSPO抑制剂调控 PPARγ通路对缺血、缺氧新生大鼠的神经保护作用 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二部分 TSPO通过PPARγ途径调控IL-4诱导的小胶质细胞/巨噬细胞M2极化 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 综述 小胶质细胞在中枢神经系统的功能及其靶向治疗药物的研究进展 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词 |
| 攻读学位期间公开发表论文 |
| 致谢 |
（5）1.EPO联合亚低温对HIE模型神经保护作用及机制研究 2.α-细辛醚抑制小胶质细胞介导炎症反应的抗癫痫作用研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 第一部分 EPO联合亚低温对HIE模型神经保护作用及机制研究 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一章 7日龄SD大鼠HIE模型的建立及评价 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二章 EPO联合亚低温对HIE模型大鼠神经保护作用及机制研究 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第一部分 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 α-细辛醚抑制小胶质细胞神经炎症反应的抗癫痫作用研究 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表论文 |
（6）调控PI3K/Akt信号通路对新生兔缺氧缺血脑损伤神经修复作用的研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（7）基于NOD2/RIP2/NF-κB信号通路研究柚皮素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
| 学位论文数据集 |
（8）基于“脑为元神之府”理论研究电振系统对HIE临床疗效及IKB/NF-kB信号通路的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 试验一 电振系统对HIE患儿临床疗效及炎性因子表达影响的机制研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二 电振系统对缺血缺氧性脑病乳鼠IKB/NF-kB信号通路及运动功能影响的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附表 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（9）依达拉奉联合参麦注射液对窒息新生鼠的心肌保护作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验主要试剂及药品 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.2 实验方法及步骤 |
| 2.2.1 主要试剂及药物配制 |
| 2.2.2 新生鼠常压窒息模型的建立 |
| 2.2.3 动物分组及药物干预 |
| 2.2.4 血清心肌酶CK、LDH的测定 |
| 2.2.5 心肌组织病理学HE染色 |
| 2.2.6 免疫组化法检测心肌组织p-p38MAPK、Bcl-2 蛋白表达 |
| 2.2.7 心肌细胞凋亡检测(Tunel 法) |
| 2.3 统计学方法 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 新生鼠窒息后的一般情况 |
| 3.2 各组新生鼠血清CK、LDH浓度变化 |
| 3.2.1 各组新生鼠血清CK浓度变化 |
| 3.2.2 各组新生鼠血清LDH浓度变化 |
| 3.3 各组新生鼠心肌组织病理形态学改变 |
| 3.4 各组新生鼠心肌组织p-p38MAPK、Bcl-2 蛋白表达的变化 |
| 3.4.1 各组新生鼠心肌p-p38MAPK蛋白IOD值变化 |
| 3.4.2 各组新生鼠心肌Bcl-2 蛋白IOD值变化 |
| 3.5 各组新生鼠心肌细胞凋亡的变化 |
| 3.5.1 各组心肌细胞凋亡定性观察 |
| 3.5.2 各组心肌细胞凋亡指数(AI)结果 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 缺氧与心肌损伤 |
| 4.2 缺氧与心肌细胞凋亡 |
| 4.3 P38MAPK、Bcl-2 与心肌细胞凋亡 |
| 4.4 依达拉奉的心肌保护作用 |
| 4.5 参麦注射液的心肌保护作用 |
| 4.6 依达拉奉联用参麦注射液对心肌的保护作用 |
| 第5章 结论 |
| 第6章 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 依达拉奉在新生儿疾病中的研究进展 |
| 参考文献 |
（10）益消复瘫汤治疗糖尿病并脑梗死的实验研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 清热解毒益气活血方益消复瘫汤治疗糖尿病脑梗死的理论探讨 |
| 一、 祖国医学对糖尿病脑梗死的认识沿革 |
| （一） 糖尿病脑梗死中医归属 |
| （二） 祖国医学对糖尿病脑梗死病因病机的认识 |
| （三） 导师对糖尿病脑梗死的中医认识 |
| 二、 益消复瘫复方探讨 |
| （一） 处方来源与依据 |
| （二） 方药组成 |
| （三） 组方配伍分析 |
| （四） 现代药理研究 |
| （五） 组方特点 |
| 第二部分 实验性糖尿病脑梗死模型的建立 |
| 一、 实验材料 |
| （一） 实验动物 |
| （二） 实验动物饲料配制 |
| （三） 主要实验试剂 |
| （四） 主要仪器与实验器械材料 |
| 二、 试验方法 |
| （一） 实验动物分组 |
| （二） 实验动物模型的制备 |
| （三） 模型评价观察指标 |
| （四） 数据分析和统计处理 |
| 三、 试验结果 |
| （一） 大鼠生存状态 |
| （二） 大鼠血糖水平 |
| （三） 神经功能评分 |
| （四） 脑梗死容积率的比较 |
| （五） 模型成功情况 |
| 四、 讨论 |
| （一） 国内外糖尿病脑梗死模型研究应用现状 |
| （二） 影响模型成功的因素 |
| （三） 小结 |
| 第三部分 益消复瘫汤对糖尿病脑梗死模型大鼠的脑保护作用 |
| 一、 实验材料 |
| （一） 实验动物 |
| （二） 实验动物饲料配制 |
| （三） 实验药物 |
| （四） 主要实验试剂 |
| 二、 试验方法 |
| （一） 实验动物分组及模型制作 |
| （二） 用药剂量及给药方式 |
| （三） 取材方法 |
| （四） 指标检测及方法 |
| （五） 统计学处理 |
| 三、 试验结果 |
| （一） 益消复瘫汤对糖尿病脑梗死大鼠基本生理参数的影响 |
| （二） 益消复瘫汤对糖尿病脑梗死大鼠脑损伤的影响 |
| 四、 讨论 |
| （一） 糖尿病合并脑梗死的病理基础 |
| （二） 糖尿病加重脑梗死后神经损伤的机制 |
| （三） 糖尿病脑梗死后的梗死后出血 |
| （四） 益消复瘫汤能减少糖尿病脑梗死损伤，具有脑神经保护作用 |
| 第四部分 益消复瘫汤对糖尿病脑梗死大鼠 TLR4 炎性通路的影响 |
| 一、 实验材料 |
| （一） 实验动物 |
| （二） 实验动物饲料配制 |
| （三） 实验药物 |
| （四） 主要实验试剂 |
| （五） 主要仪器与实验器械材料 |
| 二、 试验方法 |
| （一） 实验动物分组 |
| （二） 糖尿病脑梗死模型模型的制备及给药方法 |
| （三） 取材方法 |
| （四） 髓过氧化物酶（MPO）活性测定 |
| （五） Western-blot 方法测定 TLR4 炎性信号通路分子 |
| （六） 统计学处理 |
| 三、 试验结果 |
| （一） 益消复瘫汤对糖尿病脑梗死大鼠脑组织 MPO 活性的影响 |
| （二） 益消复瘫汤对糖尿病脑梗死大鼠脑组织 TNF-α的影响 |
| （三） 益消复瘫汤对糖尿病脑梗死大鼠脑组织 IL-1β的影响 |
| （四） 益消复瘫汤对糖尿病脑梗死大鼠脑组织 TLR4 蛋白表达的影响 |
| 四、 讨论 |
| （一） 糖尿病脑梗死后的炎性浸润 |
| （二） TLR4 炎症信号通路关键分子与糖尿病脑梗死 |
| （三） 益消复瘫汤降低 TLR4 炎症信号通路转导活性，发挥抗炎效应 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 文缩略词表 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 发表论文 |
| 详细摘要 |
四、窒息对新生大鼠脑组织含水量及IL-1β影响的实验研究（论文参考文献）
- [1]血塞通对MCAO大鼠和OGD/R损伤SH-SY5Y细胞LINGO-1，EGFR，PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的研究[D]. 周东蕊. 北京中医药大学, 2021(01)
- [2]益母草碱对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用及机制研究[D]. 杜宁. 大理大学, 2021(09)
- [3]高氧诱导新生大鼠脑损伤的PET/CT表现及其对远期认知功能的影响[D]. 白梦思. 西南医科大学, 2021(01)
- [4]TSPO在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用及机制研究[D]. 周丹丹. 苏州大学, 2020(06)
- [5]1.EPO联合亚低温对HIE模型神经保护作用及机制研究 2.α-细辛醚抑制小胶质细胞介导炎症反应的抗癫痫作用研究[D]. 赖馨. 重庆医科大学, 2019(01)
- [6]调控PI3K/Akt信号通路对新生兔缺氧缺血脑损伤神经修复作用的研究[D]. 罗智花. 安徽医科大学, 2020(01)
- [7]基于NOD2/RIP2/NF-κB信号通路研究柚皮素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用[D]. 冯祝婷. 贵州医科大学, 2018(07)
- [8]基于“脑为元神之府”理论研究电振系统对HIE临床疗效及IKB/NF-kB信号通路的影响[D]. 王春南. 辽宁中医药大学, 2017(05)
- [9]依达拉奉联合参麦注射液对窒息新生鼠的心肌保护作用[D]. 蔡丹. 南昌大学, 2015(01)
- [10]益消复瘫汤治疗糖尿病并脑梗死的实验研究[D]. 王海涛. 山东中医药大学, 2012(04)